›› 2017, Vol. 60 ›› Issue (5): 505-512.doi: 10.16380/j.kcxb.2017.05.002
唐芬芬1, 2, 郑亚强1, 白兴荣2,*, 陈斌1,*
TANG Fen-Fen1, 2, ZHENG Ya-Qiang1, BAI Xing-Rong2,*, CHEN Bin1,*
摘要: 【目的】探讨短时热激对家蚕Bombyx mori抵抗核型多角体病毒能力的影响,为深入研究家蚕热激响应的抗病毒免疫机制提供参考。【方法】家蚕5龄幼虫42℃热激15 min后,经口喂食家蚕核型多角体病毒(Bombyx mori nucleopolyhedrovirus, BmNPV)(5.4×106 PIBs/头)后正常饲养,观察热激对家蚕感染病毒的影响;同时,利用实时荧光定量RT-PCR技术检测热激后7类抗菌肽主基因(BmcecD, Bmmor, Bmglve2, BmdefeB, Bmatta1, Bmenbo2和Bmlebo3)以及6种热激蛋白基因(Bmhsp90, Bmhsp70, Bmhsp40, Bmhsp19.9, Bmhsp21.4和Bmhsp25.4)在家蚕5龄幼虫中肠组织中的表达变化;利用MEGA 5.0软件对家蚕所有热激蛋白进行系统进化分析。【结果】与未进行热激处理相比,短时42℃热激能够明显提高感染BmNPV的家蚕5龄幼虫的存活率。实时荧光定量RT-PCR结果表明,与未热激处理相比,热激处理后感染BmNPV的家蚕5龄幼虫中肠组织中Bmglve2和Bmhsp25.4的表达量显著上升。另外,系统进化分析显示,小分子热激蛋白BmHSP25.4在进化上特殊,单独与大分子热激蛋白(BmHSP90, BmHSP70和 BmHSP40)聚为一类。【结论】短时热激能够提高家蚕对BmNPV的抗性,热激蛋白基因Bmhsp25.4和抗菌肽基因Bmglve2可能在家蚕热激响应的抗病毒免疫中发挥关联功能。