昆虫学报 ›› 2022, Vol. 65 ›› Issue (1): 44-52.doi: 10.16380/j.kcxb.2022.01.005
张方梅1, 2, 闫艺1, 程登发1, 朱勋1, 张云慧1,*, 李祥瑞1,*
ZHANG Fang-Mei1, 2, YAN Yi1, CHENG Deng-Fa1, ZHU Xun1, ZHANG Yun-Hui1,*, LI Xiang-Rui1,*
摘要:
【目的】探讨麦长管蚜Sitobion avenae 9个微小RNA(microRNA, miRNA)在两翅型间不同发育阶段的表达模式,揭示其在蚜虫翅型分化中发挥作用的关键时期。【方法】RT-PCR克隆麦长管蚜内参基因U6的cDNA全长序列和9个miRNA,并利用qRT-PCR方法检测9个miRNA在有翅和无翅麦长管蚜不同发育阶段(伪胚胎、1-4龄若蚜和成蚜)的表达。【结果】麦长管蚜U6的cDNA全长为92 bp,与其他昆虫的U6 cDNA序列一致性达80%以上。qRT-PCR结果表明,大部分miRNA在伪胚胎期及若蚜期的相对表达量均较低,在成蚜期相对表达量较高。6个miRNA(miR-277, miR-9a, miR-7, Let-7, miR-1和miR-315)在有翅成蚜中的相对表达量高于无翅成蚜中的; miR-277和miR-9a在有翅成蚜期的相对表达量较高;除miR-315外,miR-277, miR-9a, miR-7, Let-7和miR-1在成蚜期的相对表达量在两翅型间均呈显著差异,且miR-9a在伪胚胎期和miR-315在3龄若蚜期相对表达量在两翅型间也差异显著。其他3个miRNA(miR-8, PC-3p-2743_844和PC-5p-113190_15)在无翅成蚜中的相对表达量高于有翅成蚜中的,其中miR-8和PC-3p-2743_844在有翅成蚜和无翅成蚜期相对表达量显著高于在其他发育阶段,而PC-5p-113190_15的在无翅蚜3龄若蚜期显著高于在其他发育阶段; miR-8在成蚜期以及PC-3p-2743_844在伪胚胎和成蚜期的相对表达量在两翅型间差异显著, PC-5p-113190_15在3龄若蚜期的相对表达量在两翅型间差异极显著。【结论】麦长管蚜内参基因U6与其他昆虫的U6 cDNA序列具有高度保守性。表达谱分析显示,9个miRNA可能在伪胚胎或成虫阶段在麦长管蚜翅型分化中起调控作用。