死亡肽基因的合成及在大肠杆菌中的表达

›› 2003, Vol. 46 ›› Issue (1): 114-117.

死亡肽基因的合成及在大肠杆菌中的表达

翁宏飚¹、²，牛宝龙²，孟智启^2*，徐孟奎¹

出版日期:2003-02-20 发布日期:2003-02-20

Cloning and fusion expression of the antimicrobial peptide thanatin gene in Escherichia coli

WENG Hong-Biao^{1, 2}, NIU Bao-Long², MENG Zhi-Qi^2*, XU Meng-Kui¹

Online:2003-02-20 Published:2003-02-20

摘要/Abstract

摘要： 将人工合成的寡核苷酸片段，通过PCR扩增得到死亡肽（thanatin）基因，并将其克隆到表达载体pGEX-3X中，序列分析结果正确。经IPTG诱导，在大肠杆菌BL21中进行高效可溶性表达，表达量可达20%以上。融合蛋白通过GST亲和层析纯化，用肠激酶酶解表达产物，用Sephadex G-25初步纯化得到具有抗菌活性的死亡肽。

关键词: 死亡肽, 融合表达, 大肠杆菌

Abstract: The thanatin gene was obtained and inserted into expression vector pGEX-3X by a DNA recombinant method which was checked by nucleotide sequencing. The fusion protein of GST-thanatin was produced by IPTG induction in Escherichia coli (BL21). The expression level was about 20%. The fusion protein was purified by GST affinity hromatography and digested by enterokinase. Partly purified with Sephadex G-25, the final product, thanatin exhibited antimicrobial activity.

Key words: GST fusion expression, Escherichia coli

翁宏飚¹、²，牛宝龙²，孟智启^2*，徐孟奎¹. 死亡肽基因的合成及在大肠杆菌中的表达[J]. , 2003, 46(1): 114-117.

WENG Hong-Biao^{1, 2}, NIU Bao-Long², MENG Zhi-Qi^2*, XU Meng-Kui¹. Cloning and fusion expression of the antimicrobial peptide thanatin gene in Escherichia coli[J]. , 2003, 46(1): 114-117.

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