【目的】悬铃木方翅网蝽Corythucha ciliata是专性危害悬铃木属Platanus植物的外来入侵害虫，本研究旨在获得该害虫触角中气味结合蛋白(OBPs)基因信息，以期寻求有效控制害虫的嗅觉分子靶标。【方法】利用Illumina HiSeq^TM 4000高通量测序技术对悬铃木方翅网蝽雌雄成虫触角进行转录组测序并对测序结果进行生物信息学分析；通过实时荧光定量PCR(qPCR)方法，分析OBP基因在悬铃木方翅网蝽雌雄成虫触角中的表达模式。【结果】对悬铃木方翅网蝽雌雄成虫触角6个样品的转录组测序，共获得 40.87 Gb clean reads，各样品的序列长度均达到6.31 Gb。转录组数据分析共鉴定出26个推测的悬铃木方翅网蝽OBP基因，其编码蛋白中24个(CcilOBP1-24)属于Classic OBPs，CcilOBP25/26属于Plus-C OBPs；与半翅目其他昆虫相关OBPs系统发育分析表明，大部分CcilOBPs形成独立一簇，少数与其他半翅目昆虫OBPs直系同源。qPCR分析显示，有11个OBP基因在雌雄成虫触角中表达量差异显著，其中有9个OBP 基因(CcilOBP5/6/9/10/17/18/21/24/25)在雄成虫触角中显著高表达，有2个OBP基因(CcilOBP14/16)在雌成虫触角中显著高表达。【结论】本研究获得了悬铃木方翅网蝽成虫触角气味结合蛋白基因信息，研究结果为生物控制该害虫提供了重要基础数据和候选分子靶标。

【目的】本研究旨在克隆与鉴定家蚕Bombyx mori C类清道夫受体基因BmSR-C，为探析其在家蚕免疫中的功能奠定基础。【方法】利用RACE技术克隆家蚕C类清道夫受体基因全长序列，并对其进行生物信息学分析。利用RT-PCR和qPCR方法对BmSR-C基因的时空表达情况进行检测。通过原核表达和Ni⁺亲和层析的方法获得BmSR-C重组蛋白，免疫昆明小鼠制备抗BmSR-C多克隆抗体。利用ELISA法和Western blot分别对鼠抗BmSR-C蛋白多克隆抗体的效价和特异性进行检测。构建家蚕BmSR-C的真核表达载体，转染家蚕BmE细胞，分析该蛋白的亚细胞定位情况。【结果】克隆获得家蚕BmSR-C基因(GenBank登录号: BGIBMGA004577)，其开放阅读框(ORF)全长为1 821 bp，编码606个氨基酸残基。BmSR-C具有典型的C类清道夫受体家族结构特征，主要由CCP, MAM和SO结构域以及靠近C端的单次跨膜结构域组成。进化分析结果显示鳞翅目昆虫SR-C单独聚为一支，家蚕BmSR-C与同为鳞翅目昆虫的草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda和大红斑蝶Danaus plexippus的同源蛋白亲缘关系最为接近。对BmSR-C基因的时空表达分析表明，BmSR-C在家蚕的马氏管和血细胞中高表达，而在其他组织中无明显表达；其在家蚕不同发育时期的血细胞中均有表达，且在4龄眠期的表达量达到峰值。ELISA检测结果显示，所制得抗体效价高达 1∶128 000；Western blot检测结果显示，该抗体可以特异性识别重组蛋白。家蚕BmE细胞中的亚细胞定位结果表明BmSR-C主要定位于细胞膜。【结论】获得家蚕C类清道夫受体基因BmSR-C的完整cDNA序列及其表达特征；成功制备了BmSR-C的多克隆抗体，利用家蚕BmE细胞在细胞水平上分析了BmSR-C的亚细胞定位情况，推测其参与家蚕的生长发育及病原微生物入侵的免疫反应，为进一步研究BmSR-C的生物学功能奠定了基础。

【目的】探索家蚕Bombyx mori miRNAs对化学感受蛋白基因表达的调控作用，以进一步研究 miRNAs及其靶基因在昆虫化学识别中的作用。【方法】利用生物信息学方法预测和筛选可能作用于家蚕化学感受蛋白CSPs基因家族成员的miRNAs；实时荧光定量PCR分析预测获得的候选miR-301和其作用的靶基因在家蚕成虫不同组织中的表达变化；构建miR-301预测靶基因3′-UTR的双荧光素酶报告载体，与合成的miR-301 mimics或阴性对照转染人胚肾细胞HEK293，通过双荧光素酶报告基因检测系统中荧光素酶活性变化检测miR-301对其靶基因表达的调控作用。【结果】生物信息学分析结果发现，家蚕化学感受蛋白基因csp9是miR-301的预测靶基因，二者的结合位点位于csp9的3′-UTR区。实时荧光定量PCR检测结果表明，miR-301在交配后家蚕雌雄成虫触角和雄成虫头部都显著上调表达，靶基因csp9在对应组织中表达则显著下调。二者共转染HEK293细胞后，双荧光素酶检测结果表明，miR-301可以通过与csp9 3′-UTR的互作，显著抑制上游荧光素酶报告基因的表达。【结论】家蚕化学感受蛋白基因csp9是miR-301的靶基因，miR-301通过与靶基因3′-UTR的结合，在翻译水平上抑制csp9的表达。

【目标】N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖糖苷酶（NAGase）是一种重要的几丁质分解酶，能从N-乙酰葡萄糖苷的非还原端催化去除β-1,4-N-乙酰-D-氨基葡萄糖残基，参与了昆虫外骨骼的蜕皮过程。研究蜜蜂该酶的特征有助于阐明其在蜜蜂发育过程中的作用机制。【方法】采用40%-70%硫酸铵分级沉淀、DEAE-纤维素离子交换层析和葡聚糖G-100凝胶过滤层析的方法从意大利蜜蜂Apis mellifera ligustica幼虫体内分离纯化NAGase。以对-硝基苯-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷（pNP-NAG）为底物检测该酶的活力，用native PAGE和SDS-PAGE检测酶的纯度。IEF-PAGE测定该酶等电点。葡聚糖 G-200凝胶过滤层析测定酶的总分子量。【结果】结果显示，纯化的NAGase酶的比活力为803.09 U/mg，总分子量为77.3 kD。结合SDS-PAGE表明该酶由两个具有相同分子量（39 kD）的亚基组成。该酶等电点为4.8。酶水解底物pNP-NAG的过程遵循米氏方程，米氏常数（Km）和最大反应速度（V_m）分别为0.11 mmol/L和17.65 μmol/L·min。该酶水解反应的最适pH和最适温度分别为pH 5.5和60℃。酶催化 pNP-NAG反应的活化能为64.8 kJ/mol。Pb²⁺, Cu²⁺, Zn²⁺和Al³⁺对该酶有不同程度的抑制作用。【结论】本研究描述了意大利蜜蜂NAGase的分离纯化方法及其理化性质，为进一步进行蜜蜂NAGase的结构解析和功能研究奠定基础。

【目的】由家蚕核型多角体病毒(Bombyx mori nucleopolyhedrovirus, BmNPV)侵染家蚕Bombyx mori导致的核型多角体病(血液型脓病)在云南蚕区普遍发生，危害严重，给云南蚕业带来严重的经济损失。本研究旨在测定云南不同蚕区BmNPV分离株的毒力及了解BmNPV在云南的病害流行趋势，为监测和控制云南家蚕血液型脓病打下基础。【方法】通过BmNPV对家蚕5龄幼虫致死率和对家蚕BmN细胞毒力的测定评价了云南蚕区19个BmNPV分离株的致病力；对19个云南BmNPV分离株的bro-d基因进行克隆、测序及系统进化分析。【结果】BmNPV对家蚕5龄幼虫的致死率测定表明，云南不同地区BmNPV毒株对家蚕的口服感染力差异较大；细胞毒力测定结果显示不同BmNPV分离株的出芽型病毒粒子(budded virus, BV)滴度差异较大。进化分析表明，所获取来自云南的19个BmNPV分离株主要分为两个亚群，亚群I在云南省的东部、中部和西部地区均有分布，而亚群II主要集中分布于云南省北部地区。从地理分布图可以看出，亚群I所在地区多为亚热带，温度偏高；而亚群II所处的云南北部地区多为典型高原季风气候，温度相对偏低。【结论】云南蚕区存在丰富的BmNPV株系，各分离株对家蚕的毒力差异较大；云南BmNPV分离株的进化关系在一定程度上与地理气候密切相关。

【目的】石蒜绵粉蚧Phenacoccus solani是近年在我国新发现的一种重要检疫性害虫，温度是决定石蒜绵粉蚧能否建立稳定种群的最基本因素。本研究旨在探索温度对莴苣Lactuca sativa上石蒜绵粉蚧生长发育和繁殖的影响。【方法】在20, 23, 26, 29和32℃，光周期14L∶10D，相对湿度80%±5%的实验室条件下，测定了莴苣上石蒜绵粉蚧各虫态的发育历期、发育速率、存活率和繁殖力，组建了石蒜绵粉蚧的实验种群生命表。【结果】石蒜绵粉蚧各虫态的发育历期均随温度的升高而缩短，在20℃下若虫发育历期最长，为35.75 d； 32℃时若虫发育历期最短，为17.90 d。此外，温度显著影响石蒜绵粉蚧的存活，在26℃时若虫期的存活率最高，为67.33%；世代的发育起点温度为12.23℃，有效积温为770.90日 ·度。石蒜绵粉蚧的产卵前期和成虫寿命随着温度的升高而缩短。成虫产卵量在20℃时最高，达88.02粒 /雌；32℃时最低，仅为37.61粒/雌。在20~32℃种群趋势指数都大于1，说明石蒜绵粉蚧对温度的适应范围广。但在32℃时，产卵前期存活率明显降低，说明高温不利于石蒜绵粉蚧的繁殖。【结论】温度对石蒜绵粉蚧的生长发育、存活、繁殖及种群增长有显著的影响，26℃是最适宜石蒜绵粉蚧生长发育和繁殖的温度。

【目的】分析麦长管蚜Sitobion avenae有翅成蚜饥饿胁迫下的母性效应，为迁飞性有翅蚜在新栖息地的成功定殖和种群延续研究提供依据。【方法】以正常取食个体为对照，观察麦长管蚜有翅成蚜饥饿24, 48, 72, 96, 120和144 h后的存活率以及恢复取食后24 h之内初产后代数、个体大小和随后生长发育与繁殖情况，评价母代饥饿胁迫对后代的潜在影响。【结果】在同一处理时间，饥饿组麦长管蚜有翅成蚜的存活率均低于正常取食对照，且在饥饿胁迫期间很少产仔，但恢复取食后24 h之内初产后代数高于正常取食对照。随母代饥饿时间延长，恢复取食后24 h之内初产后代的个体大小随饥饿时间延长而减小，当饥饿时间≥96 h，有翅成蚜初产后代的个体大小显著小于同一时间取食个体的初产后代。将恢复取食后24 h之内的初产后代在正常取食条件下单头饲养，发现随母代饥饿胁迫时间延长，其后代的若虫历期显著延长，其中母代经120 h和144 h饥饿胁迫后，相比于同一时间取食有翅成蚜的后代若虫历期，分别延长了15.1%和15.8%，差异达显著水平。但母代饥饿时间并不影响恢复取食后24 h之内所产后代的若虫存活率、无翅蚜率以及成虫寿命和产仔量。【结论】麦长管蚜有翅成蚜母代饥饿可使其存活率降低，但恢复取食后24 h之内初产后代数高于同一时间正常取食个体；母代饥饿时间延长，恢复取食后24 h之内初产后代的个体大小减小，若虫历期延长，而对恢复取食后24 h之内所产后代的若虫存活率、无翅蚜率以及成虫寿命和产仔量并无影响，这种适应性反应可能是迁飞性有翅蚜在新栖息地成功定殖的重要因素之一。

【目的】明确为害玉米的桃蛀螟Conogethes punctiferalis雌蛾性信息素完整组成以及嗅觉反应特点。【方法】采集为害玉米的桃蛀螟性成熟雌蛾，利用气质联用仪(GCMS)对其性腺提取物和合成标样进行比较分析，触角电位(EAG)记录技术测定和分析嗅觉反应，并结合2014年在四川和山东进行的田间诱捕比较试验筛选出最佳性信息素混合物。【结果】E10-16∶Ald为玉米桃蛀螟雌蛾性信息素主要组分，同时还检测到微量的Z10-16∶Ald和Z10-16∶OH。未交配雌蛾对E10-16∶Ald, 16∶Ald, Z10-16∶ Ald, Z10-16∶OH和E10-16∶OH这5种性信息素化合物的嗅觉反应不明显，而未交配雄蛾对 E10-16∶Ald和Z10-16∶Ald的嗅觉反应强烈，对E10-16∶OH和Z10-16∶OH的嗅觉反应次之。2014年在四川和山东用不同比例的三组分(E10-16∶Ald, Z10-16∶Ald和16∶Ald)和四组分(E10-16∶Ald, Z10-16∶Ald, 16∶Ald和E10-16∶OH)诱芯进行的田间试验中，三组分诱芯中E10-16∶Ald, Z10-16 ∶Ald和16∶Ald的比例在95∶5∶10时诱虫量最多；四组分诱芯中微量组分Z10-16∶OH在四川未表现出明显的增效作用，而在山东表现出明显的增效作用，以E10-16∶Ald, Z10-16∶Ald, 16∶Ald和 E10-16∶OH的比例为95∶5∶10∶5时诱蛾能力最强。【结论】玉米桃蛀螟的性信息素完整组成包括E10 -16∶Ald, Z10-16∶Ald, 16∶Ald和E10-16∶OH，其最佳比例为95∶5∶10∶5。

【目的】观察比较黑斑双叉叶蝉Chlorotettix nigromaculatus成虫雌、雄两性的触角及其感器的形态、数量和分布，为黑斑双叉叶蝉的行为生物学、化学生态学和电生理学的研究提供参考。【方法】利用扫描电镜技术，观察黑斑双叉叶蝉成虫的触角外部形态及其感器的类型、数量和分布及超微结构。【结果】黑斑双叉叶蝉雌雄成虫触角感器类型、数量和分布相似。该虫成虫触角呈刚毛状，包括柄节、梗节和鞭节3部分，其中柄节和梗节较粗短，其上布满众多鳞形突起；鞭节细长，由约60~64亚节组成，鞭节第1亚节上也布满鳞形突起。成虫的触角感器分为7种类型，包括蒲氏鬃毛(Böhm bristles, BB)、毛形感器(sensilla trichodea, ST)、锥形感器(sensilla basiconica, SB)、钟形感器(sensilla campaniformia, SCa)、刺形感器(sensilla chaetica, SCh)、腔锥形感器(sensilla coelocomica, SCo)、分叉感器(forficate sensilla, FS)。其中蒲氏鬃毛主要分布在柄节和梗节中下部，毛形感器ST Ⅰ和STⅡ分布在柄节、梗节和鞭节，锥形感器主要分布在鞭节第1和2亚节端部，钟形感器SCaⅠ和SCaⅡ 分布在柄节和鞭节第3和5节端部，腔锥形感器SCoⅠ和SCoⅡ分布在鞭节第1-5亚节，刺形感器SChⅠ和SCh Ⅱ分布在梗节中上部和鞭节第4亚节端部，分叉感器分布在梗节基部。触角感器类型和基本结构在雌雄个体间无明显差异。【结论】黑斑双叉叶蝉的触角感器类型、分布和数量在雌雄个体间无差异。各种感器分布具有一定的规律性。首次发现在其柄节和梗节分布有蒲氏鬃毛，梗节上有刺形感器和分叉感器，鞭节第1-5亚节上分布有腔锥形感器。

【目的】吉丁甲类昆虫是我国重要的农林害虫，但多年来国内文献资料包括一些高校教科书中存在诸多学名问题，如国际上已修订的学名国内长期未更新、错误鉴定、同物异名、种名误记等。本文对我国5种重要吉丁虫进行学名修订。【方法】本研究基于多年来积累的吉丁虫标本，通过比对文献以及与国内外同行讨论、标本检视、解剖生殖器、生物学危害特征观察等方法，对我国5种重要吉丁虫的形态和生物学特征进行比较和分析。【结果】重新描述了5种重要吉丁虫的主要形态特征，并记述了其分布范围、寄主植物、危害习性等，明确了金缘吉丁、杨十斑吉丁、杨五星吉丁、核桃缘吉丁和柳窄吉丁的正确学名分别为Lamprodila limbata (Gebler), Trachypteris picta picta (Pallas), Capnodis miliaris metallica Ballion, Meliboeus ohbayashii primoriensis (Alexeev)和Agrilus pekinensis pekinensis Obenberger。【结论】本研究厘订了我国吉丁甲文献中长期存在的一些学名错误，对解决我国部分吉丁甲类昆虫在研究和防治应用中的学名混乱问题具有重要意义。

  抑制剂胱氨酸结(inhibitor cystine knot, ICK)多肽是胱氨酸结(cystine knot, CK)多肽的三大家族成员之一。这种类型的多肽含有反向平行的3个β折叠，由3对二硫键形成稳定的拓扑学打结。它们广泛地分布在动物、植物、真菌甚至原核生物中，具有蛋白酶抑制剂,离子通道毒素以及抗微生物、抗疟疾及抗病毒活性等多种生物学功能。本文首先总结了昆虫中已发现的抗微生物活性和离子通道毒素活性的ICK肽；然后介绍了有毒动物尤其是蜘蛛、蝎子，以及植物中一些神经毒素活性的ICK肽，它们通常靶向昆虫体内的各种离子通道，从而发挥杀虫效果；最后结合ICK肽的基因序列特征，结构域和二硫键数目以及物种分布，对其进化多样性进行了探讨。

小蠹虫(小蠹科)是重要的森林蛀干害虫，在蛀食坑道时导致树木水分和养分运输系统受到破坏，短时间内对整片森林造成严重的经济危害。聚集信息素在小蠹虫聚集危害过程中扮演着非常重要的角色，目前已有多种小蠹虫聚集信息素成分被鉴定并成功应用于生产防控工作中。类异戊二烯类聚集信息素是小蠹虫中极为重要的一类聚集信息素，其主要成分包括小蠹烯醇、小蠹二烯醇、马鞭草烯醇及其衍生物。本文从类异戊二烯类聚集信息素的生物合成前体物质、生物合成位点、生物合成途径、取食和JHШ 调控、微生物与其生物合成关系以及展望6个方面出发，全面阐述了齿小蠹属Ips和大小蠹属 Dendroctonus中小蠹虫聚集信息素的生物合成机制及调控机制。文中首先重点阐述了小蠹虫体内以甲羟戊酸途径从头合成小蠹二烯醇以及利用寄主成分α-蒎烯直接合成马鞭草烯醇的生物合成过程；其次阐述了生物合成途径中关键酶和基因对小蠹取食和JHШ处理的响应以及小蠹虫肠道微生物和伴生真菌对该类聚集信息素生物合成的影响；最后，针对小蠹虫类异戊二烯类聚集信息素生物合成研究作了探讨和展望。本文为开发和应用其聚集信息素控制小蠹虫危害提供理论基础。

【目的】克隆南亚实蝇Zeugodacus tau鞣化激素基因，分析其分子特征及时空表达模式，为探索其生理功能奠定基础。【方法】利用同源克隆和RACE技术从南亚实蝇刚羽化成虫中克隆鞣化激素基因 bursicon-α和bursicon-β的全长cDNA序列，并用邻接法(neighbor-joining method)与其他昆虫同源序列构建系统发育进化树。利用荧光定量PCR技术检测这两个基因在南亚实蝇不同发育阶段(卵、1-3龄幼虫、预蛹、蛹和刚羽化成虫)的表达特性。【结果】克隆获得南亚实蝇鞣化激素基因bursicon-α (GenBank登录号：MH421861)和bursicon-β (GenBank登录号：MH421862)。bursicon-α基因开放阅读框为 551 bp，编码183个氨基酸；bursicon-β基因开放阅读框为467 bp，编码156个氨基酸。基于两个鞣化激素基因的氨基酸序列的系统发育树分析显示，南亚实蝇Bursicon-α与Bursicon-β均与瓜实蝇 Zeugodacus cucurbitae的同源蛋白亲缘关系最近，且与其他双翅目昆虫的同源蛋白聚为一类，形成独立的分支。荧光定量PCR结果表明，两个基因在南亚实蝇各龄期均有表达，均在第5天蛹和刚羽化成虫翅伸展时期表达量最高。【结论】bursicon-α和bursicon-β基因在南亚实蝇不同发育阶段表达量不同，推测其在南亚实蝇成虫表皮鞣化和翅的形成中发挥着重要作用。本研究为进一步探索鞣化激素在南亚实蝇生长过程中表皮的骨化、翅的重建等方面的功能机制奠定了基础。