杆状病毒凋亡抑制基因的稳定转化及抗凋亡昆虫细胞系的构建

›› 1999, Vol. 42 ›› Issue (2): 120-125.

杆状病毒凋亡抑制基因的稳定转化及抗凋亡昆虫细胞系的构建

李小峰, 齐义鹏, 朱应, 王业富

出版日期:1999-05-20 发布日期:1999-05-20

Stable transformation with anti-apoptotic

Li Xiao-feng,Qi Yi-peng

Online:1999-05-20 Published:1999-05-20

摘要/Abstract

摘要： 构建了新霉素抗性基因为筛选标记的带有凋亡抑制基因p35的重组质粒p35IE1Neo, 转化Sf9细胞后, 经G418筛选得到含有p35IE1Neo的Sf9细胞, 克隆化培养后命名为Sf9-35。PCR检测表明, Sf9-35细胞的染色体DNA上有p35基因的扩增带。经放线菌素D处理后的细胞核酸电泳和TdT介导bio-DUTP缺口末端标记(TUNEL)试剂盒检测, 证实Sf9-35具有抗凋亡特性。

关键词: 抗凋亡, 昆虫细胞, p35基因

Abstract: Transfer vector p35IE1Neo containing anti-apoptotic p35 gene and neomycinresistant gene(as selection marker) was constructed. After transfecting Sf9 cells and G418 screening, cells transformed with p35IE1Neo were obtained. One clone was picked and named Sf9-35. By PCR detection, it was found that the genome of Sf9-35 cells contain p35 gene. After actinomycin D treatment and cellular DNA electrophoresis and detection of TUNEL(TdT mediated bio-dUTP nick endlabeling), Sf9-35 cells were found to be resistant to apoptosis induced by actinomycin D.

Key words: anti-apoptosis, insect cells, p35 gene

李小峰, 齐义鹏, 朱应, 王业富. 杆状病毒凋亡抑制基因的稳定转化及抗凋亡昆虫细胞系的构建[J]. , 1999, 42(2): 120-125.

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