昆虫GABA受体（γ-aminobutyric acid receptor, GABAR）是杀虫剂的重要靶标之一。本研究以黑腹果蝇Drosophila melanogaster整体组织的cDNA作为模板， 采用RT-PCR技术扩增了黑腹果蝇GABA受体LCCH3亚基和GRD亚基的cDNA序列， 并克隆至pET-32a表达载体上， 测序结果表明获得的序列与基因库中已发表的序列一致性在99%以上， 无移码突变。在IPTG的诱导下， LCCH3基因成功在大肠杆菌Escherichia coli中表达， 而GRD基因未表达。通过包涵体洗涤、变性、Ni²⁺亲合层析纯化、稀释复性获得纯化的重组表达的LCCH3蛋白， 并用圆二色谱测定了目标蛋白的二级结构， 主要富含β结构。该研究结果为研究昆虫GABAR的结构和功能关系提供了重要的参考数据。

超氧化物歧化酶（SOD）是一种重要的抗氧化酶， 在昆虫抗氧化保护过程中起着重要作用。本研究通过RT-PCR技术鉴定了家蝇Musca domestica MdSOD3基因(GenBank登录号为JQ408979)， cDNA序列817 bp， 开放阅读框534 bp， 推导的多肽序列含有177个氨基酸。同源性分析及NJ法系统分析表明MdSOD3与其他物种的Cu/ZnSOD关系较近。荧光定量PCR检测该基因在家蝇幼虫脂肪体、 肠、 表皮和血细胞中不存在差异表达； 在受到不同浓度重金属Cd²⁺刺激时， MdSOD3基因呈诱导性表达， 5 mmol/L 时表达量最高。通过RNAi策略技术成功敲低MdSOD3表达水平。将RNA干扰60 h的幼虫置于5 mmol/L Cd²⁺处理24 h后死亡率明显升高， 并且出现中毒表象。NBT活性染色检测到体外重组表达的MdSOD3具有明显的酶活性。结果提示MdSOD3基因可能在家蝇抗逆防御过程中起着重要作用。

昆虫组织蛋白酶B在昆虫代谢过程中发挥重要作用。本研究利用RACE技术克隆了扶桑绵粉蚧Phenacoccus solenopsis Tinsley组织蛋白酶B基因的开放阅读框（ORF）序列， 命名为PsCb （GenBank登录号: JQ727999）。生物信息学分析表明， 该基因的开放阅读框包含927 bp的片段， 编码308个氨基酸。多序列比对表明， 该基因编码的蛋白在N端变异较大， 在C端保守性高。组织蛋白酶B基因的系统进化树结果表明扶桑绵粉蚧组织蛋白酶独自成为一支。原核表达电泳检测到一条大约35 kDa的目的条带， 与预测的蛋白分子量相符。组织蛋白酶B基因在扶桑绵粉蚧各个虫态均有表达， 卵期表达量相对较低， 2龄若虫期达到最高峰， 然后下降。本研究为进一步研究该基因的功能并开发出组织蛋白酶抑制剂， 从而研制出扶桑绵粉蚧杀卵剂和胚胎发育抑制剂等提供理论依据。

为探究中华蜜蜂Apis cerana cerana的DNA甲基化模式， 本研究采用RTPCR技术克隆了中华蜜蜂DNA甲基化转移酶3（Dnmt3）基因(GenBank登录号为JQ740768)； 采用荧光定量PCR检测不同发育时期工蜂（4日龄蛹, 1, 7和30日龄成年蜂及产卵工蜂）和蜂王（4日龄蛹， 1日龄蜂王和产卵蜂王）头部的Dnmt3基因mRNA的表达量。结果表明： 该基因cDNA序列全长2 277 bp， 编码758个氨基酸残基， 预测的蛋白分子量为88.24 kD， 等电点为7.85。将中华蜜蜂与其他物种的Dnmt3基因的结构域进行比对， 同时将该基因推导的氨基酸序列与其他物种的Dnmt3氨基酸序列进行同源性比对和系统发育分析， 发现与西方蜜蜂的Dnmt3序列一致性高达99%。该基因在工蜂和蜂王不同发育时期均有表达， 1日龄工蜂与7日龄工蜂中没有显著差异(P>0.05)， 30日龄工蜂中的表达量显著高于前两者 (P<0.05)； 蜂王蛹中的表达量显著高于工蜂蛹 (P<0.05)； 1日龄的蜂王中的表达量显著高于1日龄的工蜂(P<0.05)； 产卵工蜂与产卵蜂王中的表达量没有差异（P>0.05）。这种表达情况提示其可能与工蜂劳动分工及蜜蜂卵巢发育有关。

为了确定我国南方竹林主要害虫长足大竹象Cyrtotrachelus buqueti Guerin-Meneville雌虫是否存在诱引雄虫的化学信息素以及所释放的相关化学信息素的成分， 本研究利用风洞和“Y”型嗅觉仪测试到长足大竹象雄虫对雌虫及雌虫体表提取化合物具有正趋向行为反应， 随后用GC-EAD和GC-MS对雌虫体表提取化合物进行了分析。在GC-EAD分析时发现雄虫触角对雌虫体表粗提液和体表物质标准品化合物的触角电位反应时有5个GC峰有电生理活性； 通过质谱法确定这5个电生理活性GC峰的化学成分分别为苯酚、己酸乙酯、2-壬酮、壬醛和十五酸甲酯。风洞和GC-EAD分析表明， 这5种成分的标准品化合物对长足大竹象雄虫具有诱引生物活性和触角电生理活性。结果说明长足大竹象雌虫体表粗提液中存在的苯酚、己酸乙酯、2-壬酮、壬醛和十五酸甲酯是长足大竹象成虫的化学信息素物质。

【目的】测定红火蚁Solenopsis invicta Buren工蚁对其跟踪信息素的触角电位（EAG）及行为反应。【方法】解剖红火蚁工蚁的杜氏腺， 用正己烷溶剂提取其分泌的跟踪信息素进行气相色谱-质谱（GC-MS）分析， 并测定了红火蚁工蚁对杜氏腺提取物、 工蚁提取物和合成的法尼烯混合物的EAG和招募行为反应。【结果】通过与合成的法尼烯混合物的气相色谱（GC）保留时间和质谱图比对， 发现杜氏腺提取物的主要成分并不是Z, E-α-法尼烯。EAG测定结果表明， 红火蚁工蚁对杜氏腺提取物、 工蚁提取物及100 μg的法尼烯混合物均有较强的EAG反应， 其次为10 μg和1 μg的法尼烯混合物。在招募行为测定中， 杜氏腺提取物和工蚁提取物招募作用明显， 而10， 1， 0.1和0.01 μg法尼烯混合物的作用均不显著。【结论】Z, E-α-法尼烯不是红火蚁跟踪信息素的主要成分； 红火蚁工蚁对杜氏腺提取物、 工蚁提取物有较强的EAG反应和明显的招募行为反应。

神经胶质作为视觉系统的重要成分之一， 对视觉系统的发育及功能起着重要的作用。本研究通过组织解剖观察、 免疫组织化学等技术， 对中华蜜蜂Apis cerana cerana幼虫和蛹的视觉系统中神经胶质的类型和发育过程进行了比较研究。研究表明： 在中华蜜蜂视觉系统中， 根据神经胶质的位置和形态主要分为表面神经胶质、 皮层神经胶质和神经纤维网神经胶质3种类型； 神经胶质主要来源于视柄和视叶中的神经胶质前体中心； 神经胶质细胞数量的增加一方面来自于细胞的迁移， 另一方面来自于神经胶质细胞自身的分裂增殖。本研究为昆虫神经胶质的发育以及功能研究提供理论基础。

对水稻重要害虫褐飞虱Nilaparvata lugens目前市场上尚无一种理想的微生物杀虫剂。昆虫病原真菌具有从体壁侵入的能力因而对刺吸性害虫的防治具有优势。为此， 本研究选用不同原寄主和来源地的3种昆虫病原真菌（金龟子绿僵菌Metarhizium anisopliae、 黄绿绿僵菌Metarhizium flavoviride和球孢白僵菌Beauveria bassiana）的12个不同菌株， 以1 100孢子/mm²孢子悬浮液进行室内毒力测定。结果表明： 在参试的不同菌种12个菌株中， 黄绿绿僵菌Mf82菌株对褐飞虱成虫致病力最高， 10 d累计校正死亡率为83.5%， 致死中时（LT₅₀）为4.6 d。其不同浓度孢子液对褐飞虱3个发育阶段有不同程度的致病力， 毒力大小顺序为成虫>高龄若虫>低龄若虫。黄绿绿僵菌孢子液对各处理稻株褐飞虱产卵痕部位、 卵粒均有侵染作用， 10 d侵染率分别为66.7%和51.2%， 卵龄越低， 侵染效果越好， 卵龄为0.5 d时侵染率最高。本研究表明黄绿绿僵菌Mf82菌株对褐飞虱成虫、 若虫和卵均有较强的致病性， 是一株极具应用潜力的生防真菌。

【目的】探讨不同抗性葡萄品种对葡萄根瘤蚜Daktulosphaira vitifolia Fitch侵染后的组织结构响应。【方法】以砧木140Ru (Vitis rupestris×V. berlandieri)和栽培品种赤霞珠Vitis vinifera cv. Cabernet Sauvignon离体三级根及140Ru盆栽苗为试材接种根瘤蚜卵， 接种两周后取刺吸位点组织作超薄切片并观察超微结构变化， 取盆栽140Ru不同时期根结测定多酚含量。【结果】超微结构显示， 砧木140Ru根系周皮层最外层细胞壁的厚度（1 031.25 nm）及周皮层细胞层数（6～7层）显著高于赤霞珠品种的周皮层细胞厚度（543.75 nm）及层数（3～4层）， 140Ru根系韧皮部酚类物质含量比赤霞珠高出35％； 侵染后， 砧木140Ru周皮层细胞第3层以内的细胞壁加厚并积聚大量的多酚类物质， 140Ru葡萄新根被根瘤蚜侵染后多酚含量呈升高趋势， 在接种20 d时是对照的2.4倍； 赤霞珠粗根被根瘤蚜侵染后薄壁细胞中细胞质变浓， 出现大量淀粉粒， 线粒体及内质网数量增多。【结论】砧木140Ru的周皮层组织结构较赤霞珠不利于根瘤蚜口针穿刺， 被根瘤蚜侵染后发生了不利于根瘤蚜侵染取食的变化。

白蜡窄吉丁Agrilus planipennis Fairmaire是近年来发生和危害严重的国际性检疫害虫。为了了解不同饲养条件和种内个体间相互感知对成虫生物学的影响， 本研究采用群体饲养、 单对饲养、 无隔离单雌饲养、 视觉隔离单雌饲养和嗅觉隔离单雌饲养等5种处理， 在室内测定了白蜡窄吉丁成虫的寿命、 取食量、 产卵量和产卵历期等参数的变化。结果显示： 隔离饲养降低了白蜡窄吉丁成虫的寿命和繁殖力， 且不同处理下白蜡窄吉丁成虫的寿命和取食量均存在显著差异（P<0.05）， 但产卵量的差异不明显（P>0.05）。其中无隔离单雌饲养时成虫的平均寿命最长， 为32.40 d， 群体饲养的寿命最短， 为20.77 d， 且单雌饲养的寿命均比单对饲养和群体饲养的长。单雌饲养的3种情况下， 视觉隔离条件下的日均取食量最大， 为156.16 mm²， 嗅觉隔离的最小， 为107.35 mm²； 无隔离饲养条件下雌虫的产卵量最大， 产卵历期也最长， 分别为98.33 d和21.33 d。这些研究结果表明， 白蜡窄吉丁种内个体间相互感知的阻断对成虫的取食、 发育和繁殖活动存在明显影响， 且嗅觉在其种群内的交流活动中作用最重要， 其次是视觉。此外， 个体之间的相互干扰或竞争对白蜡窄吉丁成虫的寿命和繁殖力也可能存在一定的影响。这为生产上采用隔离措施如营造混交林带防治该虫提供了理论基础。

实蝇类害虫多为国内外检疫对象， 其鉴定识别方法主要依据成虫的外部形态特征， 而传统的形态学识别法对口岸经常截获的幼体及残缺的虫体， 则无能为力。本研究以桔小实蝇Bactrocera dorsalis的幼体（卵、 幼虫、 蛹）以及成虫残体（足、 翅、 头部、 胸部、 腹部）为对象， 利用 DNA 条形码技术， 构建实蝇类害虫快速鉴定技术体系， 并以其他4种常见实蝇（包括番石榴实蝇B. correcta、 瓜实蝇B. cucurbitae、 南亚果实蝇B. tau、 柑桔大实蝇B. minax）为对象对该技术体系进行应用验证。结果显示， 桔小实蝇幼体以及成虫残体的碱基序列与数据库中靶标种COⅠ基因碱基序列的一致性为99.51%~99.84%， 其他4种实蝇相应序列与数据库中靶标种COⅠ基因序列的一致性分别为100%， 100%， 99.81%~99.83%和100%； 以邻接法（NJ法）构建系统发育树， 靶标种实蝇均与数据库中对应种实蝇聚为一支， 且置信度均为100%。以K2-P模型计算种内及种间遗传距离得出， 5种实蝇的种间遗传距离为0.0597~0.2363， 平均为0.1693； 种内遗传距离为0.0000~0.0041， 平均为0.0019。这些结果表明， 基于DNA条形码的物种识别技术完全可用于口岸截获的实蝇类害虫幼体及残体的准确鉴定。

蓟马类害虫种类多、 体型小， 传统的形态学鉴定方法难以快速准确识别。本研究利用DNA条形码通用型引物， 以我国田间常见的25种蓟马为靶标扩增其线粒体DNA细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ (mitochondrial cytochrome c oxidase subunit Ⅰ gene, mtDNA COⅠ) 基因 (约650 bp)， 通过对靶标片段碱基序列的测序及比对分析， 以邻接法 (NJ法) 构建系统发育树， 并以Kimura双参数模型计算种内、 种间遗传距离。结果表明： 聚类分析与形态学鉴定结果一致， 表现为较长的种间分支和较短的种内分支， 每个单系分支对应一个物种， 同一物种不同单倍型的最初分支自展值均为100%。25种蓟马的种内平均遗传距离为0.0027， 种间平均遗传距离为0.2757， 种间遗传距离为种内遗传距离的102.1倍； 而且种内、 种间遗传距离没有重叠区域。结果说明基于COⅠ基因的DNA条形码技术可以用于不同种类蓟马的快速准确鉴别。

为了探寻大麦虫Zophobas morio变态发育过程中化学成分的变化， 本研究利用薄层色谱技术对大麦虫的3个虫态(幼虫、 蛹和成虫)甲醇粗提物中的化学成分进行分析和比较， 利用柱色谱技术、 核磁共振氢谱技术（¹H MR）和气相色谱-质谱联用技术（GC-MS）对蛹甲醇粗提物进行重点分析。结果表明： 虫蛹甲醇粗提物中含有幼虫和成虫甲醇粗提物中不存在的化学成分。对虫蛹甲醇粗提物进行针对性的结构研究， 共鉴定出10个脂肪酸。其中， 存在于大麦虫虫蛹中的10-十六碳酮酸、 10-十八碳酮酸为首次从自然界昆虫中获得； (8E, 11E)-8, 11-十八碳烯酸、 (9Z, 12Z)-9, 12-十八碳烯酸、 (9Z, 12Z, 15Z)-9, 12, 15-十八碳烯酸、 8-(3-辛基-2-环氧乙烷基)辛酸和8-(2-辛基环丙烷基)辛酸为首次从大麦虫中发现。以上研究结果为针对大麦虫不同生物阶段的开发利用提供新的理论依据。

为了阐明草地螟Loxostege sticticalis大发生种群幼虫取食行为特征， 在室内条件下（温度22±1℃， 相对湿度70%）对不同幼虫密度［1， 10， 30头/瓶（650 mL）］饲养草地螟幼虫的食物利用率及消化酶活性进行了研究。结果表明： 幼虫中等（或高）密度对草地螟幼虫相对中肠重量、 相对取食量、 粪便干重、 食物利用率和近似消化率及总蛋白酶和亮氨酸氨肽酶活性影响显著。幼虫相对中肠重量以10头/瓶的幼虫密度最大， 1头/瓶的幼虫密度最小。随着幼虫密度的增加， 幼虫相对取食量和粪便干重增加， 而虫体干重减轻， 幼虫食物利用率降低。幼虫密度30头/瓶的幼虫相对取食量和粪便干重显著高于1和10头/瓶的， 而30头/瓶的幼虫食物利用率显著低于1头/瓶的。幼虫近似消化率随幼虫密度的逐渐增加而显著降低。幼虫密度10头/瓶的幼虫总蛋白酶和亮氨酸氨肽酶的活性显著高于1和30头/瓶的， 而淀粉酶的活性受幼虫密度影响不显著。随幼虫密度的增加， 幼虫相对中肠重量与总蛋白酶和亮氨酸氨肽酶活性变化趋势较为一致， 消化酶活性的变化可能与相对中肠重量大小有关。因此， 幼虫密度是影响草地螟幼虫取食行为的重要因子， 这些结果为阐明草地螟大发生种群与一般种群的为害特征提供了重要理论依据。

为了明确中华真地鳖Eupolyphaga sinensis Walker在自然界的分布及土壤性质对其存活的影响， 运用森下氏分散指数(Morisita’s index of dispersion)研究了中华真地鳖种群空间格局； 测试了4种不同土壤含水量（16%~29%）条件下中华真地鳖的卵孵化率与若虫存活率， 还测试了以野外不同来源土壤（山脚栖息土、 堆肥、 菜园土、 蘑菇料发酵土和黄砂红壤土）饲养时中华真地鳖若虫的存活率。结果表明， 中华真地鳖若虫在室外为聚集分布， 成虫为均匀分布， 从地面到40 cm的土壤深度都分布有中华真地鳖。土壤初始含水量21%和24%的卵孵化率最高， 其他含水量的卵孵化率均显著较低(P<0.05)， 土壤初始含水量29%时的若虫存活率最低。堆肥、 山脚栖息土更适合中华真地鳖生存。结果可为该虫的采集、 饲养和深入研究提供科学的依据。