【目的】本研究旨在明确大豆食心虫Leguminivora glycinivorella滞育与非滞育幼虫体内生化物质含量和保护酶活性的差异，为进一步探索大豆食心虫幼虫滞育调控的分子机制提供依据。【方法】在适温(25℃)环境下，通过控制光周期获得大豆食心虫滞育和非滞育幼虫，分别测定其过冷却点和结冰点、体内主要生化物质(糖类物质、脂类物质和可溶性蛋白)的含量以及3种保护酶［过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)和超氧化物岐化酶(SOD)］的活性并进行比较分析。【结果】在25℃下，大豆食心虫滞育幼虫的过冷却点(-19.20℃)和结冰点(-13.49℃)均低于非滞育幼虫的过冷却点(-16.42℃)和结冰点(-11.22℃)，二者过冷却能力差异显著。滞育幼虫体内的总糖、糖原、甘油等能源物质含量均显著高于非滞育幼虫的，滞育幼虫体内总糖含量为非滞育幼虫的2.17倍，甘油含量为非滞育幼虫的1.76倍；但二者体内自由水和可溶性蛋白质含量无显著差异。同时，滞育幼虫POD和CAT活性显著高于非滞育幼虫的，但SOD活力则略低于非滞育幼虫的，无显著差异。【结论】大豆食心虫幼虫由非滞育进入滞育状态过程中，通过调节自身生理代谢使其体内糖类等生化物质含量显著升高，部分保护酶活性显著增强，进而显著提高其过冷却能力以有效应对低温等不利环境条件的来临。

【目的】普通大蓟马Megalurothrips usitatus是我国华南地区重要的豆科害虫，给我国豇豆种植产业带来巨大损失。开发利用基于聚集信息素的引诱剂是普通大蓟马的绿色防控措施之一，对于普通大蓟马生物防治具有重要意义。【方法】采用Y型嗅觉仪测定普通大蓟马雌雄成虫对其雌虫和雄虫气味源的嗅觉反应；用顶空固相微萃取法(head space solid-phase microextraction, HS-SPME)和溶液浸提法提取普通大蓟马雌雄成虫挥发物；应用气质联用仪(gas chromatography-mass spectrometry, GC-MS)对收集的气体挥发物和正己烷提取物进行活性成分分离鉴定；应用Y型嗅觉仪测定人工合成聚集信息素组分对雌雄成虫的引诱效果。【结果】行为学试验结果表明，普通大蓟马雄成虫气味源对其雌雄成虫均具有显著的引诱作用，而雌成虫气味源则没有。顶空固相微萃取法和溶液浸提法均可提取雄成虫挥发物主要组分，但顶空固相微萃取法获得的TIC图基线平稳，杂峰少，提取效果优于溶剂浸提法。GC-MS分析结果表明，普通大蓟马雄成虫挥发物中主要含有 1种化合物，为反式,反式-金合欢醇乙酸酯［(E,E)-farnesyl acetate］，该化合物在雌成虫挥发物中不存在。室内行为学实验结果表明，特定剂量的人工合成的(E,E)-farnesyl acetate对普通大蓟马雌雄成虫均具有显著的引诱作用。【结论】本研究证明了普通大蓟马雄成虫可以释放聚集信息素，并鉴定了其主要组分(E,E)-farnesyl acetate，为应用聚集信息素开展普通大蓟马的监测和诱杀提供了基础。

【目的】激活增强子结合蛋白4(activating enhancer binding protein 4, AP-4)是近年来备受关注的一类功能广泛的转录因子，参与Wnt/β-catenin信号通路的调控。本研究旨在研究棉铃虫Helicoverpa armigera HaAP-4基因的原核表达并制备多克隆抗体，明确HaAP-4基因的时空表达谱，初步探究HaAP-4对棉铃虫胆固醇载体蛋白2(sterol carrier protein-2, SCP-2)基因(HaSCP-2)表达的调控作用。【方法】通过PCR扩增棉铃虫HaAP-4基因片段，将其克隆至pET-28a原核表达载体，转化至大肠杆菌Escherichia coli BL21，经IPTG诱导表达，采用镍柱纯化重组蛋白，免疫新西兰兔制备多克隆抗体。运用RT-qPCR检测HaAP-4基因在棉铃虫不同发育阶段(卵、幼虫、预蛹、蛹和成虫)以及5龄幼虫和预蛹不同组织(中肠、脂肪体、头和表皮)中的表达水平。设计并合成HaAP-4 siRNA，转染棉铃虫Ha细胞，通过RT-qPCR检测和分析使用HaAP-4 siRNA进行RNA干扰后Ha细胞中HaAP-4和HaSCP-2基因 mRNA的表达情况。【结果】成功构建pET-28a-HaAP-4重组表达质粒，在大肠杆菌细胞中获得高效表达的可溶性蛋白，目的蛋白大小约为55 kD，经纯化获得了纯度较高的重组蛋白，免疫新西兰兔成功制备了多克隆抗体，通过Western blotting检测显示抗体具有较好的特异性，ELISA分析表明抗体效价较高。发育阶段特异性表达结果显示，HaAP-4基因在棉铃虫不同发育阶段均有表达，其中在卵期、5龄幼虫期和预蛹期的表达量较高。组织表达结果表明，HaAP-4基因在5龄幼虫和预蛹不同组织中均有表达，且在中肠和头部具有高表达，而在表皮和脂肪体中表达量较低。RNA干扰实验发现，HaAP-4基因的敲降对HaSCP-2基因转录有显著影响，HaSCP-2基因mRNA表达水平下降了约55%。【结论】利用pET-28a原核表达系统能有效地在体外表达可溶性的HaAP-4，并制备了较好的多克隆抗体。RNAi实验结果提示，在中肠内高表达的HaAP-4基因能促进HaSCP-2基因的转录表达，在棉铃虫脂质生理代谢过程中发挥作用。本研究为进一步深入阐明棉铃虫HaAP-4的潜在功能打下了基础。

【目的】构建入侵种松树蜂Sirex noctilio毒腺转录组数据库，筛选并分析松树蜂毒腺基因数据。【方法】采用新一代高通量测序平台Illumina HiSeq^TM 4000对松树蜂雌成虫毒腺进行转录组测序、数据组装和生物信息学分析。【结果】共获得12.7 Gb松树蜂雌成虫毒腺有效转录组数据，并组装到37 098条unigenes，平均长度968 bp，N50长度为2 364 bp。将所得的unigenes数据使用BlastX与各大数据库比对，共注释到13 515条unigenes，并且在NR数据库中注释的unigenes最多，共11 108条(占总数的29.94%)，其中相似基因占比最高的物种为丽蝇蛹集金小蜂Nasonia vitripennis，达815条(占总数的7.29%)。在GO数据库中注释到5 726条unigenes，根据功能被分为生物学进程、细胞组分和分子功能3大类63个亚类。KEGG代谢通路分析表明，7 602条unigenes注释到357个代谢通路。根据基因注释信息进一步筛选到43条嗅觉相关基因，包括嗅觉受体(odorant receptor, Or)基因25条、化学感受蛋白(chemosensory protein, CSP)基因10条、离子型受体(ionotropic receptor, IR)基因5条和气味结合蛋白(odorant binding protein, OBP)基因3条。此外，还筛选出11条漆酶基因，包括漆酶1(laccase1, LAC1)基因5条、漆酶2(laccase2, LAC2)基因4条、漆酶4(laccase4, LAC4)基因1条和漆酶9(laccase9, LAC9)基因1条，且其中1条LAC2基因在所有被注释的基因中表达量最高(FPKM值=21 126)。【结论】本研究获得的松树蜂毒腺转录组数据为松树蜂毒液组分的鉴定和生物学功能的研究奠定了一定的理论基础。

【目的】灵活操控靶基因的表达水平对于研究基因的功能十分重要。Gal4/UAS系统已被广泛应用于调控基因表达，可研究果蝇Drosophila等模式生物复杂的生物学问题。受采用载体的特性及插入位点的影响，Gal4或UAS转基因品系在构建好之后，其调控靶基因的能力基本是确定的。本研究旨在在现有Gal4/UAS系统的基础上，开发一种新的策略，实现在果蝇翅芽中灵活操控wingless(wg)基因的表达水平。【方法】用遗传学手段将黑腹果蝇Drosophila melanogaster品系的UAS-wg和UAS-wg-RNAi转基因重组到同一黑腹果蝇品系中。将该重组黑腹果蝇品系与dpp-Gal4黑腹果蝇品系杂交，同时驱动UAS-wg和UAS-wg-RNAi在果蝇幼虫翅芽中共表达。杂交子代幼虫分别放置在不同的温度(18, 25和30℃)下培养。将幼虫翅芽解剖并进行免疫组化染色，测量染色的荧光强度，分析翅芽中wg的表达水平。【结果】在低温(18℃)下，UAS-wg在基因表达调控中起主要作用，wg表现为超表达，但其超表达的效率可被UAS-wg-RNAi有效地削弱。相反，在高温(30℃)下，UAS-wg-RNAi起主导作用，wg的表达受到抑制。并且通过转换温度，可实现wg在翅芽发育的不同阶段在超表达和抑制之间相互转化，从而灵活地操控wg基因在翅芽中的表达水平。【结论】该方法可以灵活操控果蝇翅芽中wg基因的表达水平，对于调控转基因的表达有重要的意义。

【目的】囊状幼虫病病毒(sacbrood virus, SBV)是严重危害中华蜜蜂Apis cerana cerana蜂群健康和种群数量的病原微生物，但其对蜜蜂的致死机制不明。本研究旨在探究SBV对不同发育阶段中华蜜蜂营养代谢和免疫的影响。【方法】分别给中华蜜蜂2日龄幼虫和新羽化成虫饲喂SBV，逐日统计死亡蜜蜂数量，检测病毒对蜜蜂存活的影响；利用qPCR检测中华蜜蜂4日龄幼虫、预蛹以及10和20日龄成虫体内SBV RNA、营养代谢基因(ilp1, ilp2, hex110, hex70b, hex70c和vg)、先天性病毒免疫基因(rel, toll, apidaecin, abaecin, defensin, hymenoptaecin, jra, key和state92e)、细胞凋亡基因(atg7和LOC100577876)和抗RNA病毒基因(dis3和dicer)的表达水平。【结果】 SBV感染显著降低了中华蜜蜂幼虫的存活率，但对成虫的生存影响不明显。SBV RNA在中华蜜蜂4日龄幼虫和预蛹体内的表达量显著高于其在10和20日龄成虫体内的表达量。SBV显著降低了中华蜜蜂幼虫营养代谢基因ilp1, ilp2, hex110, hex70b和hex70c以及成虫营养代谢基因vg和hex110的表达量，但显著提高了4日龄幼虫rel, toll, apidaecin, abaecin, defensin, hymenoptaecin和jra以及成虫key和 state92e等先天性病毒免疫基因的表达量，还引起预蛹体内的细胞凋亡基因atg7和LOC100577876的表达量显著增加。【结论】SBV在中华蜜蜂幼虫和预蛹体内的感染水平远高于在成虫体内的，其对幼虫的危害也大于对成虫。SBV显著影响了中华蜜蜂正常的营养代谢，染毒中华蜜蜂能够提高自身的免疫水平来应对；预蛹期中华蜜蜂幼虫细胞凋亡水平的显著增加可能与化蛹异常及死亡有关。

【目的】调查显示，二点委夜蛾Athetis lepigone在田间的虫口密度与玉米被害率之间无明显的相关性，田间虫口密度并不能准确预测玉米苗被害率。为了探索二点委夜蛾幼虫发生量与玉米苗被害程度之间的关系，解释田间调查遇到的幼虫即使有时大量发生玉米苗却受损轻微的现象，本研究室内检测了外部环境条件如温度和湿度对二点委夜蛾幼虫取食为害玉米的影响以及昆虫自身的相关取食习性。【方法】将3龄末、4龄初二点委夜蛾幼虫分别置于下述8种温湿度和食物组合条件下进行处理：低温低湿无食物(15℃, 30%RH, 饥饿)、低温干燥无食物(15℃, 0%RH, 饥饿)、低温低湿有食物［15℃, 30%RH, 饲喂人工饲料(AD)］、低温干燥有食物(15℃, 0%RH, AD)、高温高湿有食物(36℃, 90%RH, AD)、高温干燥有食物(36℃, 0%RH, AD)、高温高湿无食物(36℃, 90%RH, 饥饿)、高温干燥无食物(36℃, 0%RH, 饥饿)；处理4 h后，评价其对盆栽玉米苗的为害程度，并测定幼虫在4个不同温度(15℃, 24℃, 28℃和33℃)下对玉米叶片的取食量。分别用8种食物(马齿苋、紫苏、甘薯、白菜、大豆、南瓜和玉米叶叶片以及麦秸)将初孵幼虫驯化饲喂至3龄后，检测经过驯化处理后的幼虫对初始驯化食物、麦秸和和玉米叶片的选择性。【结果】在干燥条件下，无论是否经过饥饿处理，幼虫对玉米苗的为害程度均较高，尤其是高温干燥处理后，对玉米苗的平均为害级别达3.1级；低温干燥处理组和高温干燥处理组为害级别在4级以上(含4级)的幼苗数分别占幼苗总数的50%和40%。在15-33℃，二点委夜蛾幼虫的取食量随温度的升高而逐渐增加，48 h校正取食量分别为12.8, 31.8, 38.0和60.0 mg。用甘薯、白菜、大豆和南瓜叶片驯化的幼虫对初始驯化食物的选择率显著高于对玉米和麦秸的选择率；初始取食紫苏叶片的幼虫对紫苏和麦秸的选择率显著高于对玉米的选择性，初始取食玉米叶片、麦秸的幼虫分别对玉米、麦秸的选择性更高。【结论】干燥是二点委夜蛾幼虫增加对玉米摄入量的一个主要因素；二点委夜蛾适应短时高、低温的能力较强，在一定的温度范围(15-33℃)，短时间内的取食量随温度升高而增加。作为干燥的一个辅助因素，温度通过影响二点委夜蛾幼虫的取食量而决定其为害玉米苗的程度；二点委夜蛾倾向于选择初孵幼虫最先接触的食物；二点委夜蛾在玉米苗上的发生为害在很大程度上取决于其自身食性。

【目的】南美斑潜蝇Liriomyza huidobrensis为我国重要的入侵害虫，我们于2017年7月首次发现其已扩散至西藏。本研究旨在了解西藏地区南美斑潜蝇的发生现状及其寄生蜂种类。【方法】2017和2018年6月上旬-9月中旬对西藏拉萨、林芝、山南和日喀则4个地区的南美斑潜蝇的发生危害及其寄生蜂组成进行了调查采样。【结果】调查的西藏这4个地区均发现南美斑潜蝇分布和危害；温室发生时间为6月上旬-9月中旬，而露地的发生高峰在7月下旬-8月上旬。其寄主植物有9科21种，主要有豆科(Fabaceae)、茄科(Solanaceae)和伞形科(Umbelliferae)等，主要嗜好经济作物有豇豆Vigna unguiculata, 扁豆Lablab purpureus , 莴笋Lactuca sativa var. angustana和白菜Brassica rapa ssp. pekinensis。其寄生蜂包括姬小蜂科(Eulophidae)、茧蜂科(Braconidae)和瘿蜂科(Cynipidae)共计3科9属16种，分别为双斑潜蝇姬小蜂Diglyphus bimaculatus, 豌豆潜蝇姬小蜂Diglyphus isaea, 小斑潜蝇姬小蜂Diglyphus minoeus, 万氏潜蝇姬小蜂Diglyphus wani, Diglyphus sp., 纵纹瑟姬小蜂Cirrospilus vittatus, Hemiptarsenus sp., 芙新姬小蜂Neochrysocharis formosa, 底比斯姬小蜂Chrysocharis pentheus, 普金姬小蜂Chrysocharis pubicornis, Chrysocharis sp., 潜蝇柄腹姬小蜂Pediobius metallicus, Pnigalio sp., 西伯利亚离颚茧蜂Dacnusa sibirica, Dacnusa sp.和Gronotoma sp.；其中优势种为西伯利亚离颚茧蜂、双斑潜蝇姬小蜂和豌豆潜蝇姬小蜂，其个体数量占比分别为总采集个体数的48.7%, 22.1%和12.9%。【结论】西藏南美斑潜蝇的寄生蜂种类丰富，发挥着重要的自然控制作用。建议进一步加强优势寄生蜂生物学、控害潜力评价以及利用研究，为南美斑潜蝇的绿色防控提供指导。

【目的】北二星蝽Eysarcoris aeneus是一种广泛分布于古北区的重要农业害虫，可危害多种经济作物。其刺肩型和钝肩型前胸背板后侧角长度存在差异，暗示其种内变异的存在。【方法】基于几何形态学的多元回归分析(multivariate regression)、主成分分析(principal component analysis, PCA)、典型变量分析(canonical variate analysis, CVA)和判别函数分析(discriminant function analysis, DFA)，对采集于中国19个地区的142头标本(98头北二星蝽标本和44头作为外群的广二星蝽E.ventralis标本)的前翅、后翅、头和小盾片4个性状进行分析比较，研究北二星蝽钝肩型和刺肩型之间的形态变异。【结果】对于所研究的4个性状来说，北二星蝽钝肩型和刺肩型标本间均未检测到异速生长的存在。主成分分析中，钝肩型和刺肩型的标本均有重叠，典型变量分析则显示它们之间存在显著差异(马氏距离和普氏距离的P值均小于0.01)。判别函数分析显示，依据这4个性状两型样本间的正确判别率在67%~89%之间。【结论】结果表明，前翅、后翅、头和小盾片都可以作为北二星蝽钝肩型和刺肩型之间形态变异的评价指标，小盾片特征具有最高水平的鉴别价值；对于所研究的这4个性状来说，北二星蝽钝肩型和刺肩型之间都表现出显著的形状差异，而它们的质心距离差异不显著，说明相对于体型大小差异分析，形状差异分析能更灵敏地揭示谱系间的变异。本研究表明几何形态学可以有效地描述北二星蝽的种内形态变异，为蝽类昆虫种内变异的研究奠定了基础。

【目的】通过发现更多的形态特征，以实现库蠓属Culicoides近似种的准确鉴定和区分。【方法】利用扫描电镜和光学显微镜观察新替库蠓Culicoides newsteadi Austen成虫的形态特征细节，包括具有重要鉴定意义的结构特征，如两性成虫的复眼、触角、触须、口器、中胸盾板、小盾板、翅、后足胫节、爪和生殖器等结构。【结果】发现新替库蠓雌成虫具有6种触角感器，包括腔锥感器、短毛形感器、长毛形感器、刺形感器、直锥形感器和弯直锥形感器；雌雄成虫的盾斑均呈卵形；雄成虫的阳基侧突端部具复杂分支。雌成虫的复眼连接处距离为1.3个小眼面；雌成虫大颚呈剑状，具14~17枚三角形齿；雄成虫后足胫节具16~19枚端梳。【结论】通过光学显微镜和扫描电镜获得的形态特征不仅为蠓科的分类和系统发育研究提供更多的信息，而且为流行病研究和疾控工作提供更多的帮助，进而为蠓科昆虫形态信息的数字化、立体化和网络化提供资料。

【目的】揭示绿盲蝽Apolygus lucorum腹神经节的组成结构。【方法】采用免疫组织化学染色方法，利用突触蛋白抗体对绿盲蝽成虫的腹神经节进行免疫标记，激光共聚焦扫描显微镜扫描照相获得原始数据，用图像分析软件进行标记，构建三维结构模型。【结果】绿盲蝽成虫腹神经节位于腹神经索的末端，与其前方的后胸神经节和中胸神经节紧密融合，形成后部神经节。与脑和胸神经节类似，腹神经节由周围的细胞体和内部的神经髓构成。腹神经节的神经纤维束主要包括位于腹侧的两条纵向神经连索和向两侧发出的9束神经纤维。9束神经纤维连接着9个神经原节，即富含突触联系的神经髓。这些神经原节紧密融合，无明显的边界，最后两节形成膨大的末端腹神经节。两侧的神经原节由横向的神经连锁连接起来。腹神经节外周的细胞体数量较多，排列紧密，大小一致，仅在前端背侧中间和后端腹侧中间位置分别有2个和5个体积较大的细胞体。【结论】本研究结果明确了绿盲蝽腹神经节的结构，为进一步研究昆虫的行为调控及神经系统发育和演化奠定一定的形态学基础。

 【目的】分析云南省玉龙鼠疫疫源地野外鼠形动物寄生蚤丰盛度的影响因素。【方法】选取云南省玉龙鼠疫疫源地3个海拔区域，按4个季节进行野外捕鼠，捕获的鼠形动物用梳检法收集体表寄生蚤并在显微镜下分类鉴定。通过实际测量和实地观察相结合的方式收集潜在影响鼠形动物寄生蚤丰盛度的因素包括鼠形动物特征变量指标(如种类、年龄、性别、体长、体重)、环境和气象因子(如海拔、季节)等数据。采用EpiData 3.02软件建立数据库，在R软件下使用跨栏负二项分布回归分析鼠形动物寄生蚤丰盛度的影响因素。【结果】从捕获的884只鼠形动物中检获寄生蚤9种484头，以特新蚤指名亚种、方叶栉眼蚤、无值大锥蚤、云南栉眼蚤为主(86.16%)。回归分析显示： 2 700-3 000 m和3 000 m以上海拔鼠形动物染蚤概率较2 400-2 700 m分别增加1.27和3.72倍；湿度高于70%时，鼠形动物染蚤概率较湿度≤70%时减少41%；与齐氏姬鼠的染蚤概率相比，中华姬鼠的染蚤概率降低50%，大绒鼠的染蚤概率增加79%；体长超过104 mm的鼠形动物染蚤概率较体长≤104 mm的鼠形动物染蚤概率增加76%；气温高于15℃时，鼠形动物染蚤数量较温度≤15℃时降低67%；成年鼠形动物的染蚤数量较未成年鼠形动物的染蚤数量增加2.25倍；与春季相比，夏季的染蚤数量增加2.00倍，秋季的染蚤概率减少48%，冬季的染蚤概率和染蚤数量分别增加1.44和1.06倍。【结论】玉龙鼠疫疫源地野外鼠形动物寄生蚤以特新蚤指名亚种、方叶栉眼蚤、无值大锥蚤、云南栉眼蚤为优势蚤种。鼠形动物寄生蚤丰盛度与海拔、季节、气温、湿度等环境气象因子及鼠形动物种类、体长、年龄等鼠形动物特征变量密切相关。