甜菜夜蛾围食膜肠粘蛋白基因SeM-8的克隆、序列分析及在不同组织中的表达检测

›› 2010, Vol. 53 ›› Issue (7): 727-733.doi:

甜菜夜蛾围食膜肠粘蛋白基因SeM-8的克隆、序列分析及在不同组织中的表达检测

李雯，郭巍，张霞，李杰，孙伟明

出版日期:2011-01-28 发布日期:2010-07-20
通讯作者: 郭巍

Cloning, sequence analysis and detection of tissue-specific expression of the intestinal protein gene SeM-8 from Spodoptera exigua （Lepidoptera: Noctuidae） peritrophic membrane

LI Wen, GUO Wei, ZHANG Xia, LI Jie, SUN Wei-Ming

Online:2011-01-28 Published:2010-07-20

摘要/Abstract

摘要： 昆虫肠粘蛋白（invertebrate intestinal mucin, IIM）是围食膜（peritrophic membrane, PM）的重要蛋白组分之一，在保护昆虫免受微生物侵染方面起着非常重要的作用。本研究以甜菜夜蛾Spodoptera exigua 5龄幼虫中肠总RNA为模板，根据已知的甜菜夜蛾肠粘蛋白SeIIM-8基因的cDNA序列（GenBank登录号：ABW06596）设计引物，利用RT-PCR技术扩增得到甜菜夜蛾肠粘蛋白基因SeM-8，序列分析发现其开放阅读框（open reading frame, ORF）长2 703 bp，编码900个氨基酸残基，预测分子量为95.7 kDa。序列分析表明，其氨基酸序列（GenBank登录号：GU255994）与棉铃虫Helicoverpa armigera（Hübner），粘虫Mamestra configurata和小菜蛾Plutella xylostella肠粘蛋白的一致性分别为48%，49% 和45%。Western blot分析结果表明，SeM-8粘蛋白在甜菜夜蛾即将孵化的卵和5龄幼虫的围食膜、中肠和粪便中都有存在，在5龄幼虫马氏管、脂肪体、唾腺、血淋巴等组织部位没有发现。本研究为进一步研究IIM结构和功能，寻找生物防治新靶标奠定了理论基础。

关键词: 甜菜夜蛾, 围食膜, 昆虫肠粘蛋白, RACE, 克隆, 表达, 定位

Abstract: Invertebrate intestinal mucin （IIM） is one of the important components of proteins on peritrophic membrane and plays a very important role in the protection against microbial infection of insects. The instestinal protein gene SeM-8 was amplified from 5th instar larvae of Spodoptera exigua by using RT-PCR technique. Sequence analysis showed that its open reading frame （ORF） is 2 703 bp in length, encoding a polypeptide of 900 amino acid residues with the predicted molecular mass of 95.7 kDa. SeM-8 protein shares 48%, 49% and 45% identities in amino acid with homologues from Helicoverpa armigera, Mamestra configurata and Plutella xylostella, respectively. Immuno-localization analysis showed that SeM-8 could be detected in egg, peritrophic membrane, midgut tissue and fecal pellets, but not detected in Malpighian tubules, fat body, salivary glands and haemolymph of 5th instar larvae. The results provided a foundation for pest management by using midgut as target.

Key words: Spodoptera exigua, peritrophic membrane, invertebrate intestinal mucin, RCAE, cloning, expression, localization

李雯，郭巍，张霞，李杰，孙伟明. 甜菜夜蛾围食膜肠粘蛋白基因SeM-8的克隆、序列分析及在不同组织中的表达检测[J]. , 2010, 53(7): 727-733.

LI Wen, GUO Wei, ZHANG Xia, LI Jie, SUN Wei-Ming. Cloning, sequence analysis and detection of tissue-specific expression of the intestinal protein gene SeM-8 from Spodoptera exigua （Lepidoptera: Noctuidae） peritrophic membrane[J]. , 2010, 53(7): 727-733.

0
/ / 推荐

导出引用管理器 EndNote|Reference Manager|ProCite|BibTeX|RefWorks

链接本文: http://www.insect.org.cn/CN/

http://www.insect.org.cn/CN/Y2010/V53/I7/727

[1]	杨春红, 郭建洋, 褚栋, 程登发, 万方浩. 漆酶-1基因在烟粉虱MEAM1隐种和温室粉虱中的表达模式比较[J]. , 2018, 61(9): 1019-1028.
[2]	马荣琴, 王林玲, 衡惠, 周泽扬, 李治. 意大利蜜蜂铁蛋白基因AmFer3HCH的克隆及其在温度胁迫下的应答[J]. , 2018, 61(9): 1029-1039.
[3]	刘贵芬, 房刚奇, 詹帅, 黄勇平. 亮斑扁角水虻脂肪酸去饱和酶基因的鉴定及其在双翅目中的进化格局[J]. , 2018, 61(8): 905-913.
[4]	李慧, 何玄玉, 陶蓉, 陈宏建, 龚馨玥, 李寿银, 郝德君. 松墨天牛小热激蛋白基因的克隆、表达谱及对温度胁迫的响应[J]. , 2018, 61(7): 749-760.
[5]	单艳敏, 张玉, 霍志家, 庞保平, 孙学涛. 沙葱萤叶甲丝氨酸蛋白酶基因GdSP的克隆及对温度胁迫的响应[J]. , 2018, 61(7): 761-770.
[6]	陈秀琳, 苏丽, 陈丽慧, 李怡萍, 仵均祥, 李广伟. 梨小食心虫Minus-C气味结合蛋白的分子克隆、表达谱及结合特性分析[J]. , 2018, 61(7): 771-783.
[7]	王德意, 汝玉涛, 王勇, 马月月, 那爽, 孙良振, 姜义仁, 秦利. 柞蚕蛹滞育和滞育解除过程中海藻糖酶基因表达模式及酶活力分析[J]. , 2018, 61(7): 784-794.
[8]	殷娅茹, 胡建, 胡文波, 杨成飞, 王坤, 刘春, 林英, 朱勇, 王凌燕. 家蚕油蚕oc突变体突变基因的精细定位[J]. , 2018, 61(6): 627-636.
[9]	李玲, 周渊涛, 谭瑶, 周晓榕, 庞保平. 沙葱萤叶甲化学感受蛋白基因的鉴定及表达谱分析(英文)[J]. , 2018, 61(6): 646-656.
[10]	孙佳斌, 刘乃勇, 李双美, 闫祺, 董双林. 斜纹夜蛾信息素结合蛋白SlitPBP4的分子克隆、组织表达谱及结合特性分析[J]. , 2018, 61(6): 657-667.
[11]	李鹏燕, 刘艳萍, 王思威, 孙海滨, 柏建山, 彭刚, 龚雪海. 荔枝蒂蛀虫信息素结合蛋白基因序列及表达分析[J]. , 2018, 61(5): 527-536.
[12]	司品法, 周琼, 崔中翌 . 柑橘大实蝇气味结合蛋白基因BminOBP25的克隆、原核表达及组织表达分析[J]. , 2018, 61(5): 537-545.
[13]	岳金金, 马宇驰, 刘全, 姜莉莉, 费东亮, 张鹤, 孙莉, 李明, 马鸣潇. 中华蜜蜂半乳糖凝集素AcGalectin的表达、纯化及性质分析[J]. , 2018, 61(5): 546-554.
[14]	朱娟, 谢雨辰, 陈艳荣, 唐顺明, 易咏竹, 沈兴家. 家蚕滞育关联山梨醇脱氢酶基因的启动子活性分析[J]. , 2018, 61(4): 391-397.
[15]	李帅, 苏丽, 李伯辽, 李怡萍, 李广伟, 仵均祥. 梨小食心虫谷胱甘肽S-转移酶GmolGST6的基因克隆、原核表达和酶学特征[J]. , 2018, 61(4): 398-409.