酵母双杂交筛选华北大黑鳃金龟触角均一化cDNA文库

›› 2013, Vol. 56 ›› Issue (10): 1127-1134.doi:

酵母双杂交筛选华北大黑鳃金龟触角均一化cDNA文库

王冰，尹姣，李克斌，曹雅忠^*

(中国农业科学院植物保护研究所，植物病虫害生物学国家重点实验室，北京 100193）

出版日期:2013-10-20 发布日期:2013-10-20

Screening of the normalized cDNA library from Holotrichia oblita (Coleoptera: Scarabaeida) antennae using yeast two-hybrid system

WANG Bing, YIN Jiao, LI Ke-Bin, CAO Ya-Zhong^*

(State key laboratory for Biology of Plant Disease and Insect Pest, Institute of Plant Protection, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100193, China)

Online:2013-10-20 Published:2013-10-20

摘要/Abstract

摘要： 昆虫错综复杂的嗅觉系统在昆虫寻找寄主、交配、产卵以及逃避行为中起到了至关重要的作用。因此，对昆虫嗅觉感受机理的研究将有助于揭开昆虫感受和识别环境中的气味物质并引起相关行为反应的秘密。为了更多地了解华北大黑鳃金龟Holotrichia oblita Faldermann 嗅觉相关蛋白互作机制，本实验利用DUALhunter Starter Kits酵母双杂交筛选试剂盒，构建了华北大黑鳃金龟气味结合蛋白OBP2诱饵载体，筛选了华北大黑鳃金龟触角酵母双杂交系统均一化的cDNA文库。通过β-半乳糖苷酶活性检测以及GenBank中Blast比对分析，以OBP2为诱饵鉴定出6个阳性互作物。我们推测其中的一种较强的阳性互作物凝固酶原可能是华北大黑鳃金龟在嗅觉识别过程中的相关蛋白。

关键词: 华北大黑鳃金龟, 气味结合蛋白, 蛋白互作, 酵母双杂交, 文库筛选

Abstract: The sophisticated olfactory system of insects plays a crucial role in their behaviors, such as host seeking, mating, oviposition, as well as escaping behaviors. Therefore, the mystery of arousing a series of insect behavior reactions by perceiving and distinguishing odorants in the environment will be unveiled by investigating olfactory receptive mechanism. In order to clarify the mechanism of interaction between olfactory associated proteins in Holotrichia oblita Faldermann, the HoblOBP2 bait was constructed using DUALhunter Starter Kits. Then, the normalized cDNA library from H. oblita antennae was screened. By detecting β-galactosidase activity and the Blast analysis in GenBank, six interactors were identified using HoblOBP2 bait. We inferred that the proclotting enzyme is the strongest positive interactor, which might play a role in the process of olfactory recognition.

Key words: Holotrichia oblita, odorant binding proteins, protein interaction, yeast two-hybrid system, library screening

王冰，尹姣，李克斌，曹雅忠. 酵母双杂交筛选华北大黑鳃金龟触角均一化cDNA文库[J]. , 2013, 56(10): 1127-1134.

WANG Bing, YIN Jiao, LI Ke-Bin, CAO Ya-Zhong. Screening of the normalized cDNA library from Holotrichia oblita (Coleoptera: Scarabaeida) antennae using yeast two-hybrid system[J]. , 2013, 56(10): 1127-1134.

0
/ / 推荐

导出引用管理器 EndNote|Reference Manager|ProCite|BibTeX|RefWorks

链接本文: http://www.insect.org.cn/CN/

http://www.insect.org.cn/CN/Y2013/V56/I10/1127

[1]	陈秀琳, 苏丽, 陈丽慧, 李怡萍, 仵均祥, 李广伟. 梨小食心虫Minus-C气味结合蛋白的分子克隆、表达谱及结合特性分析[J]. , 2018, 61(7): 771-783.
[2]	司品法, 周琼, 崔中翌 . 柑橘大实蝇气味结合蛋白基因BminOBP25的克隆、原核表达及组织表达分析[J]. , 2018, 61(5): 537-545.
[3]	热孜宛古丽·阿卜杜克热木, 曹雅忠, 张帅, 尹姣, 李雪, 李克斌. 华北大黑鳃金龟成虫对三种植物的取食选择及趋性行为反应[J]. , 2018, 61(5): 585-595.
[4]	杨海博, 胡镇杰, 李定旭, 朱品红, 董钧锋. 悬铃木方翅网蝽触角气味结合蛋白基因鉴定[J]. , 2018, 61(10): 1121-1131.
[5]	史宗畔, 冉永红, 张晶晶, 张静, 闫振天, 陈斌, 何正波. 中华按蚊气味结合蛋白AsinOBP1与避蚊胺（DEET）的结合特性分析[J]. , 2018, 61(1): 139-148.
[6]	李兆群, 张帅, 周淑芬, 雒珺瑜, 崔金杰. 棉铃虫气味结合蛋白HarmOBP16的组织表达谱及配基结合特性分析[J]. , 2017, 60(8): 891-899.
[7]	杨叶青, 王山宁, 彭勇, 单双, 郑瑶, 李瑞军, 张永军, 郭予元. 气味结合蛋白MmedOBP19在中红侧沟茧蜂足部的表达及配体结合特征[J]. , 2017, 60(6): 613-620.
[8]	王超群, 赵莹, 曹雅忠, 魏红爽, 李克斌, 张帅, 彭宇, 尹姣. 铜绿丽金龟气味结合蛋白AcorOBP1的表达和结合特性分析[J]. , 2017, 60(4): 363-371.
[9]	纪祥龙, 战一迪, 李佩玲, 刘勇. 萝卜蚜反-β-法尼烯结合蛋白基因的时空表达模式分析(英文)[J]. , 2017, 60(12): 1376-1383.
[10]	李广伟, 陈秀琳, 尚天翠. 光肩星天牛气味结合蛋白AglaOBP12的基因克隆、表达及配体结合特征[J]. , 2017, 60(10): 1141-1154.
[11]	范琳芳, 何文婧, 苏智仁, 朱家明, 罗威, 张纯, 黄立华. 斜纹夜蛾酵母双杂交文库的构建及其在蜕皮激素受体互作蛋白筛选中的应用[J]. , 2016, 59(8): 801-811.
[12]	覃江梅, 蔡立君, 郑丽双, 程小娟, 尤民生. 小菜蛾触角结合蛋白PxylOBP31的鉴定与结合特性分析[J]. , 2016, 59(8): 812-822.
[13]	程小娟, 蔡立君, 郑丽双, 覃江梅, 黄宇萍, 尤民生. 小菜蛾气味结合蛋白OBP2基因的克隆、表达谱及其结合特性分析[J]. , 2016, 59(4): 365-376.
[14]	房迟琴, 张鑫鑫, 刘丹丹, 李克斌, 张帅, 曹雅忠, 樊东, 尹姣. 暗黑鳃金龟气味结合蛋白HparOBP15a基因的克隆及功能分析[J]. , 2016, 59(3): 260-268.
[15]	钱凯, 冯波, 巫诩亮, 劳冲, 沈幼莲, 杜永均. 松墨天牛OBP基因 MaltOBP2 和 MaltOBP6 的克隆、序列分析及组织表达谱和原核表达研究[J]. , 2015, 58(5): 496-506.