【目的】为了探讨圆唇散白蚁Reticulitermes labralis雌性工蚁向补充生殖蚁转化过程中的卵巢发育特征以及卵母细胞从滞育到恢复生长发育的起点。【方法】观察圆唇散白蚁雌性工蚁从3龄-6龄-转化成补充生殖蚁发育过程中的卵巢和卵母细胞动态变化；在若蚁向原始生殖蚁和补充生殖蚁转化的转录组中筛选出与卵母细胞生长期相关的基因表达，利用qRT-PCR方法检测这些基因在工蚁向生殖蚁转化发育过程中的表达水平。【结果】圆唇散白蚁工蚁从低龄向老龄发育过程中卵巢逐渐增大；前补充生殖蚁卵巢长度和宽度分别是工蚁的约2和3倍，而前补充生殖蚁转化为补充生殖蚁之后，卵巢没有显著增大。工蚁转化为前补充生殖蚁之后，卵母细胞大小（长径）和滤泡细胞层厚度仍然没有显著改变；前补充生殖蚁转化成补充生殖蚁之后，卵母细胞大小和滤泡细胞层厚度显著增加。调控卵母细胞生长期发育的6个基因cyclin-dependent kinase 1, cell division cycle protein 20, G2/mitotic-specific cyclin-B3, G2/mitotic-specific cyclin-A, aurora kinase A和serine/threonine-protein kinase polo在补充生殖蚁中的表达水平极显著增加，分别是前补充生殖蚁的约34, 62, 91, 36, 57和106倍。工蚁转化为前补充生殖蚁之后，仅G2/mitotic-specific cyclin-B3, G2/mitotic-specific cyclin-A和aurora kinase A表达水平显著增高，分别是工蚁的约3, 3和2倍。【结论】圆唇散白蚁工蚁卵巢发育的停滞发生在老龄期，卵母细胞发育的恢复和减数分裂启动从工蚁转化为补充生殖蚁之后开始。

【目的】家蚕Bombyx mori非滞育红卵突变体Re-nd是唯一在非滞育状态下卵色呈现鲜红色的突变品种。本研究通过基因连锁分析和定位克隆的方法确定Re-nd的突变基因所在的染色体及紧密连锁位置，为后续Re-nd的功能研究及应用奠定基础。【方法】以家蚕卵色突变体Re-nd和野生型大造进行杂交，配制基因连锁分析群体材料和定位克隆群体材料；针对家蚕全染色体进行SNP标记开发，利用BC₁代群体材料进行基因连锁分析，确定Re-nd的突变基因所在的染色体；针对定位的Rend的突变基因所在染色体进行SNP标记开发，利用BC₁群体材料对Re-nd的突变基因进行定位克隆。【结果】基因连锁分析结果显示Re-nd的突变表型与第6号染色体上的SNP标记完全连锁；初步定位克隆结果显示Re-nd的突变基因位于SNP标记SNP7和SNP17之间，物理距离4.04 Mb；以SNP7和SNP17之间筛选出的6个SNP标记和25个重组个体进行精细定位克隆，结果显示Re-nd的突变基因所在的区域位于SNP10和SNP12两个SNP标记之间的nscaf2853上，物理距离949.3 kb左右。【结论】将Re-nd的突变基因定位于第6号染色体的2个SNP标记SNP10和SNP12之间，物理距离约949.3 kb。本研究为后续Re-nd突变基因的精细定位及功能应用研究奠定了基础。

 【目的】本研究旨在明确卵黄原蛋白受体(vitellogenin receptor, VgR)在番茄潜叶蛾Tuta absoluta生殖发育过程中的功能，为潜叶类害虫的绿色防控提供候选靶标。【方法】基于番茄潜叶蛾转录组数据，采用RT-PCR扩增TaVgR基因cDNA全序列，并进行生物信息分析；通过RT-qPCR分析TaVgR在番茄潜叶蛾不同发育阶段(1-4龄幼虫、1-7日龄雌蛹和雌成虫)和雌成虫不同组织(头、体壁、前肠、中肠、后肠、卵巢、脂肪体和马氏管)中的表达模式；进一步利用RNAi抑制番茄潜叶蛾雌蛹体内TaVgR的表达，并观测沉默TaVgR基因后番茄潜叶蛾卵巢发育及繁殖力的变化。【结果】克隆获得番茄潜叶蛾TaVgR cDNA(GenBank登录号: MZ682118)序列，其开放阅读框序列长5 496 bp，编码1 831个氨基酸，推测的蛋白分子量约为206 kD，等电点为5.17，信号肽包含N-端前18个氨基酸残基，并具有典型LDLR家族蛋白保守功能域。RT-qPCR结果显示，TaVgR转录水平随着番茄潜叶蛾龄期的增加逐渐上升，雌成虫羽化后达到最高水平；TaVgR在番茄潜叶蛾雌成虫的卵巢中表达量最高。TaVgR RNAi对初期雌蛹中TaVgR的表达抑制率为62.04%~72.55%，导致卵黄蛋白在卵巢中的沉积受阻，卵巢管和卵粒长度缩短，成虫10日单雌总产卵量及后代卵孵化率降低，最终引起番茄潜叶蛾繁殖力下降。【结论】TaVgR基因在番茄潜叶蛾雌成虫和卵巢中高表达，且沉默该基因严重阻碍其卵巢发育和降低繁殖力。本研究为开发以VgR基因作为靶标的鳞翅目害虫防治新技术奠定了理论基础。

【目的】Piwi蛋白互作RNA(PIWI-interacting RNA, piRNA)在昆虫的发育和免疫等重要生物学过程发挥重要的调控作用。本研究旨在丰富西方蜜蜂Apis mellifera的piRNA信息，并为进一步探究差异表达piRNA(differentially expressed piRNA, DEpiRNA)调控意大利蜜蜂Apis mellifera ligustica工蜂中肠发育的分子机理提供基础。【方法】基于已获得的意大利蜜蜂7日龄(Am7)和10日龄(Am10)工蜂中肠的small RNA(sRNA)组学数据，对piRNA进行预测和分析。将质控后的sRNA数据比对西方蜜蜂参考基因组，再将比对上的序列标签(tags)进一步比对数据库以滤除rRNA和tRNA等小非编码RNA(non-coding RNA, ncRNA)，进而根据piRNA的长度特征鉴定piRNA。采用TPM(tags per million)算法对piRNA表达量进行计算和归一化处理。根据|log₂ fold change|≥1且P≤0.05的标准筛选Am7 vs Am10 比较组的DEpiRNA。通过相关软件预测DEpiRNA的靶mRNA并进行GO和KEGG数据库注释。利用Cytoscape软件对DEpiRNA-mRNA调控网络进行可视化。通过Stem-loop RT-PCR对随机选取的Am7与Am10两组共有的6个piRNA的表达进行验证。利用RT-qPCR对随机挑选的6个DEpiRNA的表达趋势进行验证。【结果】从意大利蜜蜂工蜂中肠中共鉴定到596个piRNA，长度介于24~33 nt，且Am7和Am10组中不同长度分布范围的piRNA的首位碱基偏向性具有明显差异。在Am7 vs Am10比较组共筛选出41个DEpiRNA，其中piR-ame-11093, piR-ame-1111451, piR-ame-190949和piR-ame-932156可分别靶向1 195, 1 018, 4 040和1 063条mRNA。上述靶mRNA可分别注释到45个功能条目和45条通路。Stem-loop RT-PCR验证结果显示6个piRNA (piR-ame-1084826, piR-ame-11093, piR-ame-14476, piR-ame-24995, piR-ame-39500和piR-ame-774987)均真实表达。RT-qPCR结果显示共有6个DEpiRNA (piR-ame-1084826, piR-ame-11093, piR-ame-14476, piR-ame-24995, piR-ame-39500和piR-ame-774987)的表达趋势与测序数据中的表达趋势一致，证实了本研究中sRNA-seq数据的可靠性和piRNA差异表达趋势的真实性。【结论】本研究从意大利蜜蜂工蜂中肠中鉴定到596个piRN，长度介于24~33 nt。不同长度分布范围的piRNA的首位碱基偏向性具有明显差异；piR-ame-11093, piR-ame-1111451, piR-ame-190949和piR-ame-932156具有靶向调控基因表达参与工蜂中肠发育过程的潜力。

【目的】本研究旨在以庭疾灶螽Tachycines asynamorus为例探索驼螽消化系统和排泄系统在结构上与其生活环境的适应关系。【方法】运用解剖学方法、石蜡切片技术、冰冻切片技术及超薄切片技术对庭疾灶螽中肠及马氏管的结构进行研究。【结果】庭疾灶螽中肠向前延伸出3个胃盲囊包围着前胃。中肠上皮由再生细胞、柱状上皮细胞和内分泌细胞构成，具有典型的再生细胞龛；闭合型内分泌细胞紧贴在再生细胞龛的外围，基底区聚集大量的分泌颗粒。柱状上皮细胞内聚集有2类大的分泌颗粒：线团状颗粒和电子密度很高的球状颗粒；中肠管腔内有明显的围食膜结构，中肠基底部由基膜和肌肉层组成。马氏管着生在中后肠的交界处，从横切面看马氏管管壁具有3~5个细胞，细胞近管腔端部具有大量长微绒毛，细胞质内分布着电子致密的同心圆球晶体，基底膜内折形成膜迷路。【结论】庭疾灶螽中肠柱状上皮细胞的线团状颗粒由微丝包裹；内分泌细胞由再生细胞龛中的细胞分化而来，产生内分泌颗粒并将其排到血腔；中肠基膜发达，包含微丝与复合糖成分，基膜通过对中肠上皮细胞的支撑作用为肠道蠕动提供保障。庭疾灶螽马氏管细胞中可见大量颗粒和大量同心圆球晶体，推测可能是一种储存排泄。

【目的】丰富东方蜜蜂微孢子虫Nosema ceranae的微小RNA(microRNA, miRNA)信息，并为深入探究miRNA在病原孢子和病原侵染中的功能提供理论和实验依据。【方法】基于已获得的small RNA-seq数据，利用生物信息学软件对东方蜜蜂微孢子虫的纯净孢子中的miRNA进行鉴定和分析。采用茎环反转录PCR(stem-loop RT-PCR)检测已鉴定的miRNA的表达；通过分子克隆与Sanger测序验证miRNA的序列。使用TargetFinder软件预测这些miRNA的靶基因，并对靶基因进行数据库注释。根据miRNA与靶基因的靶向结合关系构建调控网络，再利用Cytoscape软件进行可视化。【结果】在东方蜜蜂微孢子虫孢子中共鉴定到10个miRNA；这些miRNA的长度分布介于21~25 nt，首位碱基表现出U偏向性，每一位碱基的偏向性差异明显。Stem-loop RT-PCR检测结果表明这10个miRNA均真实表达；Sanger测序结果证实了随机选取的其中2个miRNA的序列真实性。共预测出249个靶基因，其中分别有249, 118, 136和3个靶基因可注释到Nr, Swiss-Prot, KOG和eggNOG数据库。此外，分别有134和71个靶基因可分别注释到GO数据库的30个功能条目和KEGG数据库的54条通路。【结论】本研究揭示了东方蜜蜂微孢子虫孢子中miRNA的存在和表达；这些miRNA通过调控潜在靶基因的表达参与孢子的生命活动。

【目的】比较不同CO2浓度下虫螨腈和唑虫酰胺对西花蓟马Frankliniella occidentalis和花蓟马F. intonsa成虫的毒力以及体内保护酶和解毒酶等酶活性的影响，对未来高CO₂浓度下进一步研究蓟马对虫螨腈和唑虫酰胺的抗性管理具有一定的指导意义，以便及时做出害虫管理策略的调整。【方法】采用浸渍法测定正常CO₂浓度(400 μL/L)和高CO₂浓度(800 μL/L)环境下虫螨腈和唑虫酰胺对两种蓟马成虫的毒力［致死中浓度(LC₅₀值)和亚致死浓度(LC₂₅值)］；通过酶活性分析测定这两种CO₂浓度下LC₂₅浓度虫螨腈和唑虫酰胺处理48 h后这两种蓟马成虫体内保护酶［超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)、过氧化物酶(peroxidase, POD)和过氧化氢酶(catalase, CAT)］，解毒酶［羧酸酯酶(carboxylesterase, CarE)、谷胱甘肽S-转移酶(glutathione S-transferase, GST)和细胞色素P450 (cytochrome P450 enzyme system, CYP450)］以及乙酰胆碱酯酶(AChE)的活性。【结果】800 μL/L CO₂下虫螨腈在48 h内对西花蓟马和花蓟马成虫的LC50值分别为1.33和0.37 mg/L，分别是400 μL/L CO₂下的0.68和0.66倍; LC₂₅值分别为0.60和0.24 mg/L, 分别为400 μL/L CO₂下的0.61和0.83倍。800 μL/L CO₂下唑虫酰胺在48 h内对西花蓟马和花蓟马成虫的LC₅₀值分别为1 002.64和247.66 mg/L，分别是400 μL/L CO₂下的0.98和0.78倍; LC₂₅值分别为368.77和146.10 mg/L, 分别是400 μL/L CO₂下的2.44和1.21倍。在800 μL/L CO₂下，LC₂₅浓度虫螨腈和唑虫酰胺处理48 h后两种蓟马成虫体内测试的各种酶活性(CYP450除外)均高于400 μL/L CO₂下的；两个CO₂浓度下西花蓟马成虫体内SOD, POD, CAT以及AChE活性均显著高于花蓟马成虫体内的相应酶活性。两个CO₂浓度下，经LC₂₅浓度唑虫酰胺处理后，两种蓟马成虫体内的3种保护酶活性(400 μL/L CO2下花蓟马SOD活性除外)均显著高于对照(含0.1%吐温-80的蒸馏水处理)，且800 μL/L CO₂下西花蓟马成虫体内SOD和CAT活性均最高，分别为39.74±1.59和37.93±1.31 U/mg pro。两个CO₂浓度下，LC₂₅浓度虫螨腈和唑虫酰胺处理48 h后，西花蓟马成虫体内CarE活性较对照显著降低，而花蓟马成虫体内CarE活性高于对照，其中，经唑虫酰胺处理后达到显著差异；同时两种蓟马成虫体内AChE活性较对照均显著提高。【结论】高CO₂浓度增强了杀虫剂对西花蓟马和花蓟马的毒杀效果，花蓟马对这两种杀虫剂的敏感性强于西花蓟马，且西花蓟马对这两种杀虫剂的适应能力强于花蓟马。

【目的】角倍蚜Schlechtendalia chinensis是五倍子蚜的主要生产种，深入了解角倍蚜越冬若蚜的生物学习性，揭示田间无土植藓条件下越冬若蚜的种群动态，可以为进一步降低若蚜越冬的死亡率，提高五倍子产量提供依据。【方法】在田间以无纺布为基质种植侧枝匐灯藓Plagiomnium maximoviczii培育越冬若蚜，定期采集带不同龄期角倍蚜的藓块带回实验室，利用数码显微系统连续观测和记录越冬期间若蚜的行为习性、形态特征、种群动态和龄期分布等，并连续测量越冬期间侧枝匐灯藓的藓层厚度和覆盖率。【结果】角倍蚜秋迁蚜以卵胎生方式产生若蚜，若蚜在侧枝匐灯藓的拟叶基部分泌蜡丝包裹自身并形成蜡球，在蜡球内取食和越冬。每个蜡球内通常有1头若蚜。越冬若蚜从1-4龄，体色由淡黄色逐渐加深至深褐色，体长和体宽随龄期的增加而增加，分别从1龄若蚜552.92±16.95和94.70±11.52 μm增加到4龄若蚜的1 205.25±10.75和593.15±7.66 μm。越冬期间若蚜的平均种群密度从10月中旬的13.10×10⁴头/m²降至翌年3月的1.05×10⁴头/m²，总死亡率高达91.98%。越冬若蚜个体间的发育进度很不整齐，并与当地的气温变化密切相关。若蚜越冬期间侧枝匐灯藓的厚度和覆盖率逐步增加。【结论】越冬若蚜体长和体宽可作为角倍蚜龄期鉴别的主要指标。田间越冬期间角倍蚜若蚜的总死亡率很高，其中越冬初期和中期若蚜转移寄生期的死亡率较其他阶段高。

【目的】地红蝽Pyrrhocoris tibialis是一种重要的农业植食性害虫，寄主范围广泛。本研究测定地红蝽对不同植物的取食偏好及分析寄主植物物理性状和营养物质在地红蝽成虫寄主选择行为中的作用，以期从寄主理化性状的角度来探讨地红蝽寄主选择行为机制，为指导作物抗虫育种提供依据。【方法】通过自由选择方法研究地红蝽成虫对5种寄主植物(谷子Setaria italica、高粱Sorghum bicolor、绿豆Vigna radiata、大豆Glycine max和玉米Zea mays)叶片的取食选择性；使用Y型嗅觉仪进一步检测地红蝽对5种植物叶片气味的趋性反应；测定分析5种植物叶片物理性状及主要营养物质含量与地红蝽取食选择性的相关性。【结果】地红蝽成虫对5种寄主植物叶片的取食选择率存在显著性差异，依次为谷子＞高粱＞绿豆＝大豆＞玉米，与对这5种寄主植物叶片气味的趋性反应百分率结果一致。相关性分析表明，地红蝽成虫的取食选择性与叶片长宽比、含水量和背面茸毛密度呈显著正相关，相关系数分别为0.881, 0.884和0.906，而与地红蝽成虫取食前后寄主植物叶片可溶性糖含量变化和总蛋白质含量变化呈显著负相关，相关系数分别为-0.915和-0.951。通径分析表明，寄主植物叶片背面茸毛密度和总蛋白质含量变化是地红蝽寄主选择性的重要决定因素。【结论】地红蝽成虫对不同寄主植物存在取食选择和趋向性差异，地红蝽成虫取食选择与寄主植物叶片长宽比、背面茸毛密度、含水量以及可溶性糖和总蛋白质含量变化有关。

【目的】为明确大豆荚发育程度对点蜂缘蝽Riptortus pedestris成虫存活及生殖力的影响。【方法】在室内24℃±1℃恒温下，用不同日龄(5, 15, 25, 35和45日龄)离体鲜豆荚饲喂点蜂缘蝽，测定成虫寿命、产卵前期、产卵期、单雌产卵量等生物学参数和不同日龄豆荚籽粒中脂肪、总蛋白和总糖含量，分析点蜂缘蝽成虫的生物学参数与不同日龄豆荚籽粒中主要营养成分含量之间的相关性。【结果】随着所取食豆荚日龄的增加，点蜂缘蝽成虫的平均寿命、产卵期、单雌产卵量呈先增加然后下降的趋势，而产卵前期的变化趋势则相反。当饲喂35日龄豆荚时，点蜂缘蝽成虫寿命最长(56.90±9.47 d)，产卵前期最短(6.00±0.58 d)，产卵期最长(29.67±6.61 d)，单雌产卵量最高(129.56±36.53粒)，且与取食其他日龄豆荚的成虫之间存在显著差异。点蜂缘蝽成虫寿命、产卵期、单雌产卵量均与豆荚籽粒脂肪和总蛋白含量呈显著正相关，产卵前期与豆荚籽粒脂肪和总蛋白含量呈显著负相关。【结论】大豆荚发育程度对点蜂缘蝽成虫寿命及生殖力等生物学参数具有显著的影响，35日龄豆荚对点蜂缘蝽成虫存活和繁殖最为有利。

【目的】明确日本刀角瓢虫Serangium japonicum对叶毛密度和类型不同的番茄Lycopersicon esculentum品种的产卵选择性。【方法】以4个番茄品种(砧木101、闽粉樱1号、砧木301和以色列超级金刚)作为日本刀角瓢虫的寄主植物，观察番茄叶片背面超微结构，统计叶片背面叶毛类型及密度；用叶蝶法和植株法测定日本刀角瓢虫雌成虫在带烟粉虱Bemisia tabaci卵的4个番茄品种上的产卵量占比；并测定日本刀角瓢虫在这4个番茄品种叶片上的子代及成虫表现(生长发育、繁殖和捕食能力)以及对叶片的附着力，雌成虫对4个番茄品种健康叶片和受烟粉虱为害叶片的气味选择以及4个番茄品种叶碟和植株上日本刀角瓢虫卵被同类捕食的风险。【结果】4个番茄品种叶片背面叶毛类型均具有非腺毛和腺毛，其中，非腺毛有Ⅱ, Ⅲ和Ⅴ型，腺毛有Ⅰ, Ⅳ Ⅵ和Ⅶ型，且均以Ⅴ型非腺毛密度最高。以色列超级金刚叶片背面的叶毛密度显著低于其他3个供试番茄品种。日本刀角瓢虫偏好在以色列超级金刚上产卵，在以色列超级金刚、砧木101和闽粉樱1号上的繁殖力(165~223.92粒/雌)显著高于在砧木301上的(2809粒/雌)。日本刀角瓢虫子代由卵发育至成虫的历期在闽粉樱1号上最短(15.73 d)，在砧木101上最长(23.00 d)。日本刀角瓢虫在4个番茄品种上的产卵选择性与子代表现及亲代表现无显著相关性，而与日本刀角瓢虫卵的被捕食风险存在显著正相关关系。日本刀角瓢虫在4个番茄品种上的产卵选择性与日本刀角瓢虫对番茄叶片的附着力及番茄叶片上各类型叶毛密度均无显著相关性。番茄的7种叶毛类型其叶毛密度在4个番茄品种上都存在显著差异，除番茄Ⅰ型腺毛密度与日本刀角瓢虫的繁殖力(30 d内单雌产卵量)存在显著负相关关系外，其他6种类型的叶毛密度与日本刀角瓢虫子代表现及亲代表现均无显著相关性。日本刀角瓢虫雌成虫对4个番茄品种的气味无明显偏好。日本刀角瓢虫卵在4个番茄品种叶蝶和植株上的被捕食比例差异显著。【结论】日本刀角瓢虫雌成虫偏好在叶毛密度低的番茄品种叶片上产卵，番茄腺毛对日本刀角瓢虫成虫生命活动影响显著。

【目的】明确柑橘大实蝇Bactrocera minax成虫梳理行为规律，为挖掘防控柑橘大实蝇的新靶标，制订有效的害虫绿色防控策略提供理论依据。【方法】采用录像技术和基于计算机视觉识别技术的柑橘大实蝇成虫梳理行为检测与统计系统，对柑橘大实蝇成虫梳理行为的特征图谱、单次平均耗时和频次占比进行分析。【结果】结果表明，柑橘大实蝇雌雄成虫的梳理行为类型可以分别分为9和8种，雌雄成虫均有前足、后足、复眼、触角、口器、腹部、翅和中足的梳理, 雌成虫还有产卵器梳理行为。柑橘大实蝇成虫可以从非梳理行为随意转入所有类型的梳理行为，或者从任一类型梳理行为转入非梳理行为。在柑橘大实蝇成虫的各类型梳理行为之间的频次占比和单次平均耗时均存在显著差异。其中雌雄成虫梳理前足的频次占比(♀: 33.70%±2.53%; ♂: 33.89%±2.43%)和梳理翅的单次平均耗时(♀: 15.58±2.55 s; ♂: 24.76±4.12 s)均为最高。【结论】柑橘大实蝇成虫各类型梳理行为的时间序列并不固定，但这些梳理行为之间具有一定的内在联系。

【目的】迷卡斗蟋Velarifictorus micado存在两种显著不同的滞育型，即卵滞育和若虫滞育，而在长江流域附近两种滞育型种群存在广泛同域分布。本研究旨在探究浙江省同域分布不同滞育型迷卡斗蟋种群之间的遗传分化的情况。【方法】以浙江省百山祖、大盘山和天童山3个地区的不同滞育型的迷卡斗蟋6个种群共134个个体为研究材料，筛选具较高多态性的微卫星位点，并使用筛选获得的微卫星位点对这6个种群共134个个体进行种群遗传学分析。【结果】筛选出11对具较高多态性的微卫星位点；全部种群的平均等位基因数为13.803，平均观测杂合度为0.743，其中百山祖卵滞育种群观测杂合度最低，与其他种群间遗传分化最大。百山祖卵滞育种群与其他种群之间的基因交流程度很低，其余种群间均显示出高水平的基因流。【结论】浙江迷卡斗蟋不同地理种群及不同滞育型特征种群间遗传分化程度均较低，存在较频繁的基因交流，尚未表现出物种分化的趋势。