【目的】探索双委夜蛾Athetis dissimilis (Hampson)的耐寒策略及越冬虫态。【方法】以室内双委夜蛾种群为虫源，分别测定3龄、4龄、5龄、6龄和老熟幼虫以及蛹的过冷却点（supercooling point, SCP）、结冰点（freezing point, FP）、含水量以及脂肪、蛋白质、甘油、山梨醇和海藻糖含量。【结果】不同龄期幼虫和蛹之间过冷却点和结冰点存在显著差异，低龄幼虫SCP和FP较高；随着龄期增长，二者均降低，老熟幼虫的SCP和FP最低，分别为-18.20℃和-11.72℃。不同龄期幼虫和蛹的生化物质含量均存在显著差异。随着龄期的增加，含水量和甘油含量呈降低的趋势，蛹的含水量（65.33%）和甘油含量（154.90 μg/mg）最低；脂肪和蛋白质含量随龄期的增加呈现增加的趋势，蛹的脂肪和蛋白质含量最高，分别为25.36%和2 298.37 μg/mg。老熟幼虫海藻糖含量相对较高（57.28 mg/g），而山梨醇含量较低（15.49 mg/g）。【结论】与其他龄期相比，双委夜蛾老熟幼虫和蛹的耐寒性最强，是最可能的越冬虫态；脂肪、蛋白质和海藻糖可能是双委夜蛾重要的耐寒物质。  

【目的】明确红、绿两种色型豌豆蚜Acyrthosiphon pisum (Harris)对大气CO₂浓度升高响应的生理机制。【方法】通过CO₂人工气候箱，设置中等浓度(550±27 μL/L)和高浓度(750±37 μL/L)CO₂浓度，并以当前浓度（375±18 μL/L）为对照。在设置以上CO₂浓度的人工气候箱种植蚕豆苗并接入6 h以内的豌豆蚜初产若蚜，记录各虫态的蜕皮和存活情况直至羽化。测定连续3代饲养在蚕豆上的红、绿两种色型豌豆蚜体内营养物质含量和消化酶活力，同时测定蚕豆叶片组织营养物质含量。【结果】大气CO₂浓度升高可显著增加蚕豆叶片内可溶性蛋白、可溶性糖、游离氨基酸和淀粉含量。中等CO₂浓度(550±27 μL/L)条件下，F₀代两种色型豌豆蚜体内营养物质含量较对照均无显著变化，F₂代蛋白质、总氨基酸、可溶性糖和糖原含量较对照均显著增加，总脂肪和游离脂肪酸含量较对照显著降低，且F₂代绿色型豌豆蚜体内可溶性糖含量显著高于红色型的。高CO₂浓度(750±37 μL/L)条件下，3世代两种色型豌豆蚜体内蛋白质、总氨基酸、可溶性糖和糖原含量均显著高于对照，总脂肪和游离脂肪酸含量显著低于对照。其中，F₁和F₂代绿色型豌豆蚜体内蛋白质、总氨基酸、可溶性糖和糖原含量显著高于红色型的。CO₂浓度(550±27和750±37 μL/L)升高条件下，F₀代两种色型豌豆蚜体内消化酶活力较对照无显著变化，F₂代胃蛋白酶和胰蛋白酶活力较对照显著降低，脂肪酶和淀粉酶活力显著升高，3世代两色型间消化酶活力均无显著差异。【结论】高CO₂浓度下，蚕豆叶片组织营养物质含量发生改变从而引起以之为食的豌豆蚜体内营养物质含量与消化酶活力的变化，且绿色型豌豆蚜体内蛋白质、总氨基酸、可溶性糖和糖原含量的变化大于红色型豌豆蚜的，这对未来大气CO₂浓度升高的环境下豆科植物主要害虫豌豆蚜的防治具有参考价值。

【目的】研究氟化钠（NaF）对鳞翅目模式生物家蚕Bombyx mori精巢和卵巢组织的形态结构以及抗氧化酶活性及其基因mRNA表达的影响，旨在探讨NaF对昆虫的生殖腺损伤及其机理。【方法】给家蚕幼虫添食不同浓度NaF溶液（0, 25, 50, 100, 200 mg/L）浸泡过的桑叶，调查不同性别家蚕5龄幼虫生殖腺中脂质过氧化物丙二醛（MDA）的含量，超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）的活性及其基因转录表达水平的变化，并通过石蜡切片、HE染色技术观察了生殖腺结构变化情况。【结果】与对照组相比，NaF对雌雄家蚕MDA含量均具有浓度-效应关系，MDA含量随NaF添食浓度的升高而增加。随着NaF添食浓度的增加，SOD和CAT活性都表现为先升高后降低的变化趋势，但均高于对照组。Pearson相关性分析显示，SOD和CAT酶活性变化有显著相关性（雄: R=0.865，P=0.000；雌: R=0.766，P=0.001），雌雄CAT酶活性与其基因mRNA表达水平也具有正相关性。雌雄家蚕生殖腺中GSH-Px活性随着NaF添食浓度的升高而增加，显示浓度-效应关系，其酶活性与gsh-px的mＲNA 水平的表达具有显著相关性。不同性别家蚕在添食NaF后，雄性的抗氧化酶活性变化较雌性更为敏感。HE染色观察到雌雄生殖腺的形态结构发生变化，表现为形态畸形，细胞内空泡增大，生殖细胞数目相对减少。且伴随着NaF添食浓度的增加，生殖腺损伤越严重。【结论】家蚕幼虫添食NaF不仅引起其雌雄生殖腺的结构发生改变，而且还导致其生殖腺中的抗氧化酶活性及其基因mRNA转录水平发生变化。

【目的】家蚕Bombyx mori翅原基在生长分化过程中伴随着造血器官和翅囊等组织的消失。本研究旨在分析家蚕翅原基生长分化过程中是否存在细胞凋亡和细胞自噬。【方法】制作蛹期0 d翅原基石蜡切片，利用TUNEL法检测细胞凋亡情况；提取5龄第3天、5龄第6天、上簇第1天、预蛹期、蛹期0 d及蛹期第3天的翅原基总RNA，反转录成cDNA，利用定量PCR检测凋亡和自噬相关基因的表达水平；检测了细胞凋亡相关的Caspase 3和细胞自噬相关的酸性磷酸酶活性。【结果】TUNEL染色发现蛹期0 d的翅原基出现部分细胞凋亡现象；细胞凋亡相关基因Caspase 3和Nc主要在5龄幼虫期有高水平表达，细胞凋亡抑制因子IAP主要在幼虫末期有较高水平的表达；Caspase 3酶活性在上簇第1天出现峰值；细胞自噬相关基因Atg5, Atg6, Atg8和Atg12主要在幼虫末期有较高水平的表达；酸性磷酸酶活性也主要在幼虫末期较高。【结论】在幼虫期可能存在细胞凋亡，抑制了翅原基细胞的增殖，进而阻止了翅原基的生长分化；在幼虫末期可能同时存在细胞凋亡和自噬，促进翅囊等的退化，同时阻止了翅原基细胞的增殖，推动了翅原基向蛹翅的发育。

【目的】保幼激素反应区(juvenile hormone response region, JHRR)是在黑腹果蝇Drosophila melanogaster Krüppel homolog 1 (Kr-h1)启动子转录调控区中鉴定获得的长120 bp的核苷酸序列。本研究旨在检测果蝇JHRR中3个类E-box序列（2个B box和1个C box）对JHRR核蛋白结合能力的影响，以及保幼激素（juvenile hormone, JH）、JH受体Met（Methoprene-tolerant）和热激蛋白Hsp83对JHRR核蛋白结合能力的调控。【方法】利用凝胶迁移阻滞(electrophoretic mobility shift assay, EMSA)技术分析果蝇JHRR中2个B box或1个C box突变后JHRR与Kc细胞中核蛋白的结合情况；提取游走早期JH滴度较高时期JH缺失果蝇（Aug21-GAL4>UAS-Grim）、Met/Gce双缺失果蝇(Met²⁷gce^2.5k)、Met超表达果蝇(Lsp2-GAL4>UAS-Met-V5)以及Hsp83纯合突变果蝇(Hsp^8308445)脂肪体组织中的核蛋白，利用EMSA技术分析它们对JHRR核蛋白结合能力的调控情况。【结果】 EMSA检测结果表明，B box或C box突变后均可降低JH促进的JHRR与Kc细胞中核蛋白的结合，且C box的效果更强；JH缺失果蝇、Met/Gce双缺失果蝇脂肪体组织中核蛋白与JHRR的结合几乎检测不到，而在Hsp83纯合突变果蝇脂肪体组织中核蛋白与JHRR的结合显著下降。相反，JHRR与核蛋白的结合在Met超表达果蝇中显著增强。【结论】B box和C box对JHRR与核蛋白结合是必需的，且JHRR与核蛋白的结合依赖于JH和Met，并且受Hsp83的调控。

【目的】探究中华蜜蜂Apis cerana cerana信号识别颗粒9（signal recognition particle 9, SRP9）基因的序列, 获得纯化的重组蛋白，为探究其蛋白功能奠定基础。【方法】利用RT-PCR方法，以中华蜜蜂的cDNA为模板扩增中华蜜蜂SRP9基因编码区，并通过软件MEGA5.1构建系统发育树，运用PrediceProtein和SWISS-MODEL等软件预测分析蛋白结构；用大肠杆菌Escherichia coli表达系统进行原核表达；采用尿素洗脱法进行重组蛋白纯化。【结果】扩增得到的中华蜜蜂SRP9基因编码区长为237 bp，命名为AccSRP9。该基因编码78个氨基酸，编码蛋白的相对分子量为9.36 kD，等电点为9.17。系统进化树分析表明，AccSRP9与西方蜜蜂Apis mellifera的SRP9和小蜜蜂Apis florea的SRP9聚成一支。蛋白质二级结构预测发现其含有2个α-螺旋区和3个β-折叠区。利用同源建模获得蛋白质的三维结构。将AccSRP9连入表达载体pGEX-6P-1并在BL21(DE3)中进行原核表达，发现该重组蛋白表达在包涵体中，经蛋白纯化，最终获得了N端带GST标签的重组蛋白pGEX-6P-1-SRP9。【结论】本研究成功克隆了中华蜜蜂SRP9基因AccSRP9，对其序列进行了分析，并获得了带有标签的重组蛋白，为进一步研究该基因的功能提供参考和材料。

【目的】为了解小地老虎 Agrotis ypsilon (Rottemberg)雌蛾触角及幼虫头部感受器的种类、形态、数量和分布。【方法】利用扫描电镜技术观察了小地老虎雌蛾触角及5龄幼虫头部形态及触角和口器上的感受器。【结果】小地老虎雌蛾触角上共分布有5种类型的感受器，分别为毛形感器、刺形感器、腔锥形感器、耳形感器、锥形感器。5龄幼虫头部呈椭圆形，口器下口式，为咀嚼式口器，头部可见触角、单眼、蜕裂线、刚毛、唇基、额、上唇、上颚、下颚、下颚须、下唇、下唇须及吐丝器等结构；触角上着生1个毛形感器和4个锥形感器；上颚分布有1个毛形感器和1个刺形感器；在下颚及下颚须上共分布有3个毛形感器、3个刺形感器、4个锥形感器和1个栓锥形感器；下唇须上有1个栓锥形感器和1个锥形感器；吐丝器前方两侧有1对刺形感器。【结论】小地老虎雌蛾触角上的感受器比幼虫头部的多，推测雌蛾利用它们来完成寄主植物和产卵环境选择；幼虫口器附肢上的感受器具有味觉和嗅觉功能，幼虫利用它们判断食物的种类和适合性。

【目的】研究丁香酸（syringic acid, SY）对舞毒蛾核型多角体病毒（LdNPV）致死及亚致死作用的影响，为舞毒蛾Lymantria dispar L.的防治提供科学依据。【方法】采用食料给毒法进行生物测定，评估LdNPV及SY与LdNPV共同对舞毒蛾2龄幼虫的致死和亚致死作用。【结果】取食添加丁香酸人工饲料和正常人工饲料的舞毒蛾幼虫LdNPV致死中浓度（LC₅₀）分别为91.1 OBs/μL和194.8 OBs/μL。当LdNPV浓度为2 400 OBs/μL，取食添加SY的饲料及正常人工饲料的舞毒蛾幼虫LdNPV致死中时间（LT₅₀）分别为9.3 d和10.1 d，当LdNPV浓度为24 000 OBs/μL时，其LT50分别为7.8 d和8.1 d，LdNPV的浓度越高致死中时间越短。丁香酸增加了LdNPV对舞毒蛾幼虫的致病力，降低了LdNPV对舞毒蛾幼虫的致死中浓度，缩短了致死中时间。LdNPV对取食正常饲料的雌、雄幼虫历期和蛹期及雌蛾寿命影响不显著, 但显著缩短了雄虫寿命，降低了平均每雌产卵量。LdNPV对取食添加丁香酸饲料的幼虫产生明显的亚致死效应，并且LdNPV浓度高于240 OBs/μL时雌、雄幼虫历期延长、雄蛾寿命缩短，雄性羽化率降低，雌成虫产卵量降低，产卵量较对照减少一半左右。【结论】结果提示，丁香酸可提高LdNPV对舞毒蛾幼虫的致病力，增加LdNPV对舞毒蛾的亚致死作用。

【目的】确定在韭蛆——韭菜迟眼蕈蚊Bradysia odoriphaga防治过程中科学合理地使用臭氧（O₃）水的方法，并使其发挥最大用途。【方法】在露地韭菜田块分别浇灌10, 15, 20和30 mg/L的O₃水,在平地覆膜韭菜和小拱棚韭菜中分别浇灌5, 10和15 mg/L的O₃水，同时在室内用10~15 mg/L O₃水处理不同虫态的韭菜迟眼蕈蚊（成虫、幼虫和蛹）和韭菜植株，2和10 mg/L O₃水浸泡韭菜种籽。然后，测定了O₃水对韭蛆防治效果，并评价了O₃水对韭菜种籽发芽和生长等的影响。【结果】覆膜条件下，浇灌浓度为10~15 mg/L的O₃水，对韭蛆的防治效果非常显著，甚至高达100%；而露地浇灌O₃水对韭蛆无明显的防治效果；各种栽培模式下浇灌O₃水并没有加重韭蛆对韭菜的直接危害。室内条件下，O₃水导致成虫、幼虫和蛹的体形变畸或致死，甚至虫体表面明显被腐蚀；O₃水可促进韭菜前期生长，增加株高，但不利于修剪后的须根重新萌发。O₃水浸泡韭菜种籽后即时用水清洗，将不影响种籽正常发芽；若只浸泡不清洗，将严重抑制种籽发芽。【结论】采用O₃水防治韭蛆的方法值得推荐，但在封闭条件下效果最佳。

【目的】草地螟Loxostege sticticalis L.具有间歇性猖獗的特点。本研究旨在揭示我国草地螟第2和3个暴发周期结束的原因，以加深对草地螟间歇性猖獗机理的认识。【方法】利用轨迹分析方法，分析1983和2009年草地螟成虫的迁飞动态；通过计算气温距平、降雨量距平百分率，探索影响种群波动的气候背景；利用月平均再分析资料，分析异常气候条件的大气环流背景。【结果】1983年6月我国东北及俄罗斯东西伯利亚地区出现极端低温多雨天气，而我国华北北部出现严重的干旱，引发了大范围的草地螟种群崩溃事件。1983年秋季，集中越冬区仅局限在山西北部的高海拔地区。山西北部天敌寄生率在1984年春天达到较高的水平，进一步压低了草地螟种群的数量，导致第2个发生周期的结束。2009年6月东北亚地区出现了与1983年6月类似的极端恶劣气候，致使我国东北、华北以及俄罗斯东西伯利亚、远东地区再次出现大范围的草地螟种群崩溃事件，直接导致第3个周期的结束。大气环流异常是这两次极端气候事件的直接原因。【结论】极端气候事件已成为我国草地螟发生周期结束的重要因素。鉴于极端气候的出现具有很大的不确定性，我国草地螟发生周期的结束目前尚难以实现长期预测。

【目的】本研究的目的是开发一种光学遥感技术实现在农田昼夜连续自动地监测农业害虫。【方法】一个望远镜通过对准远处的暗箱，得到一个低亮度水平的基线。当昆虫在望远镜的视野中飞过时，它散射的太阳光的光学信息就被连接到望远镜的记录系统采集到。在夜晚我们使用很强的灯光替代太阳光来照亮昆虫。【结果】昆虫计数、昆虫的振翅频率分析及反射光谱记录都获得成功。这表明使用暗场背向散射探测系统监测昆虫是可行的。手动释放的已知昆虫种类都具有独特的光谱特性。几种害虫特别是桃蛀螟Conogethes punctiferalis (Guenée)和短角异斑腿蝗Xenocatantops brachycerus (Willemse)都用本文描述的方法进行了成功识别。【结论】用暗场背向散射探测系统昼夜连续监测田间农业害虫是可行的。跟预期的一样，散射的振翅频率和光谱信息可以用来识别害虫。

【目的】研究地理位置接近的山地区域中华蜜蜂Apis cerana cerana的形态与遗传多样性，对开展中华蜜蜂遗传资源的保护具有重要意义。重庆多山，如大巴山、武陵山、大娄山等，当地植被茂盛、蜜源植物丰富，适宜中华蜜蜂的生存繁衍。因此，重庆中华蜜蜂是研究同一地域复杂地形下中华蜜蜂形态和遗传分化的良好对象。本研究首次全面调查重庆地区中华蜜蜂种质资源多样性，分析不同生境中华蜜蜂种质资源的分化，考察潜在的基因交流情况，为中华蜜蜂的资源保护提供参考。【方法】运用吻长、翅长、翅宽、翅面积、肘脉指数、第3、4背板长等形态指标对来自重庆不同山脉和周边地区的139群中华蜜蜂进行形态测量和统计，同时对mtDNA tRNA^leu~COⅡ段非编码区序列进行PCR扩增并测序分析。【结果】形态分析显示，以亚热带季风气候为主的武陵山、大娄山地区中华蜜蜂能够区分以亚热带山地气候为主的大巴山地区聚群, 以及重庆西、北部的聚群。Structure群体结构分析mtDNA非编码区单倍型序列发现，不同山地生境中华蜜蜂种群之间存在基因交流，而两大山系与重庆周边地区中华蜜蜂种群之间同样存在基因交流。此外发现了3个新的东方蜜蜂单倍型，分别是大巴山CqH4、大娄山CqH7、西部丘陵CqH13。【结论】重庆中华蜜蜂不同地理种群形态发生了分化，表现出较强适应性。各山脉和地区中华蜜蜂种群之间遗传结构接近，具有共同遗传单倍型，暗示基因交流发生在不同地理种群中，导致重庆中华蜜蜂的遗传分化不明显。

【目的】本研究旨在评估dsRNA对飞蝗Locusta migratoria Knickkopf (Knk)基因mRNA和蛋白表达的沉默效率，以期为基于RNAi技术探索飞蝗体内基因功能的研究提供基础资料。【方法】选择飞蝗2龄第1天的若虫，将体外合成的飞蝗Knk基因dsRNA注射进入飞蝗体腔内，注射后48， 72和96 h分别解剖试虫的腹部表皮，一半用于RT-qPCR方法检测其mRNA表达；另一半用于Western blot法检测其蛋白的表达量。【结果】dsRNA注射进入飞蝗体腔内48, 72 和96 h后，与对照相比，Knk mRNA水平相对表达量分别降低78.3％， 96.2％和95.1％；Knk蛋白表达量分别降低61.2％， 33.3％和52.9％。【结论】注射dsKnk能显著沉默飞蝗Knk基因mRNA水平和蛋白水平的表达，但mRNA水平的沉默效率高于蛋白水平。