家蚕丝氨酸蛋白酶抑制剂基因serpin-6的克隆、序列分析和组织表达

›› 2009, Vol. 52 ›› Issue (1): 1-9.

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家蚕丝氨酸蛋白酶抑制剂基因serpin-6的克隆、序列分析和组织表达

刘衬丽，王东，李兵，管京敏，俞燕芳，査宏贤，许雅香，沈卫德

出版日期:2009-01-20 发布日期:2009-01-20
通讯作者: 许雅香

Molecular cloning, sequence analysis and tissue expression of serpin-6 gene in Bombyx mori

Online:2009-01-20 Published:2009-01-20

摘要/Abstract

摘要： 本文利用RT-PCR和RACE方法，获得了家蚕Bombyx mori丝氨酸蛋白酶抑制剂基因（serpin）的开放读码框(ORF) 和5′UTR序列。根据该基因与其他昆虫serpin的同源性关系将其命名为家蚕serpin-6 基因，GenBank登录号EU159447。为了研究serpin-6与家蚕免疫反应的相关机理，对serpin-6基因的组织表达和免疫刺激反应进行了研究。结果表明该基因在家蚕的头部和生殖腺中mRNA表达量非常高，在中肠，脂肪体，丝腺和血淋巴表达量较低。用脂多糖(LPS) 刺激5龄第3 d家蚕后，serpin-6基因在脂肪体和血淋巴中都被显著诱导表达，且都在刺激6 h后表达量最高。推测该基因在家蚕细胞免疫反应中起着一定的作用。

关键词: 家蚕, serpin-6, 基因克隆, 半定量RT-PCR, 组织表达, 免疫反应

Abstract: The ORF and the 5′UTR sequences of serpin were cloned from Bombyx mori using RT-PCR and rapid amplification of cDNA ends (RACE) strategies. We named this gene as serpin-6 of B. mori, which was deposited in GenBank with the accession no. EU159447. In order to study the mechanism of immunity of serpin-6 from B. mori, we performed the tissue expression and detected the immunity response. The results of semi-quantitative RT-PCR showed that the mRNA of this gene was highly expressed in head and gonads, and lowly expressed in the midgut, fat body, silk glands and haemolymph. When day-3 fifth instar larvae were injected with LPS, the RT-PCR results showed that this gene was highly induced and it was highly expressed in the fat body and haemolymph, and the highest expression was at 6 h after injection. It is inferred that this serpin gene may play an important role in immunity of B. mori.

Key words: Bombyx mori, serpin-6, gene cloning, semi-quantitative RT-PCR, tissue expression, immune reaction

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Molecular cloning, sequence analysis and tissue expression of serpin-6 gene in Bombyx mori

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