›› 2005, Vol. 48 ›› Issue (1): 101-106.
蔡继峰1,刘敏1,应斌武1,董建国2,邓振华1,陶涛1,潘洪富1,张红霞1,闫红涛1,廖志钢1*
CAI Ji-Feng1,LIU Min1, YING Bin-Wu1, DONG Jian-Guo2, DENG Zheng-Hua 1, TAO Tao1, PAN Hong-Fu1, ZHANG Hong-Xiasup>1, YAN Hong-Tao1, LIAO Zhi-Gang1*
摘要: 通过检测食尸性苍蝇线粒体DNA(mtDNA)上细胞色素氧化酶亚基Ⅰ(COⅠ)中278bp 基因序列,鉴定食尸性苍蝇的种类,解决依据形态学方法不能鉴定苍蝇卵的种类、很难鉴定幼虫种类的难题 ,作为法医鉴别食尸性苍蝇及其幼虫、卵种类依据。随机采集放置在成都地区室外草地兔尸体 上的4 种15个食尸性苍蝇。利用改进的小型昆虫DNA匀浆方法提取上述苍蝇mtDNA;通过Perkin Elmer 9600扩增仪进行PCR扩增;聚丙烯酰胺非变性凝胶连续缓冲体系垂直电泳和银染显色技 术进行扩增结果检测;PCR胶回收试剂盒纯化;ABI 377测序仪测序;MEGA2.1软件包进行序列 分析和构建系统发育树。在双翅目食尸性苍蝇的种内进化分歧均数小于1%,种间进化分歧均数 大于7%。mtDNA上COⅠ序列分析能有效地对主要的食尸性苍蝇进行种类鉴定。该检测方法快速、 简便和精确,能作为法医鉴别食尸性苍蝇种类的可靠依据。