【目的】本研究旨在系统鉴定和分析西方蜜蜂 Apis mellifera肽聚糖识别蛋白(peptidoglycan recognition protein, PGRP)相关基因及其剪接异构体，探析PGRP基因剪接异构体编码蛋白的理化性质和分子特征，并测定PGRP基因剪接异构体在西方蜜蜂工蜂成虫应答东方蜜蜂微孢子虫 Nosema ceranae侵染中的表达模式，以期为西方蜜蜂PGRP基因剪接异构体的功能研究提供参考和依据。【方法】基于已获得的西方蜜蜂8和11日龄工蜂成虫中肠纳米孔测序数据，利用Blast工具将前期鉴定到的所有全长转录本分别比对到Nr和KEGG数据库，筛选出西方蜜蜂PGRP基因及其剪接异构体，并随机选择PGRP基因的5条剪接异构体通过RT-PCR验证序列的真实性。使用Gffcompare软件将鉴定到的PGRP基因序列比对至西方蜜蜂参考基因组以优化基因结构。采用Astalavista软件鉴定PGRP基因的可变剪接(alternative splicing, AS)事件类型，再通过RT-PCR和Sanger测序验证AS事件。利用相关软件预测和分析PGRP基因剪接异构体编码蛋白的理化性质和分子特征。采用RT-qPCR检测东方蜜蜂微孢子虫接种后西方蜜蜂工蜂成虫中肠中PGRP基因剪接异构体的相对表达量。【结果】共鉴定到西方蜜蜂的4个PGRP相关基因( PGRP-3, PGRP-S2, PGRP-LC和 PGRP-LB)及其19条剪接异构体。通过RT-PCR与Sanger测序证实了PGRP基因5条剪接异构体(rna14029, ONT.6350.8, ONT.6350.10, rna24089和ONT.6350.7)的表达和序列真实性。 PGRP-3(gene10434)的5′和3′端分别延长了8和1 055 bp， PGRP-S2(gene10435)的5′和3′端分别延长了27和234 bp。通过RT-PCR证实了 PGRP-S2的AS事件的真实性。剪接异构体ONT.6350.2编码蛋白的分子式为C ₉₆₆H ₁₅₀₂N ₂₇₂O ₂₇₅S ₇， 分子量约为21 527.63 D， 理论等电点为8.94， 平均亲水性为－0.119，含有信号肽和PGRP结构域，不含跨膜结构域；剪接异构体ONT.6350.6编码蛋白分子式为C ₈₄₁H ₁₃₀₁N ₂₄₃O ₂₄₄S ₅，分子量约为18 860.46 D，理论等电点9.14，平均亲水性为－0.324，不含跨膜结构域和信号肽。西方蜜蜂与东方蜜蜂 A. cerana的PGRP-S2在进化树上聚为一支。相较于未接种东方蜜蜂微孢子虫的对照组，接种东方蜜蜂微孢子虫的西方蜜蜂工蜂成虫中肠中剪接异构体ONT.6350.2的表达量在接种后2和4 d时显著上调，在接种后3 d时极显著上调；剪接异构体ONT.6350.6与ONT.6350.2的表达模式相同；剪接异构体ONT.6350.2和ONT.6350.6在接种东方蜜蜂微孢子虫后1－4 d时总体上均表现为上升表达趋势。【结论】本研究优化了西方蜜蜂参考基因组上已注释的 PGRP-3和 PGRP-S2基因结构；揭示剪接异构体ONT.6350.2的编码蛋白可能是分泌蛋白，而剪接异构体ONT.6350.6的编码蛋白可能是胞内蛋白；西方蜜蜂与东方蜜蜂的 PGRP-S2同源性最高；剪接异构体ONT.6350.2和ONT.6350.6在西方蜜蜂工蜂成虫应答东方蜜蜂微孢子虫侵染中被激活表达。

昆虫共生菌与宿主的互作关系现已成为昆虫学的研究热点之一。昆虫共生菌不仅能够为宿主的生长发育提供营养物质，还可合成很多活性物质参与调控宿主的生态适应性、抗逆性、多样性形成以及生殖、交配行为等。微生物类杀虫剂虽应用广泛，但由于其代谢产物的毒性以及在田间的长期应用，逐渐在害虫中产生了不同程度的抗性，这与害虫体内共生菌密切相关。本文主要阐述了昆虫共生菌介导宿主在抵御逆境胁迫中的抗性形成，重点归纳了昆虫共生菌协助宿主在抵抗白僵菌 Beauveria、绿僵菌 Metarhizium、新蚜虫疠霉 Pandora neoaphidis以及苏云金芽胞杆菌 Bacillus thuringiensis(Bt)等生防真（细）菌侵染中的作用，还深入解析了共生菌对外来病原物侵染宿主的防御机制。现有研究表明，抵御外源病菌侵染的共生菌主要分布于昆虫的表皮、触角腺和肠道等器官或组织中；泛菌 Pantoea、假单胞菌 Pseudomonas、沃尔巴克氏菌 Wolbachia、弗氏柠檬酸杆菌 Citrobacter freundii和杀雄菌 Arsenophonus等共生菌在协助宿主对抗病原侵染中的表现较为突出，对多种昆虫宿主具有保护作用；此外，这些共生菌主要通过与外源菌竞争营养、分泌抗菌物质和调节免疫系统3条途径来提高昆虫对病原菌的抵抗力。本文为深入解析病原微生物-昆虫-共生菌的之间的互作关系提供了新的思路，也为开发基于共生关系调控的害虫生物防治策略提供了重要参考。

摘要: 【目的】明确茶丽纹象甲 Myllocerinus aurolineatus的形态特征及生物学习性，为该虫的精准识别和绿色防控技术研发提供理论依据。【方法】在恒温条件(25±1) ℃下，分别以野外茶园土壤和新鲜茶枝饲养幼虫和成虫，在光学显微镜下观察茶丽纹象甲各发育阶段的主要形态特征；通过田间调查了解幼虫在茶园不同土壤层的迁移行为及化蛹期的土壤分布特性；利用室内观察和行为学实验相结合的手段，记录并描述茶丽纹象甲成虫的求偶交配和趋光行为。【结果】茶丽纹象甲初产卵乳白色，后逐渐变为淡黄色；幼虫无足，体肥多肉，常弯曲呈“C”型；裸蛹乳白色，口器和一对翅芽明显；成熟成虫体灰黑色，鞘翅具黄绿色闪光鳞斑与条纹，且雌性个体体型较雄性个体稍大。茶丽纹象甲以幼虫在距地表20-30 cm深土壤层越冬， 4月中下旬为茶丽纹象甲化蛹高峰期。茶丽纹象甲老熟幼虫多迁移至距地表0-10 cm深土层化蛹，其中距地表0-5 cm土壤层的幼虫和蛹占75.83%。茶丽纹象甲成虫通常在16:00-4:00间求偶交配， 交配方式为背负式， 雌虫在下， 雄虫在上， 交配时长为44~132 min，可细分为交尾前期、交尾、授精和交尾后保护4个阶段。此外，在夜晚，茶丽纹象甲雌雄成虫均具强烈趋光性。【结论】本研究明确了茶丽纹象甲各发育阶段的主要形态特征，解析了该虫幼虫在茶园土壤垂直迁移行为及化蛹高峰期在不同土壤层的垂直分布，初步揭示了成虫的求偶交配和趋光行为，研究结果不仅可为茶丽纹象甲的精准识别提供参考依据，还可以为绿色防控技术的开发提供理论支撑。

【目的】羧酸酯酶（carboxylesterases, CarEs）是昆虫重要的解毒代谢酶之一，可以介导靶标昆虫对多种杀虫剂的代谢抗性。本研究检测了羧酸酯酶对小菜蛾 Plutella xylostella 抗药性的介导功能，旨在阐明羧酸酯酶在小菜蛾代谢解毒中的生理生化和分子机理。【方法】采用点滴法测定氟虫腈对小菜蛾敏感种群和抗氟虫腈种群的毒力，以及羧酸酯酶抑制剂磷酸三苯酯（triphenyl phosphate, TPP）对氟虫腈的增效作用；以LC ₃₀和LC ₅₀浓度的氟虫腈处理抗性小菜蛾，测定药剂处理后CarEs酶活性的变化；利用qRT-PCR技术分析 Pxae22和 Pxae31两个基因在小菜蛾不同发育阶段、组织和种群的表达模式；利用dsRNA干扰 Pxae22和 Pxae31后观察基因的表达变化和小菜蛾3龄幼虫对药剂敏感性的变化。【结果】TPP可以削弱小菜蛾3龄幼虫对氟虫腈的抗性，增效倍数约为6倍；使用较低剂量（LC ₃₀和LC ₅₀）氟虫腈处理小菜蛾3龄幼虫后，处理组CarEs比活力明显高于对照，提示氟虫腈对小菜蛾CarEs活性具有诱导作用。对羧酸酯酶基因 Pxae22和 Pxae31在小菜蛾不同发育阶段、4龄幼虫不同组织和不同种群3龄幼虫中的表达模式分析发现，这两个基因在小菜蛾4龄幼虫中的表达量最高；在4龄幼虫中以中肠组织中的表达量较高，头、表皮、脂肪体中的表达量很低; 抗性种群中的表达量显著高于敏感种群。通过干扰 Pxae22和 Pxae31后的qRT-PCR验证，两个基因的表达量均显著降低，进一步的氟虫腈毒力测定发现，干扰 P xae22和 Pxae31后的小菜蛾3龄幼虫对氟虫腈的敏感性分别增加了1.63倍和1.73倍。【结论】羧酸酯酶在小菜蛾对氟虫腈解毒代谢中具有重要作用； Pxae22和 Pxae31是小菜蛾的两个抗性相关基因，其表达水平的变化直接影响小菜蛾对氟虫腈的敏感性。

本文介绍了近年来蜱的编目和分类及系统发育和演化等方面的研究进展。对软蜱科 (Argasidae) 说明了属的变动；硬蜱科 (Ixodidae) 介绍了璃眼蜱亚科 (Hyalomminae) 和凹沟蜱亚科 (Bothriocrotoninae) 以及相应变动的属 ( 新建的凹沟蜱属 Bothriocroton 和须角蜱属 Cornupalpatum ，合并的牛蜱属 Boophilus 、暗眼蜱属 Anocentor 和盲花蜱属 Aponomma ) 。根据新的分类变更对已知种类进行了分析。至 2006 年，世界已知蜱类有 3 科 18 属 897 种，中国有 2 科 10 属 119 种。阐明了有关蜱类系统发育研究的主要观点，并讨论了其不足和有待深入研究的问题。目前，把形态学和分子生物学数据结合在一起的全证据方法，并结合蜱类和不同宿主之间的关系、动物地理学、古生物学以及比较寄生虫学的资料，成为解决蜱类系统发育问题的有效途径。

【目的】本研究旨在探究光暗循环变化过程中的光周期、日落时间和光照强度等环境因素对梨小食心虫 Grapholita molesta成虫产卵昼夜节律的调控作用，为研发基于光干扰成虫产卵行为的防控方法提供理论依据。【方法】在春、夏和秋季室外自然光照环境下观察梨小食心虫成虫产卵的昼夜节律，室内人工气候箱中比较分析不同光周期(15L∶9D, 14L∶10D和13L∶11D)、日落时间(19:00和16:00)及不同强度(1 000, 500, 100, 50, 10, 5, 1, 0.5和0.1 mW/m ²)弱光间断(1 h)等光暗周期条件下成虫产卵节律的差异。【结果】室外自然光照环境下梨小食心虫成虫产卵表现明显的昼夜节律， 春、 夏和秋季(日落时间分别为18:30, 19:30和18:30)时， 产卵高峰分别出现在18:00-19:00, 19:00-20:00和18:00-19:00，即均为日落前后0.5 h内，该时段光照强度变化剧烈，从10 000 mW/m2迅速降至0.01 mW/m ²。同一日落时间不同光周期(15L∶9D, 14L∶10D和13L∶11D)下梨小食心虫成虫产卵的节律无明显差异，呈相似的“单峰型”曲线。日落时间为19:00和16:00时，梨小食心虫成虫的产卵节律具有明显差异，产卵高峰分别出现在19:00-20:00和16:00-17:00，即日落后1 h，占单日总产卵量的54%以上。日落前的弱光间断环境下梨小食心虫成虫的产卵节律发生了改变，相比于1 000, 500和100 mW/m2弱光间断下的前小后大的“双峰型”曲线， 50, 10, 5, 1, 0.5和0.1 mW/m ²弱光间断下成虫的产卵节律则为前大后小的“双峰型”曲线，产卵高峰出现均在16:00-17:00(即弱光间断期)，产卵百分数高达40%以上，其次为19:00-20:00。不同强度的弱光间断下梨小食心虫的单日单雌产卵量具有显著差异，0.5和0.1 mW/m ²弱光间断下单日单雌产卵量最高(分别为33.05和31.00粒)。【结论】光暗周期和光照强度可以影响梨小食心虫成虫的产卵昼夜节律，其产卵活动主要发生在低于50 mW/m ²弱光或黑暗期。

    【目的】环状 RNA(circRNA) 在可变剪接、转录调控和来源基因的表达调控等方面具有重要功能。本研究旨在分析意大利蜜蜂 Apis mellifera ligustica 工蜂中肠 circRNA 的数量、种类、结构特征和作用，并通过构建和分析 circRNA 的调控网络探索 circRNA 的调控功能。【方法】在实验室条件下人工饲养意大利蜜蜂工蜂，利用 circRNA - seq 技术对意大利蜜蜂 7 和 10 日龄成年工蜂中肠样品进行深度测序。利用 find_circ 软件从质控后的数据中预测 circRNA 。通过 BLAST 比对 GO 和 KEGG 数据库，对 circRNA 的来源基因进行功能和代谢通路注释。利用 TargetFinder 软件预测 circRNA 靶向结合的 miRNA 及 miRNA 靶向结合的 mRNA ，通过 Cytoscape v.3.2.1 软件对 circRNA - miRNA 和 circRNA - miRNA - mRNA 调控网络进行构建及可视化。通过设计背靠背引物和线性扩增引物 RT - PCR 对预测出的 circRNA 进行验证。【结果】意大利蜜蜂工蜂中肠样品的测序平均得到 136 463 071 条 clean reads ，去除 rRNA 后各样品的 anchor reads 均在 136 779 122 条及以上。共预测出 10 833 个 circRNA ，长度主要介于 15~1 000 nt ；上述 circRNA 的类型丰富，其中已注释的外显子 circRNA 数量最多，分布在西方蜜蜂 1 号染色体的 circRNA 数量最多，其次为 8 号染色体。 CircRNA 的来源基因可注释到包括结合、细胞进程和细胞在内的 45 个 GO 条目，以及包括内吞作用、内质网蛋白加工及核糖体在内的 121 条 KEGG 代谢通路，表明 circRNA 在意大利蜜蜂工蜂中肠的生长、发育、新陈代谢和细胞生命活动等生物学过程中发挥重要作用。进一步构建 circRNA - miRNA 和 circRNA - miRNA - mRNA 调控网络，分析结果显示部分 circRNA 可能作为竞争性内源 RNA 吸附结合 microRNA ，从而调控基因的表达水平。最后，对随机选择的 3 个 circRNA 的 RT - PCR 结果验证了其真实存在。【结论】本研究对意大利蜜蜂工蜂中肠中的 circRNA 进行预测、分析及鉴定。研究结果提供了中肠 circRNA 的数量、种类、结构特征、作用和调控网络的信息，揭示了 circRNA 可能通过作用于来源基因和作为竞争性内源 RNA 在意大利蜜蜂工蜂中肠的生长发育和免疫防御中发挥作用，为深入研究 circRNA 在意大利蜜蜂中肠发育及胁迫响应过程中的功能奠定了基础。

【目的】探索斜纹夜蛾 Spodoptera litura 触角叶结构及其神经元对植物气味和性信息素的神经识别机制。【方法】利用共聚焦激光技术扫描斜纹夜蛾成虫触角叶结构，同时采用多通道电生理技术 (multi-unit recording, MR) 记录斜纹夜蛾触角叶对6种寄主植物气味化合物（苯甲醛、苯甲醇、苯乙醛、水杨醛、乙酸叶醇酯和己烯醛）及性信息素顺9反11十四碳二烯乙酸酯和顺9反12十四碳二烯乙酸酯的反应；并在风洞中测定分析斜纹夜蛾对上述化合物的定向行为反应。【结果】共聚焦激光扫描结果显示，雄性和雌性斜纹夜蛾触角叶内分别密集地分布有67和66个神经纤维球；而雌性斜纹夜蛾触角叶内的纤维球总体积和平均体积都高于雄性。负责识别和追踪性信息素的扩大型纤维球复合体（macroglomerular complex, MGC）只在雄性斜纹夜蛾触角叶内发现。MR试验结果显示斜纹夜蛾触角叶内神经元具有3种自发放电模式：稀疏放电（不规则的放电频率）、温和放电（宽而慢的放电频率）和密集放电（暴发性的放电频率）。同时，斜纹夜蛾触角叶神经元对所有刺激的气味表现出3种反应类型：兴奋性、抑制性和无反应。神经元对气味的兴奋性和抑制性反应以及无反应取决于刺激化合物的结构和浓度。雌虫的触角叶神经元对性信息素和单一的植物气味表现出很小的反应，而雄虫对两种性信息素以及苯甲醛、苯甲醇、苯乙醛和水杨醛具有很强的兴奋性反应。斜纹夜蛾风洞试验也显示绝大部分的斜纹夜蛾雄虫都选择停留在性信息素和芳香族化合物上，这与MR的结果一致。【结论】神经元的反应强度和刺激化合物浓度之间的关系根据不同的神经元和刺激化合物而有所不同。在测试的浓度范围内，雄虫触角叶神经元对性信息素的反应强度随着浓度的增加而加强，但是除乙酸叶醇酯外，对其他植物气味的反应强度在测试的浓度范围内没有显著的变化。

【目的】杜仲梦尼夜蛾 Orthosia songi是危害杜仲 Eucommia ulmoides叶片的单食性害虫。本研究旨在探究不同龄期杜仲梦尼夜蛾幼虫肠道菌群的特征。【方法】使用Illumina HiSeq高通量测序技术调查杜仲原产地陕西省略阳和河南省灵宝杜仲梦尼夜蛾1, 3和6龄幼虫肠道细菌组成和多样性。【结果】两个地区杜仲梦尼夜蛾幼虫肠道细菌群落在门水平均以假单胞菌门(Pseudomonadota)、蓝菌门(Cyanobacteriota)、放线菌门(Actinomycetota)、芽孢菌门(Bacillota)和拟杆菌门(Bacteroidota)为优势菌门，各个菌门的丰度在不同龄期样品间不同，并且随着杜仲梦尼夜蛾幼虫龄期的增大假单胞菌门的丰度逐渐减少，芽孢菌门的丰度逐渐增大。在属水平，不动杆菌属 Acinetobacter为优势菌群，其丰度随着杜仲梦尼夜蛾幼虫龄期的增大而减小。多样性分析结果显示,杜仲梦尼夜蛾不同龄期幼虫样品之间肠道细菌α多样性指数（Shannon指数、 Simpson指数、 ACE指数和Chao指数）差异不显著，β多样性存在显著差异。【结论】本研究结果说明陕西省略阳和河南省灵宝杜仲梦尼夜蛾幼虫肠道细菌菌群组成相似，但不同龄期幼虫之间肠道细菌菌群组成存在显著差异，提示杜仲梦尼夜蛾幼虫肠道微生物种群受到该虫生长发育阶段的影响。

【目的】昆虫表皮蛋白在昆虫的生长发育、抑制水分蒸发和抵御其他外界不良环境等方面起到重要的作用。通过转录组水平上葱蝇 Delia antiqua 表皮蛋白基因家族的鉴定及部分基因在非滞育和冬滞育条件下的表达规律分析，为进一步研究葱蝇表皮蛋白在滞育期的抗逆功能奠定基础。【方法】基于转录组数据，通过生物信息学方法对葱蝇表皮蛋白基因进行鉴定分析，系统进化和保守结构域分析并采用实时荧光定量PCR法比较分析了12个基因在葱蝇非滞育和冬滞育不同发育时期的表达变化。【结果】 在葱蝇中鉴定出81个表皮蛋白基因，分别属于RR (71个基因)、CPAP (5个基因)和CPLC (5个基因)亚家族，其编码的蛋白质含有92~495个氨基酸, 分子量约为 8.692~52.2 kD，等电点为3.90~9.93。亚细胞定位预测结果显示67个全长表皮蛋白均为外分泌型。12个葱蝇表皮基因在非滞育和冬滞育过程中有明显不同的表达规律。【结论】葱蝇表皮蛋白基因RR-2型的保守基序中发生了基因突变，引起关键氨基酸的替换，这可能暗示它们在非滞育和滞育不同条件下，不同发育阶段中蛹皮结构重建和某些器官的发生方面发挥不同作用。该研究结果为进一步阐明葱蝇滞育蛹皮结构及抗逆功能的研究提供了重要理论基础。

【目的】小麦穗期是产量形成的关键时期，也是小麦蚜虫发生和防控的重要时期，明确其在小麦主产区的空间分布与种间竞争关系，为制定小麦蚜虫区域性防控策略、开展精准防控具有重要的指导意义。【方法】2021年4月至2023年6月，在黄淮海麦区选择17个样点，采用5点取样调查麦长管蚜 Sitobion avenae、禾谷缢管蚜 Rhopalosiphum padi、麦无网长管蚜 Metopolophium dirhodum和麦二叉蚜 Schizaphis graminum(分别标注为sp1, sp2, sp3和sp4)的个体数及其在麦株上的垂直分布，并利用生态位理论计算其生态位宽度( B_i)、生态位重叠度( L)、种间竞争系数( α)，分析其在不同麦区的优势种、生态位及种间竞争关系。【结果】在黄淮海麦区4种蚜虫优势种的空间分布存在很大的差异。其中，湖北襄阳，江苏南京及河南信阳、驻马店和周口以禾谷缢管蚜为优势种，占蚜虫总量的57.10%以上;在河南洛阳和山西临汾以麦长管蚜为优势种，占比在81.98%以上。在河南濮阳，山东聊城、滨州，河北邯郸、沧州、保定、廊坊和北京延庆， 4种蚜虫均有发生，麦长管蚜为优势种，占比在47.17%~67.63%，麦无网长管蚜占比20%左右，麦二叉蚜零星发生，占比在2.19%以下。麦长管蚜主要分布在小麦穗部、旗叶，两者占比在70%以上，禾谷缢管蚜在麦株上分布较为均匀，以穗部相对集中，纬度越低穗部占比越高，麦无网长管蚜主要分布在小麦中上部叶片，麦二叉蚜主要分布在小麦中下部叶片。4种蚜虫以禾谷缢管蚜生态位最宽，平均生态位宽度为0.5003；其次依次为麦长管蚜、麦无网长管蚜和麦二叉蚜，平均生态位宽度分别为0.2677, 0.2531和0.2064。4种蚜虫的平均种间生态位重叠度依次为： L _sp1-2(2.0324)> L _sp3-4(1.9238)> L _sp2-3(1.2898)> L _sp1-3(1.2889)> L _sp2-4(1.2585)> L _sp1-4(0.7606)； 4种小麦蚜虫的种间竞争系数( α)与生态位重叠度具有一致性，平均种间竞争系数依次为： α _sp1-2(0.7686)> α _sp3-4(0.6948)> α _sp1-3(0.5899)> α _sp2-3(0.4152)> α _sp2-4(0.3841)> α _sp1-4(0.2286)。【结论】麦长管蚜和禾谷缢管蚜为黄淮海麦区穗期的优势种，禾谷缢管蚜在低纬度地区占优，并在穗部为害加重，麦无网长管蚜在高纬度地区优势度仅次于麦长管蚜，麦二叉蚜占比最低；4种蚜虫以禾谷缢管蚜的生态位最宽，与麦长管蚜生态位重叠度和竞争系数较高。因此建议，在黄淮海偏南麦区重点加强麦长管蚜、禾谷缢管蚜的防控，偏北麦区重点加强麦长管蚜、麦无网长管蚜的防控。

丝带凤蝶 Sericinus montelus是一种有开发价值的观赏昆虫，以蛹滞育越冬，成虫存在多型现象。本研究从体色、个体大小和蛹腹部刺突长度等方面比较了丝带凤蝶滞育与非滞育蛹及其成虫的形态差异。与非滞育蛹相比，滞育蛹体色较深，触角末端的淡黄色与体色差异明显，3日龄滞育蛹腹部第9节刺突长度是3日龄非滞育蛹的4倍左右，这些差异可以用于该虫蛹滞育早期判别。滞育蛹羽化成虫的翅展和尾突长度显著小于非滞育蛹羽化成虫，且腹部及翅面斑纹也存在明显的差异，这些差异与丝带凤蝶春型、夏型成虫的描述相一致，表明丝带凤蝶成虫季节多型是与滞育相关联的。

本文综述了重金属对昆虫生态生理学研究的最新进展，指出了研究的不足和应着重关注的研究方向。短期重金属暴露对昆虫有急性毒性，而长期暴露有引起昆虫对重金属污染产生适应性进化的风险。重金属对昆虫的毒性依重金属浓度、暴露时间和染毒方式而异，也会通过食物链传递和积累而影响昆虫及其天敌之间的关系。重金属对昆虫的生理毒性包括降低血细胞或血淋巴内的能量物质、引起氧化还原平衡失调、抑制细胞免疫和体液免疫、破坏昆虫细胞或组织的完整性。昆虫对重金属胁迫的生理和生态适应包括对重金属的储存和排出，解毒相关蛋白的诱导，甚至重金属耐性的进化。

【目的】黑腹果蝇 Drosophila melanogaster 雌激素相关受体（estrogen-related receptor, ERR）通过调节糖酵解过程进而控制果蝇的能量代谢。本研究在克隆家蚕 Bombyx mori  ERR 基因 ( BmERR) 的基础上，对其分子特性和系统演化进行生物信息学分析, 并检测该基因在家蚕生殖腺中的表达，为进一步研究ERR功能奠定基础。【方法】采用PCR技术克隆 BmERR 基因的全长cDNA序列，进行生物信息学分析；利用半定量RT-PCR检测该基因在停食后家蚕幼虫生殖腺中的表达情况。【结果】 BmERR 基因全长cDNA序列为1 296 bp，编码431个氨基酸残基；具有ERR蛋白家族典型的结构特征；系统进化分析显示BmERR与其他昆虫ERR氨基酸序列一致性较高；半定量 RT-PCR 检测表明， BmERR 在家蚕上簇到化蛾期间的精巢和卵巢中均有表达，表达具有时期特异性，化蛹第1天达到表达高峰。【结论】本研究首次从鳞翅目昆虫中克隆获得ERR cDNA序列。ERR基因在家蚕生殖腺中表达量无明显性别差异，但具有发育时期特异性。

【目的】本研究旨在通过解析意大利蜜蜂 Apis mellifera ligustica lncRNA15837的调控方式和作用，并检测lncRNA15837在工蜂不同发育阶段和成虫不同组织及幼虫应答蜜蜂球囊菌 Ascosphaera apis侵染中的表达模式，为深入探究lncRNA15837的调控功能与机制提供参考和依据。【方法】基于已获得的意大利蜜蜂7和10日龄工蜂成虫中肠高质量转录组数据，利用Miranda, RNAhybrid和TargetScan软件预测lncRNA15837靶向的miRNA及miRNA靶向的mRNA，再通过Cytoscape v3.7.1软件构建并可视化竞争性内源RNA (competing endogenous RNA, ceRNA)调控网络。使用Blast工具将靶mRNA比对至GO和KEGG数据库以获得相应的功能和通路注释。通过RT-PCR验证lncRNA15837在刚出房工蜂成虫不同组织(触角、咽下腺、脑、表皮、中肠、脂肪体和毒腺)中的表达。利用RT-qPCR检测lncRNA15837在工蜂的不同发育阶段(卵、3日龄幼虫、 1和2日龄预蛹、 4日龄蛹及1, 2, 6, 12, 15和18日龄工蜂成虫)、刚出房工蜂成虫不同组织(触角、咽下腺、脑、表皮、中肠、脂肪体和毒腺)和3日龄幼虫感染蜜蜂球囊菌后4, 5和6日龄幼虫肠道中的表达量。【结果】LncRNA15837可靶向ame-miR-21-x和ame-miR-0046-3p等29个miRNA，进而靶向1 559条mRNA，形成1个复杂的ceRNA网络；上述靶mRNA可注释到436个GO条目，其中114条靶mRNA涉及139个分子功能相关条目，115条靶mRNA涉及257个生物学进程相关条目，67条靶mRNA涉及40个细胞组分相关条目；可注释到224条KEGG通路，其中28条靶mRNA注释到内吞、吞噬细胞和溶酶体等细胞免疫通路，以及157条靶mRNA注释到JAK-STAT, Toll和Imd, NF-kappa B和Toll样受体信号通路等体液免疫通路； lncRNA15837在工蜂卵、幼虫、预蛹、蛹和成虫中差异表达，在1日龄预蛹中的表达量最低，而在3日龄幼虫中的表达量最高；lncRNA15837在刚出房工蜂成虫的触角、毒腺、脑、中肠、咽下腺、脂肪体和表皮中均有表达但表达量存在差异，在脂肪体中的表达量最低，而在毒腺中的表达量最高；相较于未接种对照组，lncRNA15837的表达量在蜜蜂球囊菌接种组4日龄幼虫肠道中表达量上调，在5和6日龄幼虫肠道中显著上调。【结论】意大利蜜蜂lncRNA15837通过ceRNA网络潜在调控胞吞作用、吞噬细胞和溶酶体等细胞免疫通路和JAK-STAT、Toll和Imd、NF-kappa B和Toll样受体信号通路等体液免疫通路；lncRNA15837在工蜂的3日龄幼虫和工蜂成虫毒腺中特异性高表达；工蜂幼虫肠道中lncRNA15837的表达被蜜蜂球囊菌侵染所激活，提示lncRNA15837是意大利蜜蜂幼虫应答蜜蜂球囊菌侵染的潜在调控因子。

泛素-蛋白酶体途径(ubiquitin-proteasome pathway)是具有高度选择性的蛋白质降解途径，该途径对细胞内蛋白的选择性降解起着重要作用。本研究根据 GenBank 已登录的真核生物泛素（ubiquitin）编码框的氨基酸序列，设计一对简并引物，RT-PCR 克隆了家蝇 Musca domestica 泛素基因的编码区 cDNA 序列，并进行了测序。序列分析表明，该编码区的长度为 228 bp，编码 76 个氨基酸，命名为 Mdubi ，GenBank 登录号为 DQ115796。同源性比较发现，Mdubi 氨基酸序列与其他真核生物泛素编码框同源性可达 94% 以上。RT-PCR 检测表明，Mdubi 在家蝇不同组织中均高效表达，且不受大肠杆菌 Escherichia coli 刺激的影响，是遍在性表达。为进一步研究 Mdubi 的结构和功能，将 Mdubi 克隆到原核表达载体 pQE30 上，构建重组质粒 pQE30-UBI，转化大肠杆菌 M15 感受态细胞，在 IPTG 诱导下进行了高效表达，SDS-PAGE 检测表明 Mdubi 在大肠杆菌中可表达相对分子质量为 9.6 kD 的可溶性融合蛋白；Western blot 分析表明表达产物能与 Ni-NTA 鏊合物特异性的结合，表明表达的 Mdubi 为 N 端带有 6His 标签的融合蛋白。利用 Ni²⁺-NTA 亲和柱一步纯化了 Mdubi，以该融合蛋白免疫新西兰大白兔制备了抗 Mdubi 血清。本研究成功克隆了家蝇泛素的编码序列，并在原核细胞中得到了表达，为进一步研究泛素在家蝇体内的作用机制奠定了基础。

【目的】辣椒实蝇 Bactrocera latifrons (Hendel)为我国重要的检疫性有害生物，其寄主范围广泛，危害严重。由于传统鉴定方法受到饲养周期、饲养条件、虫态等因素的限制，使得果蔬进出口贸易通关速度、疫情快速鉴定受到较大的影响，因此迫切需要开发关于实蝇的快速鉴定识别的技术。【方法】本研究基于mtDNA COI序列设计了一对能够准确鉴定辣椒实蝇的种特异性引物FL680和RL1057，选用辣椒实蝇作为阳性对照，选用番石榴实蝇 B. correcta (Bezzi)、桔小实蝇 B. dorsalis (Hendel)和颜带实蝇 B. cilifer (Hendel)等20种实蝇作为阴性对照，进行PCR扩增并将PCR产物进行电泳检测。【结果】仅目标种辣椒实蝇能够扩增出清晰且单一的约378 bp的条带，其余实蝇种类均未出现条带。将本实验建立的种特异性PCR（SS-PCR）鉴定方法应用于实际检疫工作中并得到了验证，表明该方法具有强的种特异性。【结论】本文提出辣椒实蝇快速鉴定识别技术可应用于实蝇的疫情监测和口岸的检疫检测工作。

昆虫进化形成了内在的生物钟机制以协调行为、生理及代谢节律与外部环境信号同步，从而更有效地利用资源并获得适应性优势。行为、生理及代谢昼夜调控的协调对于昆虫有效应对可预见的生理上的挑战至关重要。生化过程和代谢变化与外部环境的昼夜节律同步性受基因表达的控制，钟基因在昆虫的重要生理过程如中枢及外围生物钟机制、光周期信号传导、光周期介导的外围组织调控、代谢以及免疫中发挥着重要作用。根据信号转导过程中的作用,昆虫钟基因分为3类——信号输入基因、信号震荡起搏器和信号输出基因，它们通过相互作用形成了复杂的转录翻译反馈回路并参与调控昆虫昼夜节律和光周期事件。本文针对昆虫钟基因的鉴定、分类和功能，作用分子机制以及研究方法和挑战等方面作了总结，并展望了昆虫钟基因未来的研究方向，这将为昆虫钟基因的进一步功能研究及开发利用提供信息参考。

细胞自噬（autophagy）是从酵母到哺乳动物都高度保守的、降解胞内物质的过程，受到能量和营养等信号的严格调控。已有研究表明，哺乳动物中高脂饮食可诱导肝脏内自噬的发生，某些自噬相关基因（autophagy related genes， Atg）敲除后阻碍肝脏细胞的脂代谢，并导致脂滴堆积，形成脂肪肝。昆虫中的现有研究也暗示细胞自噬与昆虫脂肪体的代谢密切相关。目前为止，细胞自噬调控脂代谢的研究还有许多不明之处。除已报道的ATG蛋白外是否其他ATG蛋白也参与脂代谢尚无报道；已知的参与脂代谢的ATG蛋白分子作用模式不清楚；溶酶体中哪些酶参与了自噬介导的脂代谢也未被证实。ATG蛋白差异参与真菌和高等动物的脂滴形成与脂肪降解，但具体机制不详，昆虫的进化地位介于高等动物和真菌之间，昆虫中开展自噬介导脂代谢的研究对于解析高等动物的疾病诸如肥胖症、高血脂症，及以昆虫脂肪体代谢发育为调控靶标的工作具有重要意义。为此，本文对主要在哺乳动物中获得的自噬介导脂代谢的研究进展进行综述，并对脂代谢的一些研究方法和检测技术进行了总结，以期为昆虫乃至其他生物的相关研究提供借鉴与参考。

摘要: 【目的】梨小食心虫 Grapholita molesta是一种世界性的蛀果害虫，对果业生产构成严重威胁。性信息素迷向技术作为一种特异性强、高效、无毒和生态效益高的防治手段，其效果主要取决于性信息素的剂量和迷向丝的悬挂密度。本研究旨在探索性信息素迷向技术的准确使用方法，为有效提升梨小食心虫的绿色防控水平、实现我国果业的安全生产提供数据支撑。【方法】本研究将含有4种成分(顺-8-十二碳烯醇醋酸酯、反-8-十二碳烯醇醋酸酯、顺-8-十二碳烯醇和十二碳-1-醇)的性信息素，设置5种剂量(0.0131, 0.131, 1.31, 13.1 和131 mg)处理梨小食心虫成虫，测试未交配和交配1次雄成虫对不同剂量性信息素的触角电位(electroantennogram, EAG)反应，通过室内笼罩试验测定雌、雄成虫的交配对数、交配持续时间、交配日龄和单雌产卵量以及卵的孵化量与孵化率的变化特点，并在田间验证性信息素对梨小食心虫的迷向率和蛀果防效。【结果】EAG反应结果表明，随着性信息素剂量增加，未交配雄成虫的EAG反应增强，在剂量为13.1 mg时达到最强；而性信息素剂量对交配1次雄成虫的EAG反应无显著影响。在笼罩试验中，性信息素剂量为1.31~131 mg时，雌、雄成虫的交配对数较对照（正己烷）显著降低。尽管性信息素处理组成虫交配持续时间、交配日龄以及单雌产卵量与对照组无显著差异，但5种剂量性信息素均显著降低了卵孵化量和孵化率。不同剂量性信息素直接对孕卵雌成虫进行刺激时，与对照相比，单雌产卵量无显著变化，但0.131~131 mg性信息素显著降低了卵的孵化量和孵化率。剂量为131 mg的性信息素对梨小食心虫的田间迷向率和蛀果防效显著高于13.1 mg剂量性信息素，悬挂60和90根/667 m ²迷向丝对梨小食心虫的迷向率和蛀果防效间无显著差异。【结论】综合考虑防治效果和经济成本，适用于梨小食心虫田间迷向技术的性信息素剂量是131 mg，每667 m ²悬挂60根迷向丝。本研究结果为精确使用迷向技术防控梨小食心虫提供了理论基础。

作者阐述自1896年中国引进西方蜜蜂 Apis mellifera L.的优良品种如意大利蜂 Apis mellifera ligustica Spinola和喀尼阿兰蜂 Apis mellifera Carnica Pollmann以来，使当地的东方蜜蜂 Apis cerana F.受到严重危害，其分布区域缩小75%以上，种群数量减少80%以上。使山林植物授粉总量减少，导致植物多样性减少。文中提出: 建立自然保护区保存本地蜜蜂遗传特性，和采用基因转移等技术，培育具有西方蜜蜂优良生产性能的中蜂新品种，逐步恢复中蜂的种群数量。

 【目的】食卵自相残杀现象常见于瓢虫中，业已明确取食同胞卵对于初孵瓢虫至关重要，但取食非同胞卵的营养价值是否高于蚜虫仍存争议。本研究旨在明确异色瓢虫 Harmonia axyridis在幼虫期除取食蚜虫外兼捕食非同胞卵是否影响其雌成虫的生殖表现。【方法】在异色瓢虫幼虫期设置3个饲喂处理，即仅饲喂禾谷缢管蚜 Rhopalosiphum padi（对照）、除饲喂蚜虫外还分别给各龄幼虫饲喂少量非同胞卵（分散食卵）以及除饲喂蚜虫外仅给高龄幼虫饲喂较多非同胞卵（集中食卵）等，观察雌成虫体型大小、产卵前期、连续10 d的逐日产卵量和卵孵化率等形态和生殖特性。【结果】饲喂处理对瓢虫雌成虫体型大小无显著影响，对照、分散食卵和集中食卵3种饲喂处理下的雌成虫身体体积分别为92.30, 89.73和93.98 mm ³；饲喂处理对雌成虫产卵前期也无显著影响，3种饲喂处理下雌成虫产卵前期分别为7.50,7.74和7.70 d；但饲喂处理对雌虫生殖力具有显著影响，分散食卵处理与对照无显著差异，羽化后10 d分散食卵和对照下累计产卵量分别为185和205粒，但集中食卵（88粒）比对照或分散食卵的产卵量显著降低；饲喂处理对卵孵化率无显著影响，对照、分散食卵和集中食卵3种饲喂处理下的卵孵化率分别为63.10%, 72.58%和66.61%。【结论】结果说明，异色瓢虫各龄幼虫偶尔取食非同胞卵不影响其成虫的生长发育和生殖，但高龄幼虫捕食较多非同胞卵可降低其雌成虫的生殖力。

【目的】本研究旨在明确韭菜养根期干旱处理对韭菜迟眼蕈蚊Bradysia odoriphaga种群动态的影响。【方法】通过控制浇水调控土壤含水量，调查15, 20, 25和30 d干旱胁迫下砂土和壤土栽培的韭菜中韭菜迟眼蕈蚊F1代成虫的发生量，并通过两性生命表方法分析干旱胁迫30 d对韭菜迟眼蕈蚊F₁代种群参数的影响。【结果】研究结果表明，不论砂土还是壤土，干旱胁迫均抑制了韭菜迟眼蕈蚊F1代成虫的发生: 随干旱胁迫时间的增加，韭菜迟眼蕈蚊成虫的数量显著下降；其中干旱胁迫30 d时，韭菜迟眼蕈蚊成虫的发生量最低，壤土或砂土中的F₁代成虫羽化量仅为1头，与其他干旱胁迫时间(15, 20和25 d)相比发生量差异显著。经历30 d干旱胁迫的韭菜迟眼蕈蚊F₁代1, 2, 3和4龄幼虫发育历期、未成熟期、雌成虫产卵前期和总产卵前期较对照组显著延长，分别延长0.82, 253, 2.82, 0.68, 6.32, 1.36和8.69 d，而净生殖率(R₀)、内禀增长率(r_m)以及周限增长率(λ)则显著低于对照组，分别较对照组下降32.38%, 37.50%和5.13%。【结论】在韭菜养根期进行干旱处理可有效抑制韭菜迟眼蕈蚊的发生。

【目的】本研究致力于构建一种能够在家蚕 Bombyx mori 细胞水平稳定表达的简单基础启动子，从而更准确地反映单一转录调控元件对基因启动子活性的影响，为研究家蚕乃至其他昆虫的基因转录调控奠定基础。【方法】本研究在本课题组已报道的能在家蚕细胞中稳定表达且基本不含上游转录调控元件的 BmVgP78M 启动子的基础上，通过 PCR 技术在其上游添加一定长度的间隔序列和能够应答 20 - 羟基蜕皮激 素 (20E) 且增强启动子活性的 BrC - Z2 转录因子结合基序 (BrC - Z2 element, BrC - Z2E) ；通过基因克隆技术构建细胞转染载体；通过细胞转染技术和双荧光素酶报告基因系统检测启动子活性的变化。【结果】通过在 BmVgP78M 启动子上游添加 28 bp 间隔序列，成功构建了一个简单基础启动子，命名为 VgP78ML ，并证明其为可用于研究目标转录调控元件的简单基础启动子。经实验验证表明，该简单基础启动子不仅可以在家蚕细胞中稳定表达，且其本身活性不受 20E 及转录因子 BrC - Z2 的影响；当该启动子上游连接 BrC - Z2E 时，可以显著地应答 20E 及 BrC - Z2 转录因子，从而调控报告基因的表达。【结论】 VgP78ML 能够作为简单基础启动子应用于细胞水平对家蚕基因转录调控进行研究。同时 , 其构建方法也为其他物种构建研究转录调控的简单基础启动子提供了参考。

【目的】本研究旨在明确我国东北地区灰飞虱 Laodelphax striatellus种群遗传变异及种群遗传结构，阐明种群间遗传分化与基因流。【方法】利用9对微卫星引物对采自我国东北地区15个地理种群的375头灰飞虱样品进行测序与分析；利用GeneAlex6.51, GENEPOP4.0.9和STRUCTURE 2.3.4等软件分析灰飞虱地理种群间的遗传多样性、遗传分化、基因流及种群遗传结构。【结果】在所分析的375头灰飞虱个体中，各位点平均有效等位基因数 Na=6.898；总体上，灰飞虱不同地理种群遗传多样性较高(平均观测杂合度 Ho=0.548；平均期望杂合度 He=0.582)，各种群间基因流较低( Nm=0.660)。UPGMA聚类树、PCoA及STRCTURE分析结果表明，东北地区灰飞虱种群分为两分支：吉林(JL)和沈阳(SY2012，SY2013和SY2014)种群聚为一支；其余种群聚为一支。AMOVA分析结果表明，灰飞虱遗传变异主要来自种群内(87%)，种群间变异水平较低(13%)。【结论】中国东北地区灰飞虱遗传多样性较高，不同地理种群存在一定程度的遗传分化，且基因交流较低，存在一定的种群遗传结构。

评述了天牛成虫信息素及嗅觉感受机制的研究进展。天牛雌、雄成虫均可释放性信息素，迄今已对31种天牛的性信息素进行了研究，其中完成组分鉴定的有13种。天牛性信息素包括长距离、短距离和接触性信息素3种类型。天牛性信息素存在变异现象，同种天牛分布在不同地区，其性信息素组分之间存在差异。触角是天牛感受性信息素的主要器官，也是判别成虫通讯方式的形态指标，性信息素发达的种类其触角常具显著的性二型现象。天牛利用寄主信息素（如萜烯类、醇类和酯类）寻找寄主。性信息素和寄主信息素在林间复合使用可提高诱捕率。天牛信息素还包括异种信息素、忌避信息素和产卵干扰素，能够提高天牛寄主定位效率。天牛触角嗅觉感受的神经细胞（RNs）有3类，气味信息经神经细胞群传输至中枢神经系统，神经信号按标记路线或交叉纤维样式输导。天牛气味结合蛋白（OBP）方面的研究尚未见报道。

【目的】分析德国小蠊 Blattella germanica 全基因组中微卫星的数量和分布规律，并对外显子中含有微卫星的基因进行功能注释。【方法】使用微卫星搜索软件查找德国小蠊基因组中微卫星的数量、重复次数以及所有微卫星的位置信息，编写Python脚本对微卫星进行定位，并通过Blast2Go和KASS程序对外显子中含有微卫星的基因进行功能注释。【结果】共找到1~6碱基重复类型的微卫星序列604 386个，总长度15 301 255 bp，约占全基因组序列（约2.04 Gb）的0.75%，分布频率为1/3.37 kb，微卫星序列的长度主要在12~60个碱基长度范围内。不同类型的微卫星中，三碱基（226 876）重复类型微卫星数量最多，占微卫星总数的37.54%；四碱基（150 355）重复类型次之，占微卫星总数的24.88%；其余依次是单碱基（141 167）、二碱基（60 877）、五碱基（21 570）和六碱基（3 541）重复类型，分别占微卫星总数的23.36%, 10.07%, 3.57%和0.59%。出现最多的重复拷贝类别有：ATT, AAT, A, T, AAAT, ATTT和AT，共411 789个微卫星，占微卫星总数的68.13%，这7种类别的微卫星数量均大于30 000个。共有2 372个微卫星在外显子上，它们分别位于1 481个基因上。GO功能注释结果表明，其中434条归类于细胞组分(cellular component)，402条归类于分子功能(molecular function)，660条归类于生物学过程(biological process)。KEGG通路分析结果表明，与新陈代谢相关的基因最多（380个），其次是与机体系统相关的（276个），与遗传信息进程相关的基因最少（92个）。【结论】本研究为进一步系统深入分析德国小蠊微卫星功能及微卫星分子标记筛选打下了基础。

 在过去的几十年中，昆虫不育技术(sterile insect technique, SIT)已被用于防治农业害虫和人类健康相关的病媒害虫。相较于传统的农药控制策略，昆虫不育技术具有物种特异性和环境友好型等特点。通过释放不育雄虫的昆虫不育技术的主要障碍是在大规模饲养阶段将雄性与雌性分离，从而提高这些防治方法的成本效率，并防止释放携带和传播疾病的雌性群体。目前大多数针对双翅目害虫的遗传防治策略没有进行性别分离，少数害虫性别分离方法是基于蛹的大小或者雌雄蛹羽化时间差异进行人工识别和机械识别分离。双翅目昆虫性别决定及分化分子机制多种多样，其性别决定主要信号差异巨大，其多种性别决定基因已用于性别分离系统的开发。性比失衡性别分离策略通过破坏性别决定途径关键基因的表达获得雄性偏向后代，雌性条件性致死分离策略利用性别决定关键基因的雌雄选择性剪接差异实现性别分离，这两种性别分离策略目前正在害虫不育防治中接受大规模饲养应用评估，而基于双翅目昆虫雌雄性二态和基因标记发展的可视化性别分离策略也已成功实现多种害虫的性别分离。我们对性比失衡分离策略、雌性条件性致死分离策略和可视化性别分离策略在双翅目害虫中的研究进展进行了综述，重点评估了这些方法在雄虫大规模饲养和释放的应用潜力，以期在更完善的性别分离技术支持下为害虫防治研究取得更多突破性进展。

【目的】明确白蛾周氏啮小蜂 Chouioia cunea 毒液对其寄主美国白蛾 Hyphantria cunea 蛹细胞免疫的影响。【方法】采用Na ₂-EDTA分离美国白蛾蛹颗粒细胞，尼龙毛法分离浆血细胞，再利用细胞离体培养法，测评了白蛾周氏啮小蜂毒液对寄主美国白蛾两种血细胞包囊作用和吞噬作用的影响。【结果】美国白蛾颗粒细胞的包囊指数强于浆血细胞。白蛾周氏啮小蜂毒液对颗粒细胞和浆血细胞的包囊指数均有明显的抑制作用，毒液浓度越大，抑制作用越强，两种血细胞的包囊作用均呈先增长后降低的趋势。在所有浓度毒液处理下，颗粒细胞的包囊指数在12 h时最强。未经小蜂毒液处理的浆血细胞包囊指数在15 h时达到最强，但经浓度为0.01~0.03 VRE/μL的毒液处理后浆血细胞的包囊指数在12 h时达到最强，而经浓度为0.04~0.10 VRE/μL的毒液处理后包囊指数在9 h时最强。白蛾周氏啮小蜂毒液对美国白蛾蛹颗粒细胞的吞噬作用强于浆血细胞。毒液对两种血细胞的吞噬能力均有明显的抑制作用，但毒液处理对浆血细胞的吞噬作用影响较小。【结论】白蛾周氏啮小蜂毒液可以抑制美国白蛾蛹颗粒细胞和浆血细胞的包囊作用和吞噬作用，且随着毒液浓度的增加，两种血细胞的免疫作用显著下降。

 内共生菌(endosymbionts)与其昆虫宿主的共生关系是普遍存在的，它们彼此相互依赖、相互影响、协同进化。近年来，关于昆虫内共生菌的研究多以半翅目(Hemiptera)和双翅目(Diptera)昆虫为主，但数量不断增加的研究表明鳞翅目(Lepidoptera)昆虫与其体内共生菌的互作模式和机制也正在受到越来越多的关注。鳞翅目昆虫种类多，分布广，主要作为植食者、传粉者在生态系统中发挥作用，而其绝大部分幼虫会对农林业生产造成巨大经济损失。鳞翅目昆虫体内共生菌群落多样性相对较低，主要以次生共生菌Wolbachia为主，少数也感染有Spiroplasma，Arsenophonus及Rickettsia。它们常呈严格的母系垂直传播，也会发生一定比例的水平传播，在宿主的生长发育、生殖调控、环境适应、遗传进化方面发挥重要作用。目前一般采用诊断性聚合酶链反应、高通量扩增子测序、宏基因组测序等方法检测内共生菌。但鳞翅目昆虫内共生菌研究领域存在一些难点，包括：大多数内共生菌无法离体培养；丰度较低的内共生菌的生物学功能难以确定。基于鳞翅目昆虫内共生菌的分布及该领域的难点，建议未来的研究重点应放在次生共生菌及其生物学功能上。

综述了烟粉虱 Bemisia tabaci对双生病毒的获取、传播及存留等方面的特性。烟粉虱最短的获毒和接种时间为15～30 min；双生病毒在烟粉虱体内可存留1至数周，有的终身存在。烟粉虱对双生病毒的传毒效率除了随其获毒及传毒时间的延长、传毒烟粉虱个体数量的增加以及病毒体浓度的增加而提高外，还与烟粉虱的龄期及性别有关。双生病毒除了在植物与粉虱之间直接传播外，还可通过烟粉虱交配及经卵携带的途径在烟粉虱个体和代别间进行传播。寄主植物、双生病毒的一些特殊蛋白以及烟粉虱内共生菌产生的GroEL蛋白，都可影响烟粉虱携带的双生病毒种类及传毒的可能性。双生病毒可对烟粉虱的发育、存活和生殖产生不利或有利的影响。雌成虫携带番茄黄化曲叶病毒（tomato yellow leaf curl virus, TYLCV）后，存活力和生殖力均下降； 而携带番茄斑驳病毒（tomato mottle virus, ToMoV）后，生殖力提高。此外，植物感染双生病毒后，其对烟粉虱的适合性可能提高。

【目的】明确弗氏柠檬酸杆菌 Citrobacter freundi和产酸克雷伯氏菌 Klebsiella oxytoca两种肠道共生细菌对斑翅果蝇 Drosophila suzukii生长发育和物质代谢的影响。【方法】以正常饲养条件下的斑翅果蝇、构建的斑翅果蝇无菌品系以及弗氏柠檬酸杆菌和产酸克雷伯氏菌单一共生菌感染的斑翅果蝇品系为材料，检测不同品系间斑翅果蝇的卵孵化率、3龄幼虫体重和化蛹率；测定不同斑翅果蝇品系3龄幼虫体内蛋白质、氨基酸、糖原和游离脂肪酸等代谢物的含量及超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和过氧化物酶(POD)的活力。【结果】正常饲养条件下的斑翅果蝇卵孵化率、3龄幼虫体重、化蛹率及3龄幼虫体内蛋白质的含量均高于其他斑翅果蝇品系，且无菌品系中的最低。弗氏柠檬酸杆菌和产酸克雷伯氏菌感染的斑翅果蝇品系3龄幼虫中的氨基酸和糖原含量均低于斑翅果蝇无菌品系和正常品系。弗氏柠檬酸杆菌感染斑翅果蝇品系3龄幼虫体内游离脂肪酸的含量较其他品系的也降到最低。弗氏柠檬酸杆菌和产酸克雷伯氏菌感染斑翅果蝇品系3龄幼虫体内POD活力显著高于无菌品系和正常品系，而CAT活力显著低于无菌品系。【结论】斑翅果蝇肠道中无肠道共生细菌时生长发育迟缓，在食物中分别添加弗氏柠檬酸杆菌和产酸克雷伯氏菌后可一定程度上促进斑翅果蝇的发育，这与添加肠道共生菌后斑翅果蝇体内代谢物的变化密切相关。

【目的】探究家蚕 Bombyx mori胚胎发育早期卵内糖代谢与滞育的关系。【方法】以家蚕二化性品种“秋丰”活化越年卵为材料，一部分于17℃暗催青，孵化后常规饲养，制备非滞育命运卵(ND)；另一部分于25℃明催青，孵化后常规饲养，制备滞育命运卵(DD)，再用盐酸溶液处理部分DD卵制备即时浸酸卵(IA)。在卵产下或浸酸后0, 2, 6, 12, 24, 48, 72和96 h分别取样，利用qRT-PCR测定家蚕卵中己糖激酶(hexokinase, HK)、磷酸果糖激酶(phosphofructokinase, PFK)、山梨醇脱氢酶(sorbitol dehydrogenase, SDH)、磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(phosphoenolpyruvate carboxykinase, PEPCK)和海藻糖酶(trehalase, TRE)5种糖代谢相关酶基因的mRNA表达水平，利用紫外-可见分光光度法测定家蚕卵中这5种酶的活性。【结果】家蚕糖酵解途径关键酶己糖激酶(BmHK)和磷酸果糖激酶(BmPFK)，以及糖分解代谢关键酶山梨醇脱氢酶(BmSDH-1)和海藻糖酶(BmTRE)在ND和IA中的mRNA水平和活性均普遍高于在DD中的；而糖异生途径相关的磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(BmPEPCK)在DD中的mRNA水平和活性均高于在ND和IA中的。【结论】结果提示，DD因胚胎滞育的需要，胚胎发育早期卵内糖代谢以能量和物质的贮存为主；而ND和IA由于胚胎发育进程较快，糖代谢以物质分解代谢为主。本研究初步揭示了家蚕卵内糖代谢与滞育的关系，有助于更好地理解家蚕滞育的分子机制。

【目的】探究家蚕 Bombyx mori miRNAs对丝素蛋白轻链基因（fibroin light chain gene， BmFib-L）和P25蛋白基因 BmP25表达的调控作用。【方法】分别以 BmFib-L和 BmP25 mRNA 3′UTR为靶序列，应用在线预测软件RNAhybrid从前期家蚕4和5龄幼虫后部丝腺（posterior silk gland）sRNA高通量测序获得的29个差异表达bmo-miRNAs中，筛选对 BmFib-L和 BmP25具有调控作用的候选bmo-miRNAs；采用半定量RT-PCR方法在mRNA水平分析候选bmo-miRNAs及其靶基因 BmFib-L和 BmP25在4和5龄幼虫期以及5龄第3天幼虫不同组织的表达水平；利用双荧光报告基因检测系统在家蚕细胞BmN中验证候选bmo-miRNAs对 BmFib-L和 BmP25表达的调控作用。【结果】筛选到一个在 BmFib-L和 BmP25 mRNA 3′UTR上都有靶位点的bmo-miR-375-3p（曾称bmo-miR-375*）。在后部丝腺中bmo-miR-375-3p和其预测靶基因 BmFib-L和 BmP25都有较高的表达水平，提示bmo-miR-375-3p具备调控 BmFib-L和 BmP25表达的时空条件。miR-375-3p重组表达载体与融合了 BmFib-L 3′UTR的萤火虫荧光素酶（luciferase）报告基因（ luc）表达载体共转染 BmN细胞，报告基因 luc的表达水平显著下降；而在miR-375-3p重组表达载体与融合了 BmP25 3′UTR的 luc表达载体共转染BmN细胞中报告基因 luc的表达水平下降不显著。【结论】miR-375-3p显著下调 BmFib-L基因的表达，而对 BmP25基因的表达无明显调控作用。

【目的】揭示铜绿丽金龟 Anomala corpulenta Motschulsky气味结合蛋白（odorant binding protein， OBP）基因的表达特征及其与特异信息化合物的结合特性。【方法】通过RT-qPCR测定了铜绿丽金龟AcorOBP1基因的时空表达谱；用原核表达系统对AcorOBP1进行表达纯化，然后利用荧光竞争结合实验测定了AcorOBP1蛋白与56种候选化合物的结合特征。【结果】 AcorOBP1基因在铜绿丽金龟卵、1龄幼虫和成虫等特定发育时期表达，在成虫触角中的表达量显著高于其他部位( P<0.05)。在被测的56种化合物中，AcorOBP1与53种化合物具有结合活性，其中结合能力较强的为小叶女贞 Ligustrum quihoui挥发物水杨酸甲酯和癸醇，解离常数分别为2.10±0.08和5.04±0.59 μmol/L。【结论】铜绿丽金龟AcorOBP1结合谱广，该蛋白可能在铜绿丽金龟对寄主植物小叶女贞的定位过程中发挥重要作用。

【目的】明确菜粉蝶Pieris rapae热激蛋白70(HSP70)基因的分子特性及其对杀虫剂胁迫的响应，为探索菜粉蝶HSP70基因在抵御杀虫剂胁迫中的功能提供前期基础。【方法】利用同源检索方法，从菜粉蝶转录组数据中鉴定HSP70基因；使用生物信息学方法分析HSP70基因的分子特性；采用实时荧光定量PCR技术分析HSP70基因在菜粉蝶不同发育阶段(2-5龄幼虫、蛹和雌雄成虫)、4龄幼虫不同组织(中肠、马氏管、脂肪体和体壁)以及LD₂₀剂量高效氯氟氰菊酯(0.12 ng/μL)和氯虫苯甲酰胺(1.04 ng/μL)胁迫下4龄幼虫体内的表达谱。【结果】从菜粉蝶转录组中鉴定了3个HSP70基因(PrHsp70-1, PrHsp70-2和PrHsp70-3) (GenBank登录号分别为MW691114, MW691115和MW691116)，它们分别编码628, 630和653个氨基酸，分子量分别为68.7, 69.2和71.7 kD。生物信息学分析结果表明，3个PrHSP70蛋白均为胞质蛋白，且均含有HSP70家族的特征序列。PrHsp70-1和PrHsp70-2无内含子，而PrHsp70-3含有1个内含子。随着幼虫龄期的增加，PrHsp70-1和PrHsp70-2的表达量也不断上调，但在蛹期和成虫期下调；PrHsp70-3在供试的不同发育阶段样本中的表达量无显著差异。PrHsp70-1高量表达于幼虫脂肪体，PrHsp70-2高量表达于幼虫中肠，PrHsp70-3在幼虫体壁和脂肪体中表达量均较高。LD₂₀剂量高效氯氟氰菊酯和氯虫苯甲酰胺均能诱导3个PrHsp70基因显著上调表达，但不同基因的响应速度有差异；此外，LD₂₀剂量高效氯氟氰菊酯处理24 h后，PrHsp70-3显著下调表达。【结论】PrHsp70基因可能在菜粉蝶生长发育以及抵御杀虫剂胁迫中均有重要作用。

【目的】为明确保幼激素受体Methoprene-tolerant基因 AsMet在中华按蚊 Anopheles sinensis体内的时空表达模式，并探究其对中华按蚊生殖调控和发育的影响。【方法】基于中华按蚊转录组数据，采用RACE克隆 AsMet全长cDNA序列并进行分子特征分析；利用qPCR分析 AsMet在不同发育阶段(蛹和雌成蚊)、 3日龄雌成蚊不同组织［头、胸、腹部前端(腹部前3节)、腹部后端(腹部剩余部分)、中肠、马氏管、脂肪体、卵巢和体壁］中的表达量；通过向中华按蚊末期雌蛹显微注射ds AsMet进行RNAi后，测定 AsMet, AsKr-h1和 AsVg的表达量，并观测雌成蚊卵巢发育情况、羽化率、产卵量和卵孵化率。【结果】中华按蚊 AsMet(GenBank登录号: OR783325)的cDNA序列全长6 841 bp，开放阅读框(open reading frame，ORF)长3 159 bp，编码1 052个氨基酸，预测其分子质量为114.46 kD，等电点为6.63。AsMet有4个保守结构域，包括1个螺旋-环-螺旋结构域、 2个PAS结合域和1个C末端保守基序。AsMet与冈比亚按蚊 An. gambiae、埃及伊蚊 Aedes aegypti和尖音库蚊 Culex pipiens的Met聚为一支。 AsMet在化蛹后30 h和成蚊大部分阶段显著高表达，且在雌成蚊头和胸部中显著高表达，在中肠、马氏管和卵巢中呈现低表达。显微注射ds AsMet到末期雌蛹后24, 48和72 h时， AsMet的表达量较显微注射ds EGFP的对照组分别下调70.05%, 41.05%和68.64%，羽化率低于显微注射ds EGFP且在雌蚊交配吸血后卵巢发育不良，产卵量比正常注射ds EGFP的低67.58%，卵孵化率比正常注射ds EGFP的下降93.10%。【结论】 AsMet表达被降低后影响中华按蚊卵巢的正常发育且使产卵量和孵化率显著降低。研究结果为深入研究JH调控中华按蚊生殖发育机理奠定基础，对保幼激素信号通路和昆虫生殖调控的分子机制的认识提供理论依据。

 

白蜡吉丁柄腹茧蜂Spathius agrili Yang是我国天津地区寄生白蜡窄吉丁幼虫的一种重要天敌。本研究通过林间调查并结合室内观察，测定了该寄生蜂在不同营养条件下的存活时间和不同时期的产卵量，调查了不同寄主大小对寄生蜂后代生长发育的影响，以及寄生蜂对不同深度树皮下的寄主利用情况。结果表明：不同营养条件下白蜡吉丁柄腹茧蜂的存活时间差异很大，补充20％蜂蜜水的成蜂存活时间明显延长，最长可达3个月。相同条件下雌蜂的存活时间比雄蜂略长。在补充营养的条件下，茧蜂的产卵时间最长可达8周，产卵的高蜂在羽化后第2周前后，平均每雌每周产卵量在整个产卵期内基本保持在8～12粒上下，没有大的波动。茧蜂低龄幼虫也可能分泌毒素主动攻击寄主，提高了寄生蜂后代的生存能力。寄主个体大，营养量也大，寄生其上的茧蜂幼虫成功完成发育的数量随之增加，表明寄主营养资源的多少直接影响到寄生蜂后代的生长发育和存活。白蜡吉丁柄腹茧蜂对1～6.5 mm树皮深度范围内的适龄寄主幼虫均能够寄生利用，约92％的被寄生白蜡窄吉丁幼虫个体分布于1～4 mm深度的树皮下，在3 mm厚的树皮下分布的数量最多。茧蜂数量与树皮深度大致上呈抛物线关系，理论上在树皮深度为3.97 mm处茧蜂分布数量最多。

采用室内测定并结合林间实地调查的方法，研究了新发现的寄生于蛀干害虫白蜡窄吉丁的外寄生蜂——白蜡吉丁肿腿蜂 Sclerodermus pupariae Yang et Yao的生物学特性及其人工繁殖技术。结果表明，白蜡吉丁肿腿蜂外寄生于白蜡窄吉丁的幼虫和蛹及预蛹，是自然控制该害虫的一种重要寄生蜂，自然寄生率为13.9%左右。该蜂在天津1年发生5代，世代重叠明显，寿命长。白蜡吉丁肿腿蜂的卵、幼虫、茧蛹期和全世代的发育起点温度分别为（16.89±0.79）℃，（17.03±1.42）℃，（16.90±1.68）℃和（15.31±0.47）℃。有效积温分别为（33.82±4.13）日·度、（49.11±7.93）日·度、（128.88±27.87）日·度和（277.00±14.15）日·度。雌性成蜂易于低温保存，对寄主有较强的搜索力和攻击力。繁蜂寄主容易大量获得，是生物防治白蜡窄吉丁的重要理想天敌之一。