摘要: 目的】明确变温与粘虫Mythimna separata (Walker)生长发育和生殖的关系及变温条件下粘虫主要能源物质代谢的变化规律。【方法】将粘虫卵置于光周期均为14L:10D，温度分别为25℃和30℃日恒温和白天30℃、夜晚20℃日变温的条件下饲养，观察记录25℃和30/20℃下的成虫产卵及卵巢管发育情况，再取30℃和30/20℃下饲养获得的3龄幼虫、6龄幼虫、蛹和1日龄成虫，测定其糖原、海藻糖和甘油三酯3种能源物质的含量及海藻糖酶、3-磷酸甘油醛脱氢酶、3-磷酸甘油脱氢酶及3-羟酰辅酶A脱氢酶等4种主要能源物质代谢酶的活性。【结果】 25℃与30/20℃饲养条件下相比，1日龄雌成虫卵巢管发育明显滞后，但单雌产卵量显著较多；蛹期糖原、海藻糖和甘油三酯的含量均高于3龄和6龄幼虫，成虫期各能源物质含量均较低。30/20℃日变温下粘虫体内供试3种能源物质的含量显著高于30℃日恒温(6龄幼虫和蛹期甘油三酯含量在两温度下无显著差异)；温度变化对供试4种酶活性的影响差异显著。【结论】温度变化对粘虫的生长发育和繁殖具有显著的影响。在粘虫生长发育过程中以糖代谢为主；变温会加速糖代谢，减缓部分发育阶段的脂代谢，更有利能源物质的积累。

【目的】卵黄原蛋白受体(vitellogenin receptor, VgR)属于低密度脂蛋白受体，通过介导内吞作用为发育中的卵母细胞摄取卵黄原蛋白，为胚胎发育提供营养物质，在昆虫生殖过程中发挥关键作用。为研究黑尾叶蝉Nephotettix cincticeps VgR (NcVgR)基因的生理功能及其在生殖中的作用，本研究克隆并解析了NcVgR基因的序列，并对其时空表达进行了研究。【方法】根据黑尾叶蝉转录组数据信息，利用RT-PCR克隆了NcVgR基因，并进行了生物信息学分析；利用实时荧光定量PCR研究了不同发育时期、成虫不同组织NcVgR的表达水平。【结果】NcVgR cDNA序列全长6 676 bp，开放阅读框长度5 568 bp，编码1 855个氨基酸，预测编码蛋白的分子量为206 kD，N端前17个氨基酸为信号肽。序列分析显示，NcVgR具有低密度脂蛋白家族的5个经典保守域,即：配体结合域(ligand-binding domain, LBD)、表皮生长因子前体同源域(EGF-precursor homology domain, EGFP)、O-糖链结构域(O-linked sugar domain, OLSD)、跨膜域(transmembrane domain, TMD)和胞质尾域(cytoplasmic domain)。系统发育分析表明，NcVgR与褐飞虱N. lugens VgR亲缘关系最近。实时荧光定量PCR结果显示，NcVgR转录起始时间为5龄若虫，羽化后转录水平逐渐上升，至羽化后8 d达到峰值，随后下降。有意思的是，随着黑尾叶蝉产卵，NcVgR转录水平再次上升，至羽化后16 d达到最高水平。组织定位结果显示，NcVgR在黑尾叶蝉雌成虫卵巢中特异性高表达，而在雌成虫脂肪体和肠道中微量表达，在雌成虫脑及雄成虫中均未检测到表达。【结论】NcVgR在黑尾叶蝉雌成虫卵巢中特异性表达，并且不同发育时期具有不同的表达量，这为研究黑尾叶蝉的生殖调控机理提供了分子信息。

【目的】克隆柞蚕Antheraea pernyi海藻糖合成酶（trehalose-6-phosphate synthase, TPS）基因，并对其进行组织表达分析，探讨该基因在柞蚕滞育蛹解除滞育过程中的表达规律，为阐明柞蚕滞育期间碳水化合物代谢规律与蛹滞育解除的关系提供数据支持。【方法】利用PCR及3′RACE技术从柞蚕幼虫脂肪体组织中克隆得到TPS基因，并进行生物信息学分析；RT-PCR检测该基因在柞蚕幼虫各组织中的表达分布，进一步采用Real-time PCR分析柞蚕滞育蛹解除滞育过程中该基因在脂肪体组织和血淋巴中的表达量变化。【结果】克隆获得柞蚕海藻糖合成酶基因并命名为 ApTPS。其开放阅读框长2 487 bp，编码828个氨基酸，蛋白预测分子量为93.19 kD，等电点（pI）4.61；无信号肽，无跨膜区。蛋白质亚细胞定位预测该蛋白定位于细胞质中；蛋白质结构域分析表明，ApTPS有两个保守功能区：TPS（第22-497位氨基酸）和TPP（第532-772位氨基酸）。组织特异性分析表明，ApTPS基因在柞蚕幼虫脂肪体中表达量最高；柞蚕解除滞育过程中，ApTPS在脂肪体和血淋巴中的表达量均有所升高，且显著高于对照组（P<0.05），但血淋巴中表达量的升高滞后于脂肪体。【结论】结果提示ApTPS参与了柞蚕蛹滞育中碳水化合物代谢调控并在其中发挥重要作用，与柞蚕蛹滞育解除关系密切。

【目的】NEDD8是一种重要的蛋白质翻译后修饰蛋白，对底物蛋白的功能具有重要的调节作用。本研究旨在探索家蚕Bombyx mori中NEDD8的功能。【方法】利用RT-PCR技术，从家蚕BmN细胞中克隆了家蚕NEDD8完整的开放阅读框。通过实时荧光定量PCR（qRT-PCR）技术检测家蚕NEDD8在不同发育阶段、5龄第3天幼虫不同组织中以及BmNPV感染BmN细胞后的相对表达量。通过构建GFP融合表达的重组BmNPV (B. mori  nucleopolyherovirus)感染家蚕BmN细胞，在共聚焦显微镜下观察NEDD8在细胞中分布情况，用GFP抗体进行Western blot验证。【结果】克隆获得了NEDD8基因。序列分析表明，家蚕NEDD8高度保守，与家蚕泛素蛋白氨基酸序列一致性最高。qRT-PCR分析结果表明，NEDD8在家蚕的不同组织中均有表达，其中头部中表达量最高，其次是丝腺中，而在精巢和卵巢中表达量最低；在家蚕5龄第3 天幼虫始到化蛹后第3天NEDD8的表达量开始逐渐增加，化蛾后降至低水平；在家蚕杆状病毒感染BmN细胞的早期和极晚期NEDD8的表达量都有明显增加。GFP-NEDD8融合表达定位显示NEDD8在BmN细胞内普遍存在，分布于整个细胞中，并且在感染48 h后存在细胞质内的聚集现象。【结论】NEDD8编码序列在物种间高度保守；NEDD8在家蚕幼虫头部中表达量最高，在化蛹阶段表达量逐渐增加；NEDD8在BmN细胞内普遍存在并且可能与参与BmNPV复制。本研究所得结果为进一步研究NEDD8在家蚕中的生物学功能及修饰底物蛋白的作用机制奠定了基础。

【目的】本研究旨在筛选小菜蛾Plutella xylostella应对玫烟色棒束孢Isaria fumosorosea侵染的免疫应答及其网络调控基因，以进一步探讨小菜蛾对玫烟色棒束孢的防御机制。【方法】采用第二代高通量测序技术RNA-seq，对处理后12 h的感染玫烟色棒束孢和健康（平行对照）的小菜蛾4龄幼虫转录组进行了测序，通过生物信息学分析对得到的差异基因进行了功能注释和分类，对差异基因参与的信号通路进行了分析。【结果】在感菌和健康小菜蛾幼虫转录组两个表达谱里，分别获得了12 346 987和12 315 210个clean reads，有60.93%和61.26%的reads分别能比对到参考基因库里，其中完美匹配（perfect match）的比例分别为32.15%和32.73%。共得到351个显著差异表达基因（differentially expressed unigenes, DEUs），上调表达基因有275个，下调表达基因有76个，与免疫防御反应潜在相关的基因有156个。GO (Gene Ontology)富集分析有102个DEUs分布到46个GO term里，KEGG (Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes）pathway富集分析结果显示，有132个DEUs显著富集在13个代谢通路(pathway)里。【结论】这些差异表达基因中，大部分编码潜在的与免疫识别及调控相关的基因，集中在能量代谢、疾病反应和防御反应等相关通路。研究结果为挖掘与玫烟色棒束孢侵染相关的小菜蛾免疫应答候选基因提供了重要数据库，也为阐明小菜蛾对玫烟色棒束孢的免疫机制奠定理论基础。

【目的】为明确水稻主要害虫稻纵卷叶螟Cnaphalocrocis medinalis(Guenée)幼虫肠道细菌的群落结构和多样性。【方法】利用Illumina MiSeq技术对稻纵卷叶螟4龄幼虫肠道细菌的16S rDNA V3-V4变异区序列进行测序，应用USEARCH和QIIME软件整理和统计样品序列数和操作分类单元（operational taxonomic unit，OTU）数量，分析4龄幼虫肠道细菌的物种组成、丰度和多样性。【结果】稻纵卷叶螟4个数量不同的4龄幼虫样本（1, 2, 3和5头）共得165 386条reads，在97%相似度下可将其聚类为604个OTUs。总共注释到22个门，43个纲，82个目，142个科，204个属，244个种。其中在门水平上，主要优势菌为变形菌门（Proteobacteria）（相对丰度26%~34%）和放线菌门（Actinobacteria）（23%~32%）；在纲水平上，主要优势菌为放线菌纲（Actinobacteria）（相对丰度23%~32%）、酸杆菌纲（Acidobacteria）（9%~11%）、α-变形菌纲（Alphaproteobacteria）（10%~13%）、β-变形菌纲（Betaproteobacteria）（6%~8%）和γ-变形菌纲（Gammaproteobacteria）（6%~12%）；在科水平上，共有优势菌为类诺卡氏菌科（Nocardioidaceae）、丛毛单胞菌科（Comamonadaceae）、黄单胞菌科（Xanthomonadaceae）、鞘脂单胞菌科（Sphingomonadaceae）和芽单胞菌科（Gemmatimonadaceae）等。在属水平上，4个样本前5位优势属中，类诺卡氏属Nocardioides和鞘脂单胞菌Sphingomonas为共有优势属。稻纵卷叶螟肠道细菌Simpson指数、Shannon指数、Ace指数和Chao指数分别为0.16~0.65，0.94~3.22，212~488和210~490。【结论】稻纵卷叶螟幼虫肠道细菌多样性比较丰富，个体间微生物群落结构和多样性有差异。不同数量样本数据与总体数据有助于综合反映稻纵卷叶螟种群肠道微生物状况。本研究结果为进一步研究稻纵卷叶螟肠道微生物的功能及其在防治中的应用奠定了基础。
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【目的】Cry1A和Cry2A 类Bt蛋白通过特异性地与昆虫中肠上的受体蛋白结合而发挥杀虫作用，现已广泛应用于转基因抗虫作物。本研究旨在进一步明确Cry2A 类蛋白的作用机制和Cry1A受体蛋白在Cry2A发挥毒力中的作用。【方法】本研究首先提取了棉铃虫 Helicoverpa armigera的BBMV，制备了钙粘蛋白（CAD）、氨肽酶N（APN）和碱性磷酸酯酶（ALP）3种受体蛋白的抗体和抗血清；然后，利用Western blot检测BBMV上这3种受体蛋白后，利用抗体封闭技术比较了敏感棉铃虫和Cry1Ac抗性棉铃虫（BtR）中3种受体蛋白的抗血清对Cry1Ac和Cry2Aa毒力的影响。【结果】对敏感品系棉铃虫，这3种已知的Cry1Ac受体蛋白抗血清显著地降低了Cry1Ac和Cry2Aa的毒力。其中APN抗血清对Cry1Ac毒力的影响最大，棉铃虫幼虫的死亡率降低了84.44%；ALP抗血清对Cry2Aa的毒力影响最大，棉铃虫幼虫死亡率比对照降低了71.04%。Cry1Ac对Cry1Ac抗性棉铃虫（BtR）的毒力显著降低，Cry2Aa的毒性也减弱。在Cry1Ac抗性棉铃虫（BtR）中，3种受体抗血清对Cry1Ac的影响比在敏感棉铃虫中的影响小，尤其是CAD和APN抗血清对Cry1Ac毒力的抑制率显著低于在敏感棉铃虫中的抑制作用；CAD和ALP抗血清对Cry2Aa毒力的影响与在敏感棉铃虫中的影响差异不显著，但APN抗血清可以显著降低Cry2Aa对Cry1Ac抗性棉铃虫（BtR）的毒力。【结论】棉铃虫CAD，APN和ALP不仅参与了Cry1Ac的杀虫过程，也对Cry2Aa毒力有一定的影响，而且这3种蛋白可能与棉铃虫对Cry1Ac和Cry2Aa产生抗性及交互抗性相关。

【目的】本文旨在明确营养状况不同造成的梨小食心虫Grapholitha molesta(Busck)雌、雄蛹重量差异对其羽化的成虫产卵量、产卵期、寿命及下一代（F₁）幼虫发育的影响。【方法】室内条件下，通过不同的饲养方法，获得个体重量不同的梨小食心虫雌、雄蛹，待其羽化交配后，记录其产卵量、产卵时间和成虫寿命；卵孵化前后，分别测量卵和初孵幼虫大小，计算卵孵化率，统计幼虫发育历期。【结果】雌蛹重量对梨小食心虫的成虫产卵量影响显著，其重量与产卵量呈正相关(y=15.505x-59.292)；同一条件下，雌蛹与雄蛹重量也呈正相关（y=0.823x-0.538）。同时，雌蛹重量对成虫产卵期影响也较大，蛹重大的个体羽化的雌虫比蛹重小的个体羽化的雌虫产卵高峰期提前1 d；较重、中等和较轻蛹羽化出的雌虫个体每天产卵量高于10粒/雌的时间分别为9～10, 7和5～6 d；产卵量高于5粒/雌的时间分别为12~13, 9和6~7 d。而雄蛹重量对产卵量、雄成虫寿命影响没有明显影响。较轻的蛹羽化的雌成虫寿命比较重蛹羽化的雌成虫短2~3 d；而雄蛹重量对其羽化的雄成虫寿命影响没有明显规律。雌、雄蛹重量对其羽化成虫的卵孵化率、卵和初孵幼虫的大小影响均不显著，对F₁幼虫发育历期影响也不显著。【结论】梨小食心虫雌蛹重对羽化成虫的产卵量和产卵期等影响显著，田间防治时应注意在不同条件下完成发育的个体，尤其是雌虫，由于营养差异引起的个体大小对随后种群增长的影响。

【目的】随着全球气候变暖，夏季短时极端高温发生的频率逐渐增加。本研究旨在探明二点委夜蛾Athetis lepigone幼虫期对高温的适应性。【方法】将二点委夜蛾不同日龄（1, 6, 12和18日龄）幼虫在不同高温（35, 38和41℃）条件下暴露不同时间（0.5, 1, 2, 4和6 h）后转移至适温（26℃）继续饲养，观察短时高温对其存活率、发育历期、化蛹率、羽化率、雌虫寿命、单雌产卵量及次代卵孵化率的影响。【结果】幼虫期短时高温暴露的温度和时间对二点委夜蛾幼虫的存活率和发育历期有显著影响，而对化蛹率、成虫羽化率、雌虫寿命、单雌产卵量以及次代卵孵化率影响不显著。随着温度的升高和处理时间的延长，幼虫存活率逐渐降低，发育历期逐渐延长。其中，18日龄的幼虫最为敏感，38℃和41℃暴露6 h后存活率分别为58.3%和17.7%，显著低于对照，发育历期分别为25.5 d和29.2 d，较对照显著延长。【结论】幼虫期经历短时高温暴露仅对幼虫的存活和发育历期有影响，而对后续蛹和成虫的生长发育及成虫繁殖力没有影响。

【目的】探讨茉莉酸诱导的桑树Morus alba枝挥发物对桑天牛卵啮小蜂Aprostocetus prolixus趋性行为的影响，研究桑枝挥发物的动态变化规律，为揭示茉莉酸诱导桑枝产生的间接抗虫作用机理提供理论依据。【方法】本试验利用嗅觉测定仪，研究了不同浓度茉莉酸处理24, 48和72 h后的桑枝对桑天牛卵啮小蜂的引诱作用，并采用气相色谱-质谱联用仪（GC/MS）对茉莉酸（1 000 μmol/L）处理不同时间后的桑枝挥发物组分进行了分析。【结果】在10 μmol/L 茉莉酸处理后的不同时间内，桑枝对桑天牛卵啮小蜂均未表现出明显的引诱作用；当茉莉酸浓度为100 μmol/L时，桑枝仅在处理48 h后对桑天牛卵啮小蜂具有显著的引诱活性；然而，经1 000 μmol/L茉莉酸处理24 h和48 h后，桑枝对桑天牛卵啮小蜂的引诱活性明显高于对照（24 h, P<0.05；48 h, P<0.01），72 h后桑枝的引诱作用消失。Spearman等级相关性分析表明，茉莉酸浓度与桑枝对桑天牛卵啮小蜂的引诱百分率显著正相关（P=0.791, P=0.006）。茉莉酸（1 000 μmol/L）处理桑枝挥发物组分包括醇类、酯类、萜类物质、芳香族化合物和含氮化合物，其中萜类物质种类最多（13种）。随着处理时间的变化，桑枝挥发物组分及总释放速率也随之发生改变。处理24 h后，桑枝释放出18种组分，比对照多11种组分，其总释放速率也明显提高，为对照的8.2倍；48 h后桑枝释放出22种组分，比对照多15种组分，其总释放速率进一步提高，为对照的44.6倍；72 h后桑枝释放出13种组分，比对照多6种组分，其总释放速率大幅降低，为对照的3.9倍，但与对照无显著差异。【结论】随着茉莉酸浓度的提高，桑枝对桑天牛卵啮小蜂的引诱活性逐渐增强。茉莉酸能诱导桑枝挥发物的大量释放及新组分的产生。

【目的】蝎蛉科（Panorpidae）是长翅目（Mecoptera）最大的科，是重要的生态指示昆虫。然而，由于对环境条件要求苛刻，饲养困难，其幼期研究很不充分。【方法】本研究通过人工饲养成虫获得了长蝎蛉Panorpa macrostyla Hua的卵、幼虫和蛹等全部虫态，运用光学显微镜和扫描电子显微技术观察了其超微形态，并简要记载了其生物学特性。【结果】长蝎蛉每年发生1代，成虫发生于6月末至8月初。卵椭球形，卵壳表面覆盖一层隆起的网状结构。幼虫蠋型，具3对分4节的胸足和8对不分节的腹足；头壳高度骨化，具1对由26个小眼组成的复眼和1对3节的触角，口器咀嚼式；腹部第1-9节背面具有成对的背毛突，第10节仅有1根背毛突，腹部末端具有一个可伸缩的吸盘；呼吸系统为周气门式，具1对前胸气门和8对腹气门。幼虫共4个龄期，以预蛹期在土室内越冬。蛹为强颚离蛹，外形接近成虫，雄蛹腹部末端膨大。【结论】基于幼虫形态特征，长蝎蛉明显区别于新蝎蛉属Neopanorpa、华蝎蛉属Sinopanorpa、双角蝎蛉属Dicerapanorpa以及单角蝎蛉属Cerapanorpa幼虫。然而，长蝎蛉幼虫头部刚毛L2和SO2，腹部末节刚毛D2, SD1和SD2端部均膨大呈棒状，与蝎蛉属Panorpa其他种类区别明显，表明长蝎蛉的属级地位需要进一步研究。

【目的】产自缅甸北部胡康河谷的缅甸琥珀形成于白垩纪中期。其艺术价值很高，同时其内含物的生物多样性程度也很高，故其科学价值也不可估量。显微CT能够提供化石（琥珀）内部解剖结构的高分辨率断层图像，故该方法日渐成为目前琥珀研究中的常用方法之一。然而在可见光下可见的琥珀内的生物结构，在X射线下却有不同的结果，这与现生研究材料在显微CT下的表现非常不同。本研究对产自胡康河谷的9块缅甸琥珀进行显微CT检测，试图对这个特殊的现象进行较为系统的解读。【方法】利用数码相机（Nikon 5200D）拍摄琥珀照片，并用Helicon Focus 5.3软件合成。通过显微CT技术扫描琥珀和计算机断层重建技术重建出缅甸琥珀内含物的三维结构形态。【结果】显微CT检测结果主要分为3种：完全无衬度、部分结构有衬度和整体结构有较好衬度。本研究对有较好衬度的琥珀内含物进行了三维重建，展示了琥珀内含物的外部和内部三维结构。【结论】琥珀内含物的可见光成像和X射线成像不存在一一对应关系，其原因和琥珀保存的好坏以及琥珀的密度差、琥珀围岩之间的对比度差异有关。琥珀形成和埋藏过程中的物理和化学变化非常复杂，其机理的探究也更为复杂和困难，本文对这个现象的主要类型做了较为初步的阐述，后续研究需要更为全面的选样和更为严格的实验设计才能够最终解决这个埋藏学上的难题。

由于DDT等现代杀虫剂的问世，臭虫在20世纪40-50年代以后在全球大部分地区尤其是发达国家和地区销声匿迹，但近10多年来臭虫在部分国家和地区重新出现。本文对其再猖獗原因、生物学和行为、饲养、抗药性、监测与防治策略进行了综述，旨在引起国人的重视，对今后臭虫的监测和防治起到抛砖引玉的作用。本文分析了近15年有关温带臭虫Cimex lectularius L.和热带臭虫C. hemipterus(F.)的研究文献。臭虫再猖獗被认为是因为它对目前使用的杀虫剂例如拟除虫菊酯类等产生抗性以及频繁的地区及国际交往等因素造成的。简单、经济和大规模臭虫种群饲养方法——人工膜饲喂法的研发为我们开展臭虫生物学和生态学研究提供了便利。控制和根除臭虫目前仍较困难，采用害虫综合治理(integrated pest management, IPM)策略，包括臭虫知识宣传、主动监测、非化学防治方法（例如：经常洗涤床上用品、蒸汽熏蒸、热处理、使用床垫罩、在家具腿下放置臭虫拦截装置）、有选择使用杀虫剂以及定期监测及反复防治等措施，可达到很好的防控效果。在我国部分地区，臭虫发生也呈上升趋势，工人宿舍和火车车厢是常见的臭虫为害环境。有必要对我国臭虫发生现状及其抗药性进行调查与监测。还应借鉴国际先进技术，研制出我国适用的、有效的监测工具和防治方法，并根据我国具体国情制定出切实可行的防治标准。同时积极开展臭虫科普宣传，做到早发现、早防治，防止臭虫再猖獗和扩散。