东亚飞蝗中肠几丁质酶基因的克隆、序列分析及组织定位

›› 2007, Vol. 50 ›› Issue (6): 555-559.doi:

东亚飞蝗中肠几丁质酶基因的克隆、序列分析及组织定位

张八生，曹月青，张伟，殷幼平，王中康，彭国雄，夏玉先^*

(重庆大学生物工程学院基因工程研究中心，重庆市杀虫真菌农药工程技术研究中心，功能基因及调控技术重庆市重点实验室，重庆400044)

出版日期:2007-06-20 发布日期:2007-12-20
通讯作者: 夏玉先

Cloning, sequence analysis and tissue expression of chitinase gene from the midgut of Locusta migratoria manilensis (Meyen)

ZHANG Ba-Sheng, CAO Yue-Qing, ZHANG Wei, YIN You-Ping, WANG Zhong-Kang, PENG Guo-Xiong, XIA Yu-Xian

(Genetic Engineering Research Center, School of Bioengineering, Chongqing University, Chongqing Engineering Research Center for Fungal Insecticides, The Key Laboratory of Gene Function and Expression Regulation, Chongqing 400044, China)

Online:2007-06-20 Published:2007-12-20
Contact: XIA Yu-Xian

摘要/Abstract

摘要： 通过RACE方法，克隆了东亚飞蝗Locusta migratoria manilensis (Meyen)几丁质酶基因 (LmChi)cDNA全序列 (GenBank 登录号：EF092841)。获得的cDNA全长1 604 bp，其中可读框1 452 bp, 编码483个氨基酸。推测其氨基酸序列与18家族昆虫几丁质酶有较高的相似性。与其他几丁质酶一样，东亚飞蝗几丁质酶序列也包含一个信号肽、一个几丁质酶活性位点、一个碳端丝氨酸富集区和一个几丁质结合域。半定量RT-PCR研究表明，LmChi基因只在东亚飞蝗不同发育阶段的中肠组织中表达，而在东亚飞蝗体壁、前肠和后肠均没有发现LmChi基因的转录。

关键词: 东亚飞蝗, 几丁质酶基因, 中肠, 半定量RT-PCR

Abstract: The full cDNA of chitinase gene (LmChi) from the midgut of Locusta migratoria manilensis (Meyen) was cloned by means of 3′-RACE and 5′-RACE. The results showed that the cDNA was 1 604 bp in length and contained an open reading frame (ORF) of 1 452 bp (GenBank accession number: EF092841), which encoded 483 amino acids. The deduced amino acid sequence, which was composed of a signal peptide, a chitinase active site, a C-terminal serine-rich region and a domain normal present in chitinase, showed a high similarity with other insect chitinases from family 18.Semi-quantitative RT-PCR indicated that LmChi expressed only in the midgut, but not in the integument, foregut and hindgut of L. migratoria manilensis.

Key words: Locusta migratoria manilensis, chitinase gene, midgut, semi-quantitative RT-PCR

张八生，曹月青，张伟，殷幼平，王中康，彭国雄，夏玉先^*. 东亚飞蝗中肠几丁质酶基因的克隆、序列分析及组织定位[J]. , 2007, 50(6): 555-559.

ZHANG Ba-Sheng, CAO Yue-Qing, ZHANG Wei, YIN You-Ping, WANG Zhong-Kang, PENG Guo-Xiong, XIA Yu-Xian. Cloning, sequence analysis and tissue expression of chitinase gene from the midgut of Locusta migratoria manilensis (Meyen)[J]. , 2007, 50(6): 555-559.

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