【目的】大垫尖翅蝗 Epacromius coerulipes (Ivanov)是广泛分布的草原蝗虫之一，但其基因资源缺乏。为了获得大垫尖翅蝗的基因数据，对其进行了转录组测序和分析。【方法】利用Illumina公司paired-end转录组的测序技术进行从头组装。【结果】总计获得了63 033条unigenes，平均长度为772 bp，N50为1 589 bp。通过BLAST搜索，确定有25 132条（39.87%）unigenes与NCBI数据库已知的蛋白质相匹配，其中有24 841，16 490，11 558和8 013条unigenes成功注释到Nr，Swiss-Prot，GO和COG数据库中。KEGG数据库中，7 218条unigenes形成218条代谢或信息通路。其中，189条unigenes参与外源性物质或药物的代谢通路。进一步分析显示，213条unigenes被确认为可能参与外源性物质的解毒作用，29条unigenes被确定为编码杀虫剂的目标蛋白。此外，检测到5 696条简单重复序列。【结论】该转录组测序分析将为进一步研究大垫尖翅蝗的基因功能分析及杀虫剂的抗药性机制分析奠定分子基础。

【目的】建立达摩凤蝶 Papilio demoleus Linnaeus新孵幼虫细胞系，并对其生物学特性进行研究。【方法】使用改良配方的Grace培养基并辅以20%胎牛血清，通过原代和传代培养建立达摩凤蝶新孵幼虫细胞系。通过显微观察、细胞活力分析、核型分析和分子鉴定，获得4个新建细胞系的生物学特性数据。使用Bac-To-Bac杆状病毒表达系统构建重组分泌型碱性磷酸酶杆状病毒(AcMNPV-SEAP)。使用有限稀释法测定达摩凤蝶细胞系对AcMNPV-SEAP的半数组织培养感染剂量(TCID₅₀), 比较达摩凤蝶细胞系对AcMNPV-SEAP的敏感性。【结果】建立了4个贴壁生长的达摩凤蝶新孵幼虫细胞系(RIRI-PaDe-1, RIRI-PaDe-2, RIRI-PaDe-3及RIRI-PaDe-4)，且均传至60代以上。形态学方面，细胞系RIRI-PaDe-1和RIRI-PaDe-4较为相近，均由圆形、梭形以及多边形细胞组成，细胞系RIRI-PaDe-2主要为圆形细胞，而RIRI-PaDe-3主要为类似表皮细胞和纤维状细胞。细胞增殖动力学方面，4个细胞系的群体倍增时间分别为69.77, 67.42, 81.48及65.43 h。核型分析显示4个细胞系染色体数量均呈正态分布，其中RIRI-PaDe-2, RIRI-PaDe-3以及RIRI-PaDe-4的染色体数目分布区间比较接近，在45~97条之间，RIRI-PaDe-1的染色体条数相比偏少，在36~90条之间。通过比对4个达摩凤蝶细胞系和虫卵的细胞色素c氧化酶亚基I(COI)基因序列，证明4个新建细胞系来源于达摩凤蝶组织。比较4个细胞系对AcMNPV-SEAP敏感性发现RIRI-PaDe-3对此病毒较为敏感，可作为重组杆状病毒表达的宿主。【结论】虽然4个新建达摩凤蝶细胞系的来源相同，具有相同的遗传背景，但其生物学特征仍有明显差异，具有进一步研究的价值。

【目的】探究昆虫病原线虫嗜菌异小杆线虫沧州品系 Heterorhabditis bacteriophora strain Cangzhou侵染对蛴螬脂肪体和中肠的影响，进一步明确其对蛴螬的致病机理。【方法】采用透射电镜技术，观察暗黑鳃金龟 Hololtrichia oblita (Faldermann)和大黑鳃金龟 H. parallela Motschulsky 2龄幼虫被嗜菌异小杆线虫沧州品系侵染后其脂肪体和中肠组织的病理变化。【结果】血腔注射感染期病原线虫嗜菌异小杆线虫沧州品系悬浮液24和48 h后，观察发现暗黑鳃金龟和大黑鳃金龟2龄幼虫脂肪体和中肠的组织结构均按时序逐渐发生变化，起初表现为脂肪球变形或变小，颜色变浅，脂肪体细胞和中肠细胞内质网、线粒体肿胀，中肠微绒毛变形脱落等现象，48 h后包裹脂肪球的膜结构破裂，脂肪体细胞和中肠细胞线粒体破裂，内质网数量减少，中肠微绒毛大量脱落，同时核内染色质大量解离，核膜破裂。【结论】经昆虫病原线虫嗜菌异小杆线虫沧州品系处理后，暗黑鳃金龟和大黑鳃金龟两种金龟甲2龄幼虫脂肪体和中肠细胞均出现明显的病理变化过程，这是嗜菌异小杆线虫高效致死蛴螬的原因之一。本研究可为昆虫病原线虫作为一种生物防治手段在蛴螬的综合防治中更好地发挥作用提供理论依据。

【目的】家蚕 Bombyx mori 微粒子病一直影响着蚕种业的健康发展，快速而准确地检测出寄生于蚕卵中的家蚕微孢子虫 Nosema bombycis 对于有效控制家蚕微粒子病危害意义重大。【方法】环介导等温扩增（loop-mediated isothermal amplification, LAMP）法是一种快速、灵敏、特异的DNA体外恒温扩增方法，本文基于LAMP检测法的原理，依据家蚕微孢子虫孢子繁殖复制相关的 EB1 基因（GenBank登录号：KF421134.1）设计LAMP引物，对LAMP反应体系的最佳反应温度、内外引物浓度比、检测反应的特异性、灵敏度等进行研究，建立了一种检测蚕卵感染家蚕微粒子病的LAMP检测方法。【结果】结果表明，基于EB1 基因建立的LAMP检测方法在63℃恒温下在1.5 h内就可完成对样品的有效检测，本LAMP法对家蚕微孢子虫孢子DNA的检测灵敏度为5.0×10^-3 ng/μL，对EB1-pMD^TM19-T质粒标准品的检测灵敏度为1.0×10² copies/μL，同时对人工感染家蚕微粒子病单个母蛾产下蚕卵的1/8卵圈量或1粒蚕卵均能检出阳性结果。上述结果都分别应用凝胶电泳法、恒温荧光检测仪以及SYBR GreenⅠ显色肉眼观察法得到同步判定。【结论】本研究建立的基于EB1基因LAMP法可用于蚕卵微粒子病的检测，LAMP法为蚕种质量检验及成品卵微粒子病现场检疫提供了新技术。

【目的】明确雷公藤Tripterygium wilfordii Hook. f.生物碱对粘虫Mythimna separata (Walker)神经系统的影响，为阐明其杀虫作用机制提供依据。【方法】采用载毒叶片法测定粘虫5龄幼虫经雷公藤总生物碱处理后体内乙酰胆碱酯酶（AChE）、Na⁺, K⁺-ATPase、Ca²⁺, Mg²⁺-ATPase、谷丙转氨酶（GPT）和谷氨酸脱羧酶（GAD）等重要神经系统酶活性及乙酰胆碱（ACh）、谷氨酸（Glu）和γ-氨基丁酸（GABA）等神经递质的含量。【结果】雷公藤总生物碱处理对粘虫5龄幼虫AChE无明显影响，麻醉期处理粘虫幼虫体内ACh相对含量与同期对照无显著差异。处理粘虫幼虫在轻度麻醉期、深度麻醉期和复苏期体内GABA和Glu含量显著升高，GABA含量分别升高了89.86%, 49.28%和20.29%，Glu含量分别升高了24.55%, 23.33%和8.13%。处理粘虫幼虫GPT活性明显受到抑制，而GAD活性无明显变化。处理明显抑制粘虫幼虫头部Na⁺, K⁺-ATPase和Ca²⁺, Mg²⁺-ATPase活性，但对中肠两种ATPase活性影响不大。【结论】研究结果有助于了解雷公藤生物碱对昆虫神经系统的影响，也为进一步阐明其作用靶标奠定了基础。

【目的】研究明确桔小实蝇 Bactrocare dorsalis  (Hendel) 抗药性品系与敏感品系的基本生物学特征以及相对适合度、内禀增长率等种群生物学参数差异。【方法】实验室条件下筛选出对敌百虫具中抗和高抗的桔小实蝇品系，观察记录其与敏感品系的生物学特性，比较三者之间的主要生物学参数。【结果】桔小实蝇敏感品系与2个抗性品系的卵、幼虫和蛹的发育历期、化蛹率、产卵前期、雌雄虫寿命、存活时间及雌虫比率均无显著差异。中抗品系卵孵化率和成虫羽化率分别为68.33%和93.73%，均显著低于敏感品系（分别为88.33%和97.93%）和高抗品系（分别为86.67%和98.21%）。与敏感品系的产卵量864.61粒/雌和高抗品系的产卵量750.70粒/雌相比，中抗品系的产卵量降低至630.87粒/雌。3个品系雌虫日产卵量动态规律比较一致，均呈开始产卵后短时间内进入产卵盛期，继而产量达到高峰，之后产卵量波动下降。但是与敏感品系相比，2个抗性品系雌虫较早进入产卵高峰。对成虫存活率动态拟合方程参数c值均大于1，符合I型存活曲线基本模型，表明在实验室理想条件下3个品系成虫均能达到其平均寿命。敏感品系种群趋势指数（I）最高，为339.41，其次为高抗品系（I = 307.82），最小为中抗品系（ I = 175.79），表明对敌百虫产生抗性抑制了桔小实蝇种群的增长，中抗品系抑制程度更大。敏感和高抗品系实验种群净增殖率较高，分别为327.89和284.29；中抗品系显著较低，为217.49。2个抗性品系内禀增长率（r_m）和周限增长率（λ）间无显著差异，且均显著大于敏感品系，世代历期（T）则显著缩短。基于种群净增殖率获得的敌百虫高抗和中抗品系相对适合度分别为0.8670和0.6633。【结论】在敌百虫的选择压力下，桔小实蝇抗药性品系的世代周期、中抗品系卵的孵化率和蛹的羽化率显著降低，其他多项生物学特征无显著变化。抗性品系的繁殖力和种群世代增长量受到抑制，以中抗品系更为明显；但与敏感品系相比，抗性品系种群增长潜力更大。

【目的】烟粉虱 Bemisia tabaci 是番茄黄曲叶病毒（Tomato yellow leaf curl virus, TYLCV）在自然界的唯一传播媒介，除了可以直接取食获取TYLCV，烟粉虱还可以通过交配获取此植物病毒。虽然前人研究证明了烟粉虱Middle East-Asia Minor 1 （MEAM1）和Mediterranean （MED）隐种都可以通过交配在两性个体之间水平传播TYLCV，但有关MEAM1与MED隐种水平传播TYLCV的能力是否存在差异，不同研究的结果却并不一致。另外，目前尚无关于烟粉虱的水平传播行为是否有助于TYLCV在田间扩散的相关研究。【方法】从浙江、广东、云南和河南4个省份的田间采集MEAM1和MED隐种烟粉虱种群，在室内应用分子标记对各种群所属隐种鉴定后分别建立7个供试种群，然后观察每个种群内带毒成虫与不带毒成虫通过交配在不同性别个体之间水平传播TYLCV的能力，并选用采自广东的MEAM1隐种烟粉虱模拟群体交配实验探究通过交配获毒的烟粉虱个体是否具有传播TYLCV致健康番茄植株发病的能力。【结果】4个省内的MEAM1和MED隐种烟粉虱都可通过交配对TYLCV进行水平传播，但传播频率一般在10%以下。不同省份的MEAM1隐种种群之间在水平传播TYLCV的能力上无显著差异，不同省份的MED隐种种群之间也不存在显著差异。另外，同一省份的MEAM1隐种与MED隐种之间在水平传播TYLCV的能力上也不存在显著差异，而且在两个隐种中，带毒雄虫将病毒水平传播给不带毒雌虫与带毒雌虫将病毒水平传播给不带毒雄虫的频率没有显著差异。研究还表明，采自广东的MEAM1隐种烟粉虱个体通过交配水平获毒后不能致健康番茄植株发病。【结论】综合以上结果，我们推测TYLCV在中国境内两个入侵烟粉虱隐种MEAM1和MED各自种群内个体之间的水平传播概率较低，对该病毒在田间的扩散可能没有作用或作用不大。

【目的】沙葱萤叶甲 Galeruca daurica（Joannis）是近年来在内蒙古草原暴发成灾的一种新害虫，以卵在牛粪、石块及草丛下越冬，了解其越冬卵的抗寒能力有助于预测其分布范围及种群数量动态。【方法】在室内测定了沙葱萤叶甲越冬卵在不同低温条件下（-18～-39℃）暴露12和24 h及在-30℃低温条件下暴露不同时间（0～60 d）的存活率以及存活卵的发育历期。【结果】低温强度和暴露时间对沙葱萤叶甲越冬卵的存活率有显著影响，随着温度的降低和暴露时间的延长，越冬卵的存活率降低。当温度≤-33℃暴露12 h或≤-30℃暴露24 h，越冬卵存活率显著低于其相应的对照(25℃)。越冬卵低温暴露12和24 h的致死中温度（LT₅₀）分别为-33.08和-32.13℃，在-30℃下的致死中时间（Lt₅₀）为33.33 d。经-36℃低温暴露12 h或≤-33℃低温暴露24 h后，存活的越冬卵发育历期显著延长，而-30℃低温暴露30 d内差异不显著。【结论】沙葱萤叶甲越冬卵抗寒能力强，冬季低温通常不会造成越冬卵的大量死亡。

【目的】白眉野草螟 Agriphila aeneociliella 是小麦上新发现的一种害虫，以滞育的老熟幼虫做土茧在土壤中越夏，研究明确滞育幼虫在夏季持续高温和极端高温条件下的存活率，为该害虫秋季虫源基数的预测预报和有效防控提供依据。【方法】以白眉野草螟带土茧滞育幼虫和不带土茧滞育幼虫为研究对象，在室内条件下设置43，46，49，52和55℃极端高温，分别处理0.5，1，2和4 h；设置35，37，39和41℃普通高温，分别处理1，2，4和8 d。【结果】极端高温处理2和4 h后，带土茧滞育幼虫半致死温度分别为50.04℃（95%置信区间: 49.36~50.47℃）和48.81℃（95%置信区间: 47.74~49.37℃），去除土茧后分别为48.20℃（95%置信区间: 47.66~48.74℃）和47.36℃（95%置信区间: 47.08~48.37℃）；52℃温度条件下，带有土茧滞育幼虫半致死时间为1.29 h（95%置信区间: 1.17~1.44 h），去除土茧后半致死时间为1.02 h（95%置信区间: 0.93~1.18 h）。普通高温处理41℃时，带有土茧滞育幼虫半致死时间为3.21 d（95%置信区间: 2.92~3.52 d），去除土茧后半致死时间为2.66 d（95%置信区间: 2.33~3.02 d）。【结论】白眉野草螟滞育幼虫具有很强的耐高温能力，土茧对其具有一定的保护作用。小麦收割后深耕灭茬，使土茧或幼虫裸露到地表，利用夏季土表高温杀死滞育幼虫，可以作为一项有效的农业防治措施。

【目的】建立基于小波神经网络病虫害预测预报模型，对提前采取防病防虫措施、减少农作物病虫害损失、提高农作物产量与质量具有重要意义。【方法】本研究以山西省运城市芮城县1980-2014年麦蚜发生程度和气象因子数据为基础，采用主成分分析法从40个基础气象因子中整合形成9个新的自变量输入模型，采用试凑法筛选隐含层节点数，用1980-2009年的数据进行网络训练，对2010-2014年麦蚜发生程度进行回测，建立了以Morlet小波函数为传递函数的小波神经网络模型，并与以Sigmoid函数为传递函数的BP神经网络模型进行了比较。【结果】小波和BP神经网络两种模型对训练样本的平均拟合精度均有10年以上超过80%，两者MAPE 值分别为 89.83% 和83.07%，MSE 值分别为0.0578和0.6192。【结论】两个模型都能较好地描述麦蚜发生程度；从预测精度和模型的稳定性来看，小波神经网络好于BP神经网络。

【目的】油茶树害虫的种类较多，其中油茶毒蛾 Euproctis pseudoconspersa 幼虫是危害较大的害虫之一。为完成油茶毒蛾幼虫的自动检测需要对其图像进行分割，油茶毒蛾幼虫图像的分割效果直接影响到图像的自动识别。【方法】本文提出了基于邻域最大差值与区域合并的油茶毒蛾幼虫图像分割算法，该方法主要是对相邻像素RGB的3个分量进行差值运算，最大差值若为0，则进行相邻像素合并得出初始的分割图像，根据合并准则进一步合并，得到最终分割结果。【结果】实验结果表明，该算法可以快速有效地将油茶毒蛾幼虫图像中的背景和虫体分割开来。【结论】使用JSEG分割算法、K均值聚类分割算法、快速几何可变形分割算法和本文算法对油茶毒蛾幼虫图像进行分割，将结果进行对比发现本文方法的分割效果最佳，且处理时间较短。

上颚腺是蜜蜂重要的外分泌腺体，其分泌物是维系蜂群社会性结构的重要物质。蜂王和工蜂上颚腺分泌物合成均以硬脂酸为合成前体，但在脂肪酸的β-氧化过程中表现出级型差异性，导致分泌物组分比例不同。蜂王上颚腺分泌物以9-羰基-2癸烯酸（9-ODA）为主，有吸引工蜂和雄蜂、抑制工蜂卵巢发育等作用；工蜂上颚腺分泌物以10-羟基-2癸烯酸（10-HDA）和10-羟基癸酸（10-HDAA）为主，是蜂王浆的重要组成部分。同时，这种具备典型级型差异的分泌物组成又具有级型间可塑性，在不同蜂种间也存在区别。近年来在转录水平和蛋白水平的一些研究进一步揭示了级型间差异的分子基础。针对蜜蜂上颚腺及其分泌物的研究在蜜蜂生物学、行为学和蜂产品质量控制等方面具有重要的意义。本文通过总结国内外相关研究进展，旨在为上颚腺分泌物的作用机制、生物合成机制等领域的进一步深入研究提供借鉴。

【目的】本研究旨在克隆获得家蚕 Bombyx mori Caspase家族基因，并通过RNAi技术初步分析其在家蚕细胞水平细胞凋亡中的功能。【方法】 用cDNA末端快速扩增方法（rapid amplification of cDNA ends, RACE）克隆家蚕Caspase家族一个新基因，用RNAi和流式细胞术初步分析该基因在家蚕细胞凋亡中的功能。【结果】将克隆获得的家蚕Caspase家族基因命名为 BmCaspase-X，其全长为2 105 bp，开放阅读框长为1 494 bp，编码497 aa，分子量为57.8 kDa，等电点为5.29。BmCaspase-X含有Caspase特有的结构位点。系统进化分析表明，BmCaspase-X与家蚕ICE同其他昆虫Caspase-4同源物先聚在一起，再与具有长前体结构域的昆虫其他因子聚为一类。RNAi初步结果显示该基因干扰后没有出现明显的细胞凋亡。【结论】BmCaspase-X具有典型Caspase特征，属于Caspase家族成员。目前RNAi实验结果表明 BmCaspase-X 未能引起家蚕细胞凋亡的改变。本文为进一步研究该基因的功能奠定基础。

【目的】非编码RNA（non-coding RNA, ncRNA）在家蚕 Bombyx mori 发育过程中具有重要调控作用。本研究旨在探索ncRNA参与家蚕神经系统发育的分子机理。【方法】采用实时荧光定量PCR技术对22个中等长度的ncRNA及3个ncRNA的邻近编码基因在家蚕幼虫神经系统中的表达水平进行检测。【结果】8个ncRNA（包括1个C/D box snoRNA，4个H/ACA box snoRNA和3个不能归类的ncRNA）在家蚕5龄幼虫神经组织和非神经组织中均有表达，且在胸腹神经中的表达量明显高于头部神经中的表达量。其中，snoRNA Bm-51, Bm-18和Bm-86在胸腹神经中的表达量分别是头部神经中的23, 5和4.7倍。进一步研究发现，这3个内含子起源的ncRNA与其宿主基因在家蚕神经系统中的表达趋势一致，宿主基因在胸腹神经中的表达量也明显高于头部神经中的表达量。【结论】本研究筛选到的在家蚕不同神经部位存在差异表达的ncRNA，特别是在胸腹神经中高表达的ncRNA可能协同其邻近编码基因，参与家蚕神经发育或神经活动过程。该结果为研究ncRNA参与家蚕神经系统发育提供了分子依据，为从非编码RNA角度探索鳞翅目害虫防治提供了新的思路。