家蚕Bcl-2家族基因 BmBuffy 的克隆及表达分析

›› 2015, Vol. 58 ›› Issue (7): 712-720.doi:

家蚕Bcl-2家族基因 BmBuffy 的克隆及表达分析

张金叶^1,2, 赵元莙¹, 乔梁¹, 潘敏慧^2,3, 鲁成^2,3,*

（1. 重庆师范大学动物生物学重庆市重点实验室, 重庆 401331; 2. 西南大学家蚕基因组国家重点实验室, 重庆 400716; 3. 西南大学农业部蚕桑功能基因组和生物技术重点实验室, 重庆 400716）

出版日期:2015-07-20 发布日期:2015-07-20
作者简介:张金叶, 女, 1979年9月生, 河北保定人, 博士, 讲师, 研究方向为细胞凋亡调控机制， E-mail: yjz0916@163.com

Cloning and expression analysis of Bcl-2 family gene BmBuffy in the silkworm, Bombyx mori (Lepidoptera: Bombycidae)

ZHANG Jin-Ye^1,2, ZHAO Yuan-Jun¹, QIAO Liang¹, PAN Min-Hui^2,3, LU Cheng^2,3,*

(1. Chongqing Key Laboratory of Animal Biology, Chongqing Normal University, Chongqing 401331, China; 2. State Key Laboratory of Silkworm Genome Biology, Southwest University, Chongqing 400716, China; 3. The Key Laboratory for Sericulture Functional Genomics and Biotechnology of Agricultural Ministry, Southwest University, Chongqing 400716, China)

Online:2015-07-20 Published:2015-07-20

摘要/Abstract

摘要： 【目的】本研究旨在获得家蚕 Bombyx mori Bcl-2家族同源基因，并分析其在不同组织和发育阶段的时空表达模式及功能。【方法】用cDNA末端快速扩增方法（rapid amplification of cDNA ends, RACE）克隆家蚕Bcl-2家族基因BmBuffy，利用SSR分子标记连锁分析确定其染色体定位。同时，用RT-PCR和qPCR技术分析该基因在家蚕幼虫及变态期间不同组织中的表达。【结果】克隆获得全长家蚕Bcl-2家族同源基因 BmBuffy，证明该基因位于第 4号染色体上，开放阅读框长879 bp，编码292 aa，预测其分子量大小为32.4 kDa，等电点为9.94，且第130-231位氨基酸之间存在1个Bcl-2_like Superfamily结构域。系统进化发育树表明，其与黑腹果蝇Drosophila melanogaster的DmBuffy关系最近，氨基酸序列一致性为27%。BmBuffy在幼虫组织中的表达结果显示，其在马氏管中表达量最高，而且在不同组织变态期的关键时间点均有明显变化。【结论】家蚕BmBuffy具有Bcl-2家族典型结构域，BmBuffy定位于第 4号染色体上，BmBuffy在家蚕变态期的组织生理变化中起到一定作用。本文为进一步研究家蚕Bcl-2家族基因的功能奠定基础。

关键词: 家蚕, Bcl-2家族, 基因克隆, 表达分析, 染色体定位

Abstract: 【Aim】 This study aims to clone a Bcl-2 family member gene from the silkworm, Bombyx mori, and explore its expression profiles and roles in different larval tissues and developmental stages of the moth. 【Methods】 BmBuffy was cloned using rapid amplification of cDNA ends (RACE) method. RT-PCR and qPCR were used to detect the gene expression profiles. The chromosome localization of this gene was conducted using SSR markers. 【Results】 The Bcl-2 family member gene cloned in B. mori was named BmBuffy, which is located on chromosome No. 4, coding a protein of 292 aa with an estimated molecular weight of 57.8 kDa and pI of 9.94. Its encoded protein also possesses a Bcl-2 like superfamily domain between 130-231 residues. Phylogenetic analysis revealed that BmBuffy is homologous to DmBuffy of Drosophila melanogaster with 27% amino acid sequence identity. The expression profiles in different larval tissues showed that BmBuffy had the highest expression level in Malpighian tubules. There was significant variation in the transcription level of BmBuffy in different developmental stages including metamorphosis. 【Conclusion】 BmBuffy has the typical Bcl-2 family domain, BmBuffy is located on chromosone No.4, and BmBuffy might play a role in the alteration of tissue physiology during metamorphosis. This study lays a foundation for further study on the function of Bcl-2 family genes in B. mori.

Key words: Bombyx mori , Bcl-2 family, gene cloning, expression profiling, chromosome localization

张金叶, 赵元莙 , 乔梁, 潘敏慧, 鲁成. 家蚕Bcl-2家族基因 BmBuffy 的克隆及表达分析[J]. , 2015, 58(7): 712-720.

ZHANG Jin-Ye, ZHAO Yuan-Jun, QIAO Liang, PAN Min-Hui, LU Cheng. Cloning and expression analysis of Bcl-2 family gene BmBuffy in the silkworm, Bombyx mori (Lepidoptera: Bombycidae)[J]. , 2015, 58(7): 712-720.

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[2]	张祥乐, 马俐, 马倩, 李胜, 刘素宁. Ras信号通路通过激活转录因子Myc促进核内复制细胞生长[J]. , 2018, 61(8): 885-894.
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[4]	单艳敏, 张玉, 霍志家, 庞保平, 孙学涛. 沙葱萤叶甲丝氨酸蛋白酶基因GdSP的克隆及对温度胁迫的响应[J]. , 2018, 61(7): 761-770.
[5]	殷娅茹, 胡建, 胡文波, 杨成飞, 王坤, 刘春, 林英, 朱勇, 王凌燕. 家蚕油蚕oc突变体突变基因的精细定位[J]. , 2018, 61(6): 627-636.
[6]	孙佳斌, 刘乃勇, 李双美, 闫祺, 董双林. 斜纹夜蛾信息素结合蛋白SlitPBP4的分子克隆、组织表达谱及结合特性分析[J]. , 2018, 61(6): 657-667.
[7]	李鹏燕, 刘艳萍, 王思威, 孙海滨, 柏建山, 彭刚, 龚雪海. 荔枝蒂蛀虫信息素结合蛋白基因序列及表达分析[J]. , 2018, 61(5): 527-536.
[8]	司品法, 周琼, 崔中翌 . 柑橘大实蝇气味结合蛋白基因BminOBP25的克隆、原核表达及组织表达分析[J]. , 2018, 61(5): 537-545.
[9]	岳金金, 马宇驰, 刘全, 姜莉莉, 费东亮, 张鹤, 孙莉, 李明, 马鸣潇. 中华蜜蜂半乳糖凝集素AcGalectin的表达、纯化及性质分析[J]. , 2018, 61(5): 546-554.
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[12]	程杏安, 林贤伟, 蒋旭红, 刘展眉, 钟国华, 胡美英. 草地贪夜蛾组织蛋白酶L的基因克隆、原核表达及多克隆抗体制备[J]. , 2018, 61(4): 410-422.
[13]	郗学鹏, 魏伟, 张卫星, 王红芳, 胥保华. 中华蜜蜂转录因子AP-1基因的克隆及特性分析[J]. , 2018, 61(4): 423-431.
[14]	陈龙, 谭瑶, 周晓榕, 庞保平, 格希格都仁, 孙志鹏. 沙葱萤叶甲海藻糖酶基因GdTre1的克隆、分子特性和表达分析[J]. , 2018, 61(3): 271-281.
[15]	龙定沛, 郝占章, 向仲怀, 赵爱春. 家蚕基因组靶向编辑技术研究进展 [J]. , 2018, 61(3): 371-384.