摘要:
【目的】吡哆醛激酶(pyridoxal kinase, PLK, EC 2.7.1.35)是维生素B6的关键代谢酶。本研究原核表达家蚕Bombyx mori重组PLK, 为进一步开展家蚕PLK的催化作用机制和表达调控机制的研究奠定基础。【方法】构建家蚕PLK基因融合表达质粒, 转化大肠杆菌Escherichia coli诱导表达, 经Ni2+ 亲和层析纯化后, 对融合蛋白的催化活性进行分析。【结果】纯化后的家蚕重组PLK经SDS-PAGE鉴定为单一条带, 比活力为1 800 U/mg, 纯化倍数为40倍。在底物过量的条件下, 该重组酶的体外最适反应温度是50℃; 最适pH为5.5~6; Zn2+ 是酶促反应有效的激活剂。【结论】重组家蚕PLK与来源于家蚕组织的PLK具有相同的催化性质。
张平平, 张剑韵, 黄龙全. 家蚕吡哆醛激酶的融合表达与纯化[J]. , 2010, 53(9): 957-961.
ZHANG Ping-Ping. Fusion expression and purification of pyridoxal kinase of Bombyx mori[J]. , 2010, 53(9): 957-961.