【目的】草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda是一种新近入侵我国的重要害虫。本研究旨在对草地贪夜蛾雄性成虫和5龄幼虫两个不同发育阶段的转录组进行比较分析。【方法】利用高通量测序技术对草地贪夜蛾雄性成虫和5龄幼虫进行转录组测序和数据组装,并对转录组数据进行功能注释和比较分析。【结果】经de novo组装共获得209 002条转录本，平均长度为687.55 bp，N50为982 bp。共有46 198条(57.43%) unigene在至少一个数据库中获得功能注释，其中1 713条(2.13%) unigene在所有数据库中均能获得注释。在GO数据库中获得205 269条unigene的注释，主要包括68个功能分类；在KEGG数据库中共有3 408条unigene得到注释，涉及277个代谢通路。共鉴定到424个嗅觉相关的基因，并且在雄性成虫和5龄幼虫之间的表达存在差异。通过比较转录组分析，在雄性成虫中鉴定到9 162个上调和6 399个下调差异表达基因(DEGs)；功能富集分析发现在上调DEGs中涉及信息素以及信号转导的代谢通路显著富集，而下调DEGs中涉及解毒相关的通路显著富集。【结论】这些转录组数据为探究草地贪夜蛾的生长发育、嗅觉相关功能基因以及候选分子靶标提供资源信息。

【目的】本研究旨在探索草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda响应高低温和UV-A胁迫的分子机制。【方法】通过RT-PCR技术克隆草地贪夜蛾热激蛋白基因Hsp90，利用生物信息学方法分析其序列特征；采用RT-qPCR技术检测草地贪夜蛾Hsp90基因在不同发育阶段(卵、1-6龄幼虫、蛹和成虫)、成虫不同组织(去除触角和复眼的头、胸、腹、触角、复眼、足、翅、中肠、精巢和卵巢)及在不同时长(0, 30, 60, 90, 120和150 min)高温(36℃)、低温(4℃)和UV-A胁迫下成虫中的相对表达量。【结果】克隆获得草地贪夜蛾Hsp90基因，命名为SfHsp90(GenBank登录号: MN832694)，该基因开放阅读框(ORF)长2 154 bp，编码717个氨基酸，编码蛋白质相对分子量为82.52 kD，等电点(pI)为5.01，C末端序列含保守基序EEVD，说明该蛋白为胞质型热激蛋白。系统进化分析结果表明，昆虫Hsp90高度保守。发育表达模式显示SfHsp90在草地贪夜蛾1龄幼虫中表达量最高；组织表达模式显示，SfHsp90在草地贪夜蛾雌雄成虫的触角、复眼和去除触角和复眼的头中的表达量显著高于在其他组织中的。高低温胁迫对草地贪夜蛾SfHsp90表达具有明显的诱导作用，36℃胁迫下，SfHsp90表达量显著高于对照，且随着处理时间的延长，在雄成虫中表达量先上升后下降，在60 min时达到最高值，在雌成虫中表达量随处理时间延长逐渐升高；4℃胁迫下，在雄成虫中表达量随着处理时间的延长先上升后下降，在30 min时表达量达到峰值，在雌成虫中表达量随着处理时间延长逐渐上升；随着UV-A照射时间的延长，在雌雄成虫中表达量先上升后下降，90 min时在雄成虫中表达量达到最高值，60 min时在雌成虫中表达量达到最高值。【结论】草地贪夜蛾SfHsp90基因在高低温和UV-A胁迫下的差异表达说明该基因在草地贪夜蛾响应环境胁迫的分子机制中发挥重要作用。

【目的】为了筛选有效的草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda幼虫取食激食素和抑制剂并探究其味觉感受机理，为生态防治草地贪夜蛾提供理论和实践上的依据。【方法】利用单感受器记录法测定草地贪夜蛾5龄第2天幼虫下颚外颚叶上中栓锥感器和侧栓锥感器对不同浓度的蔗糖、黑芥子苷、单宁酸和盐酸奎宁4种刺激物质的电生理反应，并采用二项叶碟法测定草地贪夜蛾幼虫对这些刺激物质的取食选择行为。【结果】草地贪夜蛾幼虫中栓锥感器和侧栓锥感器内均存在对蔗糖、黑芥子苷和单宁酸敏感的味觉受体神经元，但是神经元的活性随着刺激物的种类及浓度而变化。其中，两类感器内神经元对蔗糖和黑芥子苷的反应均呈现典型的浓度梯度反应。中栓锥感器内存在对盐酸奎宁敏感的味觉受体神经元，但是呈现逆浓度梯度的反应模式，侧栓锥感器内不存在对盐酸奎宁敏感的神经元。蔗糖显著诱导幼虫的取食行为，而盐酸奎宁、黑芥子苷和单宁酸均抑制幼虫的取食行为，且都呈现浓度梯度的抑制活性。【结论】草地贪夜蛾幼虫中栓锥感器和侧栓锥感器内均存在对取食激食素和抑制剂敏感的味觉受体神经元，但是两类感器不论在反应谱上还是敏感性上均存在差异。蔗糖可以作为取食激食素，盐酸奎宁、黑芥子苷和单宁酸可以作为取食抑制剂的有效候选物质。幼虫对蔗糖、黑芥子苷和单宁酸的味觉反应在一定程度上解释了其取食选择行为的味觉基础。本研究为草地贪夜蛾的生态防治提供了味觉信息。

【目的】为了研究乙基多杀菌素对草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda幼虫的毒力及作用机制。【方法】以氯虫苯甲酰胺为对照，采用表面涂抹法测定了乙基多杀菌素对草地贪夜蛾2, 3和4龄幼虫的LC₅₀和LC₉₀。采用酶联免疫吸附法(ELISA)，测定不同浓度乙基多杀菌素(0.127, 0.183, 0.250, 0.400和0.572 mg/L)处理48 h后草地贪夜蛾3龄幼虫体内多功能氧化酶(MFO)、谷胱甘肽-S-转移酶(GST)、羧酸酯酶(CarE)以及乙酰胆碱酯酶(AchE)的活性。【结果】与氯虫苯甲酰胺相比，乙基多杀菌素对草地贪夜蛾幼虫具有更高的毒力，处理48 h后对2, 3和4龄幼虫的LC₅₀值分别为0.21, 0.34和0.59 mg/L， LC₉₀值分别为0.59, 0.75和2.01 mg/L。经过乙基多杀菌素处理后，草地贪夜蛾3龄幼虫体内MFO和AchE活性均表现随着浓度的增加而显著增加，二者均在0.572 mg/L处理时活性最高，分别为52.23和23.98 U/mg pro； CarE活性在低浓度乙基多杀菌素处理(0.127和0.183 mg/L)下相对于溶剂对照(0.1% Tween-80)无显著变化，随着浓度增加至0.400与0.572 mg/L时，其活性显著增加； GST活性表现为随着乙基多杀菌素浓度增加而增加的特点, 当处理浓度为0.400与0.572 mg/L时，其活性无显著性差异。【结论】乙基多杀菌素对草地贪夜蛾幼虫的杀虫效果优于氯虫苯甲酰胺，尤其对4龄幼虫效果最为明显；在不同浓度的乙基多杀菌素处理条件下，草地贪夜蛾幼虫体内的CarE, MFO和AchE活性有所增高。

【目的】为明确杀虫剂亚致死剂量对草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda细胞色素P450基因表达的影响。【方法】本研究采用叶片浸渍法测定了3种杀虫剂［氯虫苯甲酰胺、甲氨基阿维菌素苯甲酸盐和苏云金杆菌Bacillus thuringiensis (Bt)］对草地贪夜蛾2龄幼虫的毒力，以及通过实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR, RT-qPCR)技术测定了这3种杀虫剂亚致死剂量(LC₁₀)处理后48 h时草地贪夜蛾2龄幼虫16个P450基因的表达量。【结果】氯虫苯甲酰胺、甲氨基阿维菌素苯甲酸盐和Bt对草地贪夜蛾2龄幼虫的LC₁₀值分别为0.931, 0.283和1 089.688 mg/L。2龄幼虫受LC₁₀氯虫苯甲酰胺胁迫后，13个P450基因(CYP4G75, CYP6AB12, CYP6B50, CYP321A7, CY321A8, CYP321A9, CYP321A10, CYP321B1, CYP337B5, CYP9A59, CYP9A58, CYP6AE44及CYP6AE43)表达上调，其中CYP6AE44表达量为对照的34.60倍；2龄幼虫受LC₁₀甲维盐胁迫后，11个P450基因(CYP4G75, CYP6AB12, CYP321A7, CY321A8, CYP321A9, CYP321A10, CYP321B1, CYP337B5, CYP9A58, CYP6AE44及CYP6AE43)表达上调，其中CYP321B1表达量为对照的28.70倍；2龄幼虫受LC₁₀Bt胁迫后，11个P450基因(CYP4G75, CYP6AB12, CYP6AN4, CYP321A7, CY321A8, CYP321A9, CYP321A10, CYP321B1, CYP337B5, CYP6AE44及CYP6AE43)表达上调，其中CYP6AE44表达量为对照的40.80倍。【结论】草地贪夜蛾2龄幼虫的多个P450基因受这3种杀虫剂亚致死剂量处理后表达上调，其中CYP4G75, CYP6AB12, CYP321A7, CY321A8, CYP321A9, CYP321A10, CYP321B1, CYP321B5, CYP6AE44及CYP6AE43均能被这3种杀虫剂诱导表达。

【目的】对入侵我国的草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda有机磷和氨基甲酸酯类杀虫剂靶标基因ace-1的基因型进行分子检测，明确抗性基因频率，进而指导田间科学用药。【方法】采集中国12省份的草地贪夜蛾田间种群幼虫样本，提取单头样本的基因组DNA，利用特异性引物进行PCR扩增，获得ace-1基因片段。根据碱基、氨基酸序列比对和测序峰图分析，明确与有机磷和氨基甲酸酯类杀虫剂抗性相关的3个氨基酸突变位点A201S, G227A和F290V的基因型和抗性基因频率。【结果】通过DNA检测分析中国12省份草地贪夜蛾田间种群589头个体ace-1基因的基因型和突变频率发现，在A201S位点检测到137头个体为抗性杂合基因型，抗性基因频率为11.6%，未发现抗性纯合基因型个体；G227A位点589头个体均为敏感纯合基因型；F290V位点的抗性基因频率最高，达到57.1%，携带抗性基因的个体数量达到523头(占样本总数的88.8%)。【结论】结果表明入侵我国的草地贪夜蛾种群携带高频率的对有机磷和氨基甲酸酯类杀虫剂抗性基因。田间防治建议不用或少用有机磷和氨基甲酸酯类杀虫剂，同时进一步加强田间抗性监测工作。

【目的】测定湖北草地贪夜蛾田间种群对4种杀虫剂的敏感性，并对杀虫剂靶标Ace-1, VGSC和RyR的基因型和突变频率进行检测，以明确湖北草地贪夜蛾田间种群药剂敏感性现状，进而指导田间科学用药。【方法】采集湖北黄冈、武穴、咸宁和荆州4个地区玉米田中的草地贪夜蛾幼虫，采用浸叶法测定其对氯虫苯甲酰胺、乙基多杀菌素、茚虫威和甲维盐4种杀虫剂的敏感性；提取4个种群80头个体的单头总RNA合成cDNA，利用特异性引物进行PCR扩增，获得目的基因片段，根据序列比对和测序峰图分析，确定Ace-1, VGSC和RyR的基因型和靶标突变位点的突变频率。【结果】生测结果表明，湖北这4个田间种群的草地贪夜蛾幼虫对氯虫苯甲酰胺、乙基多杀菌素、茚虫威和甲维盐均比较敏感，敏感性从高到低依次为：甲维盐>乙基多杀菌素>氯虫苯甲酰胺>茚虫威。分子检测结果表明，湖北草地贪夜蛾这4个田间种群Ace-1基因在A201S, G227A和F290V位点均存在抗性杂合突变，且在F290V位点检测到抗性纯合突变，而VGSC和RyR两个基因均没有检测到靶标位点突变。【结论】湖北草地贪夜蛾4个田间种群对氯虫苯甲酰胺、乙基多杀菌素、茚虫威和甲维盐这4种杀虫剂均较敏感，但这4个草地贪夜蛾田间种群均携带有对有机磷和氨基甲酸酯类杀虫剂的抗性基因，存在潜在的抗性风险，田间防治建议少用或不用该类杀虫剂，同时需要进一步加强抗性监测工作。

 【目的】明确评估不同类型化学杀虫剂对草地贪夜蛾幼虫毒力的重复性最好且最方便的生物测定方法。【方法】在室内分别采用点滴法、饲料混药法和叶片药膜法比较了不同类型的7种化学杀虫剂(氯虫苯甲酰胺、甲氨基阿维菌素苯甲酸盐、乙酰甲胺磷、高效氯氟氰菊酯、乙基多杀菌素、虫螨腈和虱螨脲)对草地贪夜蛾3龄幼虫的毒力。【结果】以点滴法进行测定，7种化学杀虫剂中对草地贪夜蛾3龄幼虫毒力最大的是甲维盐，处理后24 h的LD₅₀为0.375 μg/g；毒力最小的是虱螨脲，处理后72 h的LD₅₀为261.107 μg/g。以饲料混药法进行测定，乙基多杀菌素对草地贪夜蛾3龄幼虫毒力最大，乙酰甲胺磷的毒力最低，处理后24 h的LC₅₀分别为0.061和9 426.217 μg/g。以叶片药膜法进行测定，毒力最大的是甲维盐，最小的是高效氯氟氰菊酯，处理后24 h的LC₅₀分别为0.062 和471.343 mg/L。对3种生物测定方法的数据进行分析，点滴法的χ²值最小，P值最大；同时，相比于饲料混药法，点滴法和叶片药膜法测定中草地贪夜蛾种群遗传一致性较好。【结论】除虱螨脲外，测定的其余6种杀虫剂(氯虫苯甲酰胺、甲氨基阿维菌素苯甲酸盐、乙酰甲胺磷、高效氯氟氰菊酯、乙基多杀菌素、虫螨腈)对草地贪夜蛾幼虫的最适用的生物测定方法是点滴法。相比于饲料混药法和叶片药膜法，点滴法不仅能较准确地反映种群整体在遗传学上的纯度，同时在生物测定结果的重复性上也是最好的。虱螨脲推荐使用的生物测定方法是以胃毒为主的饲料混药法和叶片药膜法。

【目的】评估草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda转移至小麦上为害和暴发的风险。【方法】采用室内饲养观察与调查统计的方法，测定和比较了23℃下草地贪夜蛾在玉米和小麦上的取食和生长发育特性及种群生命表参数。【结果】草地贪夜蛾在小麦上可以完成世代，其3龄后幼虫取食小麦的取食量及体重指标显著地高于同处理后时间在玉米上取食的；而食物利用效率、幼虫存活率、幼虫发育历期、卵孵化率均显著低于取食玉米的。取食玉米和取食小麦的草地贪夜蛾的平均蛹重、产卵前期、单雌产卵量等指标间无显著差异。另外，生命表参数比较结果表明，取食玉米和取食小麦的草地贪夜蛾的平均世代周期(T)、内禀增长率(r_m)和周限增长率(λ)间均无显著差异，取食玉米的草地贪夜蛾的净增殖率(R₀)为303.55±2.04，显著高于取食小麦的。【结论】草地贪夜蛾取食小麦时，生长发育速度快，能够完成世代生活史，但其食物利用效率、种群繁殖能力等却均低于取食玉米时，说明草地贪夜蛾更适宜在玉米上取食为害，存在转移至小麦为害的风险，但考虑到虫源、自然温度等条件，草地贪夜蛾在小麦上暴发的风险较小。本研究结果为明确草地贪夜蛾在小麦上为害和暴发的风险以及草地贪夜蛾的科学防控提供了理论依据。

【目的】明确草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda对寄主植物水稻和玉米的取食和产卵选择性与适合度，进而分析草地贪夜蛾对水稻的为害风险。【方法】采用自由选择法，测定草地贪夜蛾对水稻和玉米的取食、产卵选择性。调查取食水稻和玉米苗的草地贪夜蛾的生长发育、存活率、繁殖力的差异，用种群增长趋势指数(I)评价水稻对草地贪夜蛾的适合度。【结果】草地贪夜蛾对水稻和玉米的取食和产卵选择性存在显著差异。接虫后2-48 h，幼虫对玉米的取食选择率随时间延长而逐渐增加，而幼虫对水稻的取食选择率随时间延长而逐渐降低；接虫后48 h，2龄幼虫和4龄幼虫对玉米的取食选择率分别为93.06%和59.72%，分别是对水稻的取食选择率的66.95倍和21.48倍。自由产卵6 d，在玉米上的产卵量是在水稻上的8.64倍。与取食玉米苗的相比，取食水稻苗的草地贪夜蛾幼虫发育历期延长，卵孵化率、幼虫存活率、化蛹率和成虫羽化率均显著降低，雌性比率下降，雌成虫寿命显著缩短，单雌产卵量显著减少。取食玉米苗的草地贪夜蛾的种群增长趋势指数(I)为165.93，其在水稻上的相对适合度为0.21。【结论】相较于水稻，草地贪夜蛾在玉米上表现出更高的适合度，其偏好在玉米上取食和产卵。水稻不是目前侵入我国的草地贪夜蛾的嗜食寄主，但其可以通过取食水稻幼苗正常生长发育并完成生活史，在其种群密度较大、嗜食寄主植物缺乏时存在转移为害水稻的潜在风险。

 【目的】明确草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda在浙江省鲜食玉米品种上的发生规律和防治方法。【方法】2019年在浙江东阳通过灯诱和性信息素诱捕方法研究草地贪夜蛾成虫消长规律；通过田间调查明确成虫产卵习性和幼虫对玉米植株的为害习性，以及幼虫对不同甜、糯玉米品种的为害差异；通过田间药效试验筛选高效防治药剂。【结果】灯诱和性信息素诱捕结果表明草地贪夜蛾在浙江东阳于6月中下旬和9月中旬出现2次明显成虫高峰，9月峰值显著高于6月；草地贪夜蛾成虫趋向于在较低叶龄玉米植株上产卵，80%的卵产于玉米叶片正面，幼虫取食具有显著的趋嫩习性，严重为害玉米心叶和果穗；不同玉米品种被害株率差异较大，甜玉米品种为害株率为0~28.41%，糯玉米品种为害株率为0~42.50%。2019年在浙江东阳进行的田间药剂试验筛选出了甲维盐、虱螨脲、乙基多杀菌素、甲氧虫酰肼、虫螨腈、丙溴磷、灭多威、茚虫威、苦皮藤素Celastrus angulatus和甘蓝夜蛾核型多角体病毒(Mamestra brassicae NPV, MbNPV)等高效防治药剂，药后3 d虫口减退率为87.61%~98.99%，田间持效期约为7~10 d。【结论】草地贪夜蛾不仅为害玉米植株的叶片，更严重为害果穗，秋季为害显著高于春季，对鲜食玉米的生产造成严重影响。在防治玉米上的草地贪夜蛾时，应采用化学防治、生物防治和物理诱控相结合的综合防控措施，以及重视苗期保苗和后期保穗，适当放宽拔节期到抽雄期防治阈值的防治策略。

草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda自2018年12月入侵我国以来，对我国的粮食安全造成重大威胁。为有效控制其为害，经过短短一年的共同努力，我国植保工作者在草地贪夜蛾的分类和生物型鉴定，为害作物种类、抗寒能力及扩散规律调查，潜在地理分布和迁飞路线预测，生物防治及化学防治等方面研究取得了多项重要进展，发表研究论文250多篇。明确了入侵我国的草地贪夜蛾主要为玉米型，为害作物达15种，具有东、西两条迁飞路线，在全国各省区均可分布为害；鉴定出草地贪夜蛾天敌31种，筛选出一批防效良好的杀虫剂。本文在总结现有研究工作的基础上，提出应进一步加强草地贪夜蛾的智能识别和自动监测技术研究，加快优势天敌和转Bt抗虫玉米的产业化，加强草地贪夜蛾抗药性水平及抗性基因频率动态监测，并尽快研发高效性诱剂和食诱剂等产品，同时加强草地贪夜蛾重要生命过程的调控机制及其对化学杀虫剂和不同类型Bt杀虫蛋白产生抗性的分子机制研究，为实现草地贪夜蛾的可持续控制提供理论基础和技术支撑。

【目的】探明田间草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda卵巢的发育状态及其变化，为草地贪夜蛾种群的发生和迁飞动态提供精准监测依据。【方法】采用雌性生殖系统解剖法，比较不同日龄和地区的田间草地贪夜蛾雌蛾卵巢的形态差异，分析卵巢成熟状态与雌蛾交配的关系。【结果】草地贪夜蛾雌蛾生殖系统包含卵巢、输卵管、交配囊、导精管、受精囊、附腺和产卵器。根据形态特征可以将田间草地贪夜蛾卵细胞分为卵黄发生前期、卵黄期和成熟期3个时期。田间雌蛾1日龄卵巢中发育最快的卵仅处于卵黄期中期，卵巢管柄为空；3日龄卵巢出现分化，一部分卵巢仍然和1日龄相似，另一部分卵巢中存在成熟卵；这种卵巢发育分化到羽化后11 d时仍然存在。云南江城、弥勒，广西田阳以及浙江瑞安和镇海等地的田间雌蛾，到死亡时分别有61.5%, 51.7%, 41.7%, 42.1%和35.5%卵巢发育不成熟。室内饲养第1代雌蛾中，有39.6%的个体到死亡时卵巢未发育成熟，和田间雌蛾比例相似。交配雌蛾卵巢可以是发育成熟和未成熟的，但是未成熟卵巢的比例仅为18.0%±5.0%。【结论】结果提示同一代次的田间草地贪夜蛾可能同时存在迁飞和非迁飞个体，其比例随地理位置和季节发生变化。本研究的结果在一定程度上解释了单纯依据化学农药难以防治草地贪夜蛾的原因，也为田间草地贪夜蛾的迁飞监测和绿色防控提供了一定依据。

【目的】为明确东亚小花蝽Orius sauteri对草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda幼虫的捕食能力及生物防治潜能。【方法】在室内条件下测定了东亚小花蝽3， 4和5龄若虫以及雌成虫对不同密度的草地贪夜蛾1龄幼虫的捕食能力；采用Holling II模型拟合计算东亚小花蝽对草地贪夜蛾的捕食功能反应和寻找效应。【结果】东亚小花蝽3， 4和5龄若虫以及雌成虫对草地贪夜蛾1龄幼虫的捕食功能反应均符合Holling II模型，东亚小花蝽雌成虫对草地贪夜蛾1龄幼虫的日捕食能力(a′/T_h)最强，为15.85头；最大理论捕食量(1/T_h)最大，为23.26头/d；处理单头猎物所需时间最短，为0.043 d；东亚小花蝽4龄若虫对草地贪夜蛾1龄幼虫的日捕食能力(a′/T_h)最低，仅为10.85头。东亚小花蝽对草地贪夜蛾1龄幼虫的捕食量与猎物密度呈正相关，而寻找效应与猎物密度呈负相关。【结论】研究表明东亚小花蝽对草地贪夜蛾1龄幼虫具有较好的捕食能力。这些研究结果为正确评价东亚小花蝽对草地贪夜幼虫的生防潜能提供了理论依据。