烟粉虱MED隐种,抑制蛋白,耐药性,吡虫啉,RNA干扰," /> 烟粉虱MED隐种,抑制蛋白,耐药性,吡虫啉,RNA干扰,"/> Bemisia tabaci MED,arrestin,drug resistance,imidacloprid,RNA interference,"/>
昆虫学报 ›› 2019, Vol. 62 ›› Issue (10): 1129-1139.doi: 10.16380/j.kcxb.2019.10.002
梁金金1,2, 何超2, 刘少楠2, 谢文2, 张友军2,*
LIANG Jin-Jin1,2, HE Chao2, LIU Shao-Nan2, XIE Wen2, ZHANG You-Jun2,*
摘要: 【目的】明确烟粉虱Bemisia tabaci MED隐种抑制蛋白基因Btarrestin是否参与吡虫啉耐药性。【方法】根据已有烟粉虱转录组数据,利用RT-PCR克隆Btarrestin的全长序列,进行生物信息学分析。通过qPCR分析Btarrestin在烟粉虱MED隐种各个龄期(卵,1-2龄、3龄、4龄若虫,雌、雄成虫)以及吡虫啉处理(100 mg/L)后成虫中的表达量变化,明确其时空表达模式。利用RNAi技术沉默Btarrestin,观察沉默前后Btarrestin表达量和烟粉虱MED隐种成虫死亡率变化。【结果】成功克隆烟粉虱MED隐种Btarrestin的cDNA序列(GenBank登录号: MK204377),编码区全长1 227 bp,编码409个氨基酸,预测所编码的蛋白分子量约为45.33 kD,理论等电点(pI)为8.38。保守结构域分析表明,Btarrestin具有Arrestin_N和Arrestin_C两个超家族保守结构域,符合抑制蛋白家族特征。分子系统树分析表明,Btarrestin与褐飞虱Nilaparvata lugens的Arrestin亲缘关系最近。Btarrestin的表达量随烟粉虱MED隐种的生长发育逐渐升高,成虫期表达量最高。100 mg/L吡虫啉处理成虫24 h后Btarrestin的表达量较对照增加了2.39倍。RNAi干扰Btarrestin后进行生物测定,烟粉虱MED隐种成虫的死亡率上升了31.27%。【结论】Btarrestin可能与烟粉虱MED隐种对吡虫啉的耐药性有关。