摘要:
用正交试验法研究了酶浓度、底物浓度、反应体系的pH值、反应温度和反应时间5个因素对测定意大利蜜蜂Apis mellifera ligustica Spinola头部乙酰胆碱酯酶(AChE)活性的影响, 并从试验组合中选出最佳条件。蜜蜂AChE活性的测定采用Gorun(1978)改进的Ellman方法, 以碘化硫代乙酰胆碱(ATCI)为底物, 5, 5' 二硫双硝基苯甲酸(DTNB)为显色剂, 测定反应物在412 nm波长下的光密度值, 用考马斯亮蓝G-250法测定蛋白质含量, 经计算得到蜜蜂头部AChE的比活力。对正交试验结果进行极差分析和方差分析, 结果表明各因素对实验结果影响的大小顺序为:温度>pH值>时间>酶浓度>底物浓度。并得出测定蜜蜂头部AChE活性的最佳条件是:酶终浓度0.2头/mL、底物终浓度0.8 mmol/L、pH值7.5、温度40℃及反应时间5 min。
张莹,黄建,高希武. 正交试验法确定测定意大利蜜蜂头部乙酰胆碱酯酶反应的最佳条件[J]. , 2005, 48(4): 627-632.
ZHANG Ying,HUANG Jian,GAO Xi-Wu. The optimization of conditions for assaying activity of acetylcholinesterase from the Italian honeybee (Apis mellifera ligustica Spinola) by orthogonal matrix method[J]. , 2005, 48(4): 627-632.